抗生素作用下群体感应系统及其相关sRNA对接合的调控研究

发布时间：2021-08-16 12:35

　　目的:铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）是一种革兰阴性非发酵菌,是临床常见的条件致病菌,可以引起呼吸道、泌尿道、皮肤、腹腔和血液等多个部位的感染。且PA在抗生素的影响下可以通过突变等机制产生获得性耐药,使临床治疗面临极大的困境。而质粒介导的耐药基因水平转移是PA产生耐药性的重要机制。细菌在生长过程中向周围释放特定的信号分子,以感知菌群密度变化,当信号分子随着细菌密度增加而积累到一定浓度,达到特定阈值时,信号分子会与受体蛋白相结合,使受体蛋白构象或基团发生变化,启动一系列基因表达,进而调节细菌的群体行为,这种现象被称为群体感应（Quorum sensing,QS）。在革兰阴性杆菌中存在以酰基高丝氨酸内酯（acyl homoserine lactone,AHL）类物质作为信号分子的QS系统,AHL可以与细菌的LuxR类蛋白受体结合,实现对下游一系列基因的调控。有些细菌例如大肠埃希菌、霍乱弧菌等基因组内不含有QS系统,不能产生AHL类信号分子,但是却表达LuxR类蛋白同源分子—SdiA蛋白,可以与周围环境中的AHL结合,同时SdiA也是转录因子,可以通过Sdi... 

【文章来源】：广州中医药大学广东省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

平板筛选法检测接合反应模型示意图

抗生素作用下群体感应系统及其相关 sRNA 对接合的调控研究 检验分析只有两个实验组的组间差异的显著性，采用单因素的方差分析检验实验组的组间差异的显著性。所有统计分析具有显著统计学差异的检验标05。实验结果1.3.1 药敏实验结果四株菌的药敏结果见图 1-2，Gm 对 PAO1、PAO1ΔlasI、PAO1ΔrhlI 最低抑为 2μg/mL（三株菌结果相同，图 1-2 只显示 PAO1 的药敏结果），Gm 对 EC6菌浓度为 4μg/mL（肉眼观察的结果与酶标仪测量的结果一致）。根据 2017 年，四株菌均为 Gm 敏感株。

图 1-2 受体菌 Gm 药敏结果.3.2 抗生素干预浓度确定及其对接合效率的影响不同浓度抗生素的干预下 PAO1、EC600 生长情况见图 1-3。可以看到将 Gm 的.125μg/mL 提高至 0.25μg/mL 时 PAO1 的浓度呈断崖式下降，而当 Gm 的浓μg/mL 提高至 2μg/mL 时 EC600 的浓度亦呈断崖式下降。本次接合实验是为外界的抗生素的对受体菌形成生存压力时，是否会对接合效率产生影响。因选择能抑制大部分 PAO1 生长的 Gm 浓度即 0.3μg/mL，作为 SM10λπ-PAO1πΔsdiA-PAO1 接合体系中实验组的抗生素干预浓度，选择能抑制大部分受00 生长的 Gm 浓度即 2μg/mL，作为 SM10λπ-EC6OO 接合体系中实验组的抗浓度。


本文编号：3345682