酸敏感超支化聚酰胺基因载体的设计、制备及转染性能研究

发布时间：2021-08-28 07:28

　　基因治疗作为遗传性疾病治疗的一种有效方法,随着不断的研究与发展,其在获得性疾病（如癌症）的治疗方面也展现了较大的前景和潜力。基因治疗是将新的基因导入细胞,通过修复或添加基因,以治疗疾病。基于此,基因治疗的关键在于得到一种合适的基因载体,可以安全高效地将外源正常基因导入到靶细胞。病毒载体作为一种可以高效转染的基因载体,因其具有免疫原性等安全问题,大大限制了其发展与应用;而非病毒载体因其良好的生物安全性、易制备、价格低等优点也得到了很好的发展,例如阳离子脂质和阳离子聚合物等,其在基因治疗方面具有很好的潜力。尽管阳离子聚合物作为一种成功的基因传递载体已经得到广泛的应用,但由于以下的障碍,其临床应用仍然受到限制。阳离子类型聚合物面临的障碍主要包括其毒性、内涵体逃逸、血液相容性、靶点有效的细胞内传递、复合物释放DNA以及最终的基因表达。早在30年前,阳离子聚合物作为基因载体已有报道,并且随着大量研究者的探究与发现,阳离子聚合物已经作为一种不可或缺的基因载体应用在基因治疗上。聚阳离子与带负电的DNA通过正负电荷吸引形成纳米复合物,从而使得带负电的DNA可以安全有效地进入到目的细胞内起到治疗作用。作... 

【文章来源】：安徽大学安徽省 211工程院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１?ＨＰＯＥＡＭＡＭ的制备和体外基因传递的图解??Ｆｉ．?１－１?Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅｒｅａｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＨＰＯＥＡＭＡＭ?ａｎｄｅｎｅ?ｄｅｌｉｖｅｒｉｎ?ｖｉｔｒｏ??

２．５．２?ＨＰＯＥＡＭＡＭ?的１Ｈ?ＮＭＲ?和?ｌ３Ｃ?ＮＭＲ?谱图分析??Ｎ－氨乙基哌嗪和丙烯酰原酸酯单体反应，在２０?°Ｃ生成线性聚合物，在５０条件下生成超支化聚合物。反应原理是：当聚合在２０?°Ｃ的温度下进行时，

２．５．３超支化聚酰胺的光谱分析??使用荧光光谱仪和荧光显微镜，研宄超支化聚酰胺（ＨＰＯＥＡＭＡＭ）的荧光??特性，采用线性聚合物（ＬＰＯＥＡＭＡＭ）作为对照。由图２－４?（ａ）可知，其发射??光谱和激发波长相关。当激发波长为３３０－３８５ｎｍ时，发射蓝光，激发波长为??５１０－５９０?ｎｍ时，发射微弱的红光，激发波长介于两者之间时，发射绿光，而线??性聚合物均不发光。另外，在Ｅｘ＝４００ｎｍ时，超支化ＰＯＥＡＭＡＭ在４８０ｎｍ处??有着强烈的荧光发射峰（Ｘｅｘ?＝?４００?ｎｍ）。相反，线性ＰＯＥＭＡＭ水溶液并无这样??的发射峰。这可能是因为超支化聚合物中带有孤对电子的三级氮，可以产生荧光。??因此推断超支化聚合物被成功的合成出来，并且其具有荧光特性。??３?ｎｏ?ｆｉｌｔｅｒ?３３０－３８５?ｎｍ?４６０－４９０?ｎｍ?５１０－５９０?ｎｍ???ＨＰＯＥＡＭＡＭ??＾??ＬＰＯＥＡＭＡＭ??Ｌ＇?Ａ??Ｉ１?ＩＸ??ｚ?［??，??．?ｂ?．??４００?５００?６００?７００??Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ?（ｎｍ）??图２－４超支化ＰＯＥＡＭＡＭ的荧光显微镜成像图（ａ）和发射光谱图（ｂ）??Ｆｉｇ．?２－４?Ｏｐｔｉｃａｌ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?Ｈｙｐｅｒｂｒａｎｃｈｅｄ?ＰＯＥＡＭＡＭ?（ａ）

【参考文献】：
期刊论文
[1]肿瘤基因治疗的研究进展[J]. 周冰,陈文斌.  齐鲁药事. 2009(02)
[2]基因治疗及其研究[J]. 陶铭.  生物学通报. 2008(04)



本文编号：3368086