基于杂交链式反应及纳米花的大肠杆菌新型检测方法

发布时间：2021-09-01 13:57

　　大肠杆菌在自然界中分布广泛,主要分为非致病及致病型大肠杆菌。典型的致病型大肠杆菌为Escherichia coli O157:H7,一旦感染了此菌,可对人们造成严重危害。传统大肠杆菌检测方法,存在检测耗时长、所需仪器复杂、对检测人员要求高,成本高。因此,建立大肠杆菌的新型快速、简便的检测方法具有重要意义。近年来,由于分子生物学的高速发展,带动了新型病原菌检测方法的革新,为其提供了更多方便快捷、灵敏特异的检测手段。其中显色及试纸条作为生物监测领域常见的信号输出方式,具有裸眼可视、方便读取等诸多优点。因此,本研究基于免疫层析试纸条及显色反应,结合不同分子生物学检测技术,成功建立了以下方法:（1）基于双链特异性核酸酶及杂交链式反应结合免疫层析试纸条用于大肠杆菌的可视化检测本研究基于双链特异性核酸酶（Duplex Specific Nuclease,DSN）及杂交链式反应（Hybridization Chain Reaction,HCR）,成功建立了一种简单、快速、灵敏特异的新型大肠杆菌检测方法。检测原理为,利用DSN酶的只切DNA-RNA双链核酸中的DNA链,保留RNA链的特性,反复利用检测... 

【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

链置换反应结合电化学信号检测方法原理图

1-1 链置换反应结合电化学信号检测方法原理图gram of chain displacement reaction combined withdetection method光法的检测方法n 等人运用链置换技术结合荧光法，成功检测了特异性较好[38]。原理如图 1-2 所示，a 作为检测会成功的被靶标核酸打开，被打开的短链核酸会的探针结合，导致荧光基团的猝灭，发生信号的测靶标核酸。

1-3 链置换反应结合色度法的检测原理图[am of chain displacement reaction combined w的优势理为：利用人工设计的核酸引物间的竞争能酸片段被竞争能力相对较强的核酸片段被替酸反应相比，链置换反应可将 RNA 信号直程，达到信号传递的作用。同时，链置换反如此多的优点，近年来，已被不同领域所应。ybridization Chain Reaction, HCR）技术的应bridization Chain Reaction，HCR）是 Dirks常温即可进行，无需传统 PCR 的变温过程

【参考文献】：
期刊论文
[1]Simultaneous Detection of 13 Key Bacterial Respiratory Pathogens by Combination of Multiplex PCR and Capillary Electrophoresis[J]. JIANG Lu Xi,REN Hong Yu,ZHOU Hai Jian,ZHAO Si Hong,HOU Bo Yan,YAN Jian Ping,QIN Tian,CHEN Yu.  Biomedical and Environmental Sciences. 2017(08)
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本文编号：3377103