髓过氧化物酶（MPO）荧光免疫层析方法的建立及初步应用
发布时间：2021-09-23 17:13
目的:为更好的评价冠心病的发病风险,选取系统炎症和氧化应激标志物髓过氧化物酶（myelopexoxidase,MPO）作为研究对象,建立人血中MPO的荧光免疫层析定量检测方法,为临床早期筛查及辅助诊断冠心病提供一种灵敏度高,特异性好,操作简便的快速检测方法。方法:1.利用生物信息学技术分析MPO蛋白B细胞表位,筛选两条特异性的MPO多肽序列（A、B）,合成该多肽,采用碳二亚胺法分别与BSA、OVA偶联制备多肽偶联物,透析后对多肽偶联物进行紫外光谱扫描法及SDS-PAGE鉴定。2.利用上述制备的MPO（A）-BSA和MPO（B）-BSA多肽偶联物分别免疫小鼠,经细胞融合、克隆化、亚型鉴定、小鼠腹腔诱生及蛋白纯化等过程制备MPO单克隆抗体。3.利用荧光免疫层析技术,对原材料及工艺条件进行优化研究,对线性范围、灵敏度、精密性等功能性指标进行评价研究,初步建立MPO荧光免疫层析定量检测方法。结果:1.成功制备了MPO（A）-BSA、MPO（B）-BSA和MPO（A）-OVA、MPO（B）-OVA多肽偶联物。2.筛选出6株IgG1亚型的阳性细胞株,并制备6株单克隆抗体,其编号分别为:2A1,3C...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
EDC偶联原理
试纸条判断结果
MPO多肽-BSA和BSA的紫外光谱图
【参考文献】：
期刊论文
[1]甲状旁腺激素荧光免疫层析定量检测技术的研制及应用研究[J]. 朱利国,邹贤,范俊,周锦,黄飚. 现代免疫学. 2018(01)
[2]牛结合珠蛋白α链单克隆抗体制备及辣根过氧化物酶标记[J]. 郑晓燕,赵达,户长春,王彩宏,王虹,范长友,代亚楠,赵喜文,孙东波. 黑龙江八一农垦大学学报. 2017(05)
[3]基于荧光免疫层析法建立甲型流感病毒快速检测技术的研究[J]. 常晓松,刘东泽,何纬,赵书阁,陈肖潇,史蕾,余华丽,何建伟,樊强,王志杰. 成都医学院学报. 2017(05)
[4]利奈唑胺单抗的制备及其荧光免疫层析检测法的建立[J]. 沈敏敏,杨志行,郭彦飞,杨水新. 药物分析杂志. 2017(07)
[5]时间分辨荧光微球免疫层析技术定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ的实验研究[J]. 周衍,范俊,蒋叶华,张珏,张艺,傅利新,黄飚. 第三军医大学学报. 2017(18)
[6]不稳定型心绞痛患者血浆蛋白标记物的蛋白质组学筛选[J]. 胡水旺,沈安娜,郑德仲,黄敬,胡兆霆. 解放军医学杂志. 2017(06)
[7]热休克蛋白90α荧光免疫层析检测方法的建立[J]. 王云龙,李娜,李玉林,王继创,程蕾,高玉红. 中国免疫学杂志. 2017(05)
[8]中医治疗冠心病心绞痛的研究现状[J]. 封亚丽,何红涛,苗华为,段慧杰,耿彬,张铁军,董燕平. 临床合理用药杂志. 2017(11)
[9]髓过氧化物酶/对氧磷酶-1对高密度脂蛋白功能及冠心病危险评估的预测意义[J]. 黄水英,李家富. 当代医学. 2017(07)
[10]髓过氧化物酶基因多态性与急性白血病及急性淋巴细胞白血病易感性Meta分析[J]. 柴婷婷,田丽红,黄劲龙,沈建箴. 临床血液学杂志. 2016(05)
博士论文
[1]MPO基因多态性、MPO蛋白与冠心病的相关性研究[D]. 陈璐瑶.中南大学 2014
[2]血清髓过氧化物酶检测方法的建立及其在冠心病危险分层及预测急性冠脉事件的应用研究[D]. 刘成桂.重庆医科大学 2012
硕士论文
[1]肿瘤筛查用（热休克蛋白90α）快速检测试剂的研制[D]. 李娜.郑州大学 2017
[2]抗人TK1单克隆抗体的制备及化学发光检测方法的初步建立[D]. 赵二霞.郑州大学 2017
[3]基于家蚕—杆状病毒表达系统制备人髓过氧化物酶的研究[D]. 陈俏梅.江苏大学 2016
[4]髓过氧化物酶（MPO）不同检测样本参考区间的临床研究[D]. 王永博.昆明医科大学 2016
[5]NT-proBNP单克隆抗体的研制及ELISA定量检测方法的建立[D]. 葛新杰.郑州大学 2015
[6]冠心病患者介入治疗前后髓过氧化物酶水平的早期变化及意义[D]. 王慧洁.南方医科大学 2014
[7]牛副流感病毒3型血清学调查及其单克隆抗体的制备与应用[D]. 王海勇.中国农业科学院 2014
[8]新型血清髓过氧化物酶电化学免疫传感器的研究[D]. 刘蓓.重庆医科大学 2012
[9]心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）的原核表达、纯化及其单克隆、多克隆抗体的制备与应用研究[D]. 丛珊.重庆师范大学 2012
[10]ET、NO、MPO在痛风中的表达及其临床意义[D]. 李影.河北医科大学 2012
本文编号：3406099
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
EDC偶联原理
试纸条判断结果
MPO多肽-BSA和BSA的紫外光谱图
【参考文献】：
期刊论文
[1]甲状旁腺激素荧光免疫层析定量检测技术的研制及应用研究[J]. 朱利国,邹贤,范俊,周锦,黄飚. 现代免疫学. 2018(01)
[2]牛结合珠蛋白α链单克隆抗体制备及辣根过氧化物酶标记[J]. 郑晓燕,赵达,户长春,王彩宏,王虹,范长友,代亚楠,赵喜文,孙东波. 黑龙江八一农垦大学学报. 2017(05)
[3]基于荧光免疫层析法建立甲型流感病毒快速检测技术的研究[J]. 常晓松,刘东泽,何纬,赵书阁,陈肖潇,史蕾,余华丽,何建伟,樊强,王志杰. 成都医学院学报. 2017(05)
[4]利奈唑胺单抗的制备及其荧光免疫层析检测法的建立[J]. 沈敏敏,杨志行,郭彦飞,杨水新. 药物分析杂志. 2017(07)
[5]时间分辨荧光微球免疫层析技术定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ的实验研究[J]. 周衍,范俊,蒋叶华,张珏,张艺,傅利新,黄飚. 第三军医大学学报. 2017(18)
[6]不稳定型心绞痛患者血浆蛋白标记物的蛋白质组学筛选[J]. 胡水旺,沈安娜,郑德仲,黄敬,胡兆霆. 解放军医学杂志. 2017(06)
[7]热休克蛋白90α荧光免疫层析检测方法的建立[J]. 王云龙,李娜,李玉林,王继创,程蕾,高玉红. 中国免疫学杂志. 2017(05)
[8]中医治疗冠心病心绞痛的研究现状[J]. 封亚丽,何红涛,苗华为,段慧杰,耿彬,张铁军,董燕平. 临床合理用药杂志. 2017(11)
[9]髓过氧化物酶/对氧磷酶-1对高密度脂蛋白功能及冠心病危险评估的预测意义[J]. 黄水英,李家富. 当代医学. 2017(07)
[10]髓过氧化物酶基因多态性与急性白血病及急性淋巴细胞白血病易感性Meta分析[J]. 柴婷婷,田丽红,黄劲龙,沈建箴. 临床血液学杂志. 2016(05)
博士论文
[1]MPO基因多态性、MPO蛋白与冠心病的相关性研究[D]. 陈璐瑶.中南大学 2014
[2]血清髓过氧化物酶检测方法的建立及其在冠心病危险分层及预测急性冠脉事件的应用研究[D]. 刘成桂.重庆医科大学 2012
硕士论文
[1]肿瘤筛查用（热休克蛋白90α）快速检测试剂的研制[D]. 李娜.郑州大学 2017
[2]抗人TK1单克隆抗体的制备及化学发光检测方法的初步建立[D]. 赵二霞.郑州大学 2017
[3]基于家蚕—杆状病毒表达系统制备人髓过氧化物酶的研究[D]. 陈俏梅.江苏大学 2016
[4]髓过氧化物酶（MPO）不同检测样本参考区间的临床研究[D]. 王永博.昆明医科大学 2016
[5]NT-proBNP单克隆抗体的研制及ELISA定量检测方法的建立[D]. 葛新杰.郑州大学 2015
[6]冠心病患者介入治疗前后髓过氧化物酶水平的早期变化及意义[D]. 王慧洁.南方医科大学 2014
[7]牛副流感病毒3型血清学调查及其单克隆抗体的制备与应用[D]. 王海勇.中国农业科学院 2014
[8]新型血清髓过氧化物酶电化学免疫传感器的研究[D]. 刘蓓.重庆医科大学 2012
[9]心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）的原核表达、纯化及其单克隆、多克隆抗体的制备与应用研究[D]. 丛珊.重庆师范大学 2012
[10]ET、NO、MPO在痛风中的表达及其临床意义[D]. 李影.河北医科大学 2012
本文编号：3406099
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