CAPE通过p38 MAPK/NF-κB通路抑制小胶质细胞活化缓解神经病理性疼痛的研究

发布时间：2021-09-24 00:41

　　第一部分:CAPE通过p38 MAPK/NF-κB通路抑制小胶质细胞活化缓解神经病理性疼痛目的:观察咖啡酸苯乙酯（caffeic acid phenethyl ester,CAPE）对慢性坐骨神经缩窄性损伤（chronic constrictive injury,CCI）小鼠脊髓小胶质细胞中p38MAPK/NF-κB信号转导通路、细胞活化和下游炎症因子的影响,研究CAPE缓解神经病理性疼痛的可能作用机制,为临床的合理应用提供依据。方法:选取雄性CD-1小鼠,6-8周龄,体重18-22g,采用CCI方法制备小鼠神经病理性疼痛模型,通过疼痛行为学评估指标—小鼠机械性缩足反射阈值,观察CAPE对小鼠神经病理性疼痛行为学的影响;采用免疫印迹和免疫荧光法检测CAPE对脊髓小胶质细胞活化程度的影响;采用免疫印迹法检测CAPE对脊髓小胶质细胞中p38 MAPK及NF-κB p65的影响;采用RT-PCR技术检测CAPE对小胶质细胞内促炎性细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）mRNA表达的影响。结果:CCI可诱导小鼠机械性缩足反射阈值的下降,上调脊髓中p38 MAPK和NF-κB p65磷酸化... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：82 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

不同剂量CAPE对CCI小鼠机械性缩足反射阈值的影响

图 2 CAPE 抑制 CCI 小鼠脊髓中小胶质细胞激活注：图 2A 和图 2B：腹腔内注射 CAPE（25mg/kg）对小鼠脊髓中小胶质细胞标记物 IBA-1表达水平的影响。图 2C 和图 2D：免疫荧光实验提示各组小鼠脊髓中小胶质细胞标记物IBA-1 的表达情况。免疫荧光的定量表示为脊髓中的平均荧光像素。CCI+CAPE（25mg/kg）组在 CCI 术后第 15 天至第 21 天每天连续腹腔内注射 CAPE（25mg/kg），最后一次给药 60分钟后收集腰椎（L1-L6）脊髓组织进行分析，每组 4 例。与 sham 组比较，**P<0.01；与CCI 组比较，##P<0.01。3.CAPE 抑制 CCI 小鼠脊髓小胶质细胞中 p38 MAPK 和 NF-κB p65 磷酸化研究表明小胶质细胞中的 p38 MAPK 和 NF-κB p65 在细胞内信号转导中起着重要作用，在神经病理性疼痛发生和维持中也起着重要作用。因此，我们选用免疫印迹的实验方法，观察 CAPE（25mg/kg）在 CCI 模型对脊髓中 p38 MAPK 的作用。研究结果如图 3A 所示，与 sham 组比较，CCI 组小鼠脊髓中 p38 MAPK 磷酸化水平显著升高，而连续给予 CAPE

南京医科大学博士学位论文（25mg/kg）后显著降低了 CCI 小鼠脊髓中 p38 MAPK 磷酸化水平。随后观察 CAPE 对小鼠脊髓中 NF-κB p65 磷酸化的影响。研究结果如图3B 所示，与 sham 组比较，CCI 组小鼠脊髓中 NF-κB p65 磷酸化水平升高，而 CAPE 则降低了 CCI 小鼠脊髓中 NF-κB p65 磷酸化水平。此外，CAPE 单独给药对 sham 组小鼠脊髓中 p38 MAPK 和 NF-κB p65 的含量水平及其磷酸化水平没有明显影响。


本文编号：3406749