Nrf2基因敲除对急性放射性肠损伤的作用研究
发布时间：2021-09-29 19:01
目的研究Nrf2基因敲除对C57BL/6J小鼠放射性肠损伤的作用,并初步阐明Nrf2和NF-κB在放射性肠损伤中的作用机制。方法本研究采用13 Gy 137Cs γ射线腹部照射野生型和Nrf2基因敲除型C57BL/6J小鼠,建立放射性肠损伤模型;观察小鼠照射后30天存活率,并记录体重变化;测定小鼠的脾脏和胸腺等免疫器官指数和外周血细胞数量;通过碱性“彗星”实验检测外周血淋巴细胞DNA断裂损伤程度;通过HE染色和TUNEL染色免疫荧光实验检测小肠上皮完整性;采用免疫组织化学实验检测小肠组织Lgr5+干细胞及其子细胞的数量;采用免疫组织化学实验、蛋白免疫印迹实验和实时定量PCR法检测小肠组织部位NF-κBp65在细胞核内的磷酸化水平和NF-κB下游靶基因的表达水平。结果（1）存活率:与野生型小鼠相比,Nrf2基因敲除型小鼠腹部照射后30天存活率升高,全身照射后30天存活率降低。（2）免疫功能:腹部照射后Nrf2基因敲除型小鼠的胸腺指数和外周血淋巴细胞数高于野生型小鼠;Nrf2基因敲除型小鼠的外周血淋巴细胞DNA损伤程度轻于野生型小鼠。（3）小肠组织肠上皮完整性:腹部照射后野生型小鼠小肠组织...
【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?Ａ＾／２基因敲除后受照射小鼠的３０天存活率??Ａ．?基因敲除后腹部照射小鼠的３０天存活率??
??数及脾指数的变化。如图２Ａ所示，基因敲除型小鼠和野生型小鼠在照射后各个??时间点的脾指数均无明显差异。野生型小鼠的胸腺指数在照射后２ｄ内持续下降，在??照射后３．５?ｄ之后趋于平稳；ｉＶ％基因敲除型小鼠的胸腺指数在照射后第Ｉｄ下降，在??照射后２ｄ以后趋于平稳；基因敲除型小鼠的胸腺指数在照射后２ｄ、３．５?ｄ、４?ｄ??和５?ｄ各时间点明显高于野生型小鼠（图２Ｂ）。结果表明，基因敲除减轻了由腹??部照射引起的小鼠胸腺免疫器官的损伤。??Ａ?Ｂ??Ｉｆ５］?＊ＮｒｆＺ＾－?§?｜３ｎ?＊Ｎｒｆ２：＇??１?１?％?？?〇?１?＼?？?Ｎｒｆ２＾＋??Ｉ：??Ｓｔ，?ｉｌ１－??ｗ?－?〇Ｊ?????????？?＾?ＩＪ?．?，?，?，?
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[2]慢性放射性肠炎并肠梗阻的腹腔镜手术治疗[J]. 王剑,李幼生,姚丹华,王芗端,申培培,黎介寿. 中华腔镜外科杂志(电子版). 2013(01)
[3]Gastrointestinal radiation injury:Prevention and treatment[J]. Abobakr K Shadad,Frank J Sullivan,Joseph D Martin,Laurence J Egan. World Journal of Gastroenterology. 2013(02)
[4]放射性肠损伤发病机制研究进展[J]. 李明,曹建平,张学光. 中华放射医学与防护杂志. 2012 (04)
[5]营养支持在克罗恩病治疗中的效果观察[J]. 左小霞,王晶,张晔. 人民军医. 2010(11)
[6]Significance of endothelial dysfunction in the pathogenesis of early and delayed radiation enteropathy[J]. Marjan Boerma,Martin Hauer-Jensen. World Journal of Gastroenterology. 2007(22)
本文编号：3414286
【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?Ａ＾／２基因敲除后受照射小鼠的３０天存活率??Ａ．?基因敲除后腹部照射小鼠的３０天存活率??
??数及脾指数的变化。如图２Ａ所示，基因敲除型小鼠和野生型小鼠在照射后各个??时间点的脾指数均无明显差异。野生型小鼠的胸腺指数在照射后２ｄ内持续下降，在??照射后３．５?ｄ之后趋于平稳；ｉＶ％基因敲除型小鼠的胸腺指数在照射后第Ｉｄ下降，在??照射后２ｄ以后趋于平稳；基因敲除型小鼠的胸腺指数在照射后２ｄ、３．５?ｄ、４?ｄ??和５?ｄ各时间点明显高于野生型小鼠（图２Ｂ）。结果表明，基因敲除减轻了由腹??部照射引起的小鼠胸腺免疫器官的损伤。??Ａ?Ｂ??Ｉｆ５］?＊ＮｒｆＺ＾－?§?｜３ｎ?＊Ｎｒｆ２：＇??１?１?％?？?〇?１?＼?？?Ｎｒｆ２＾＋??Ｉ：??Ｓｔ，?ｉｌ１－??ｗ?－?〇Ｊ?????????？?＾?ＩＪ?．?，?，?，?
图３?７Ｖ＾／２基因敲除后腹部照射小鼠外周血细胞的数量??Ａ．＃基因敲除后腹部照射小鼠的白细胞数??Ｂ．Ａ＾／２基因敲除后腹部照射小鼠的血小板数??Ｃ．?Ａ／（／２基因敲除后腹部照射小鼠的淋巴细胞百分数??注：＊＊＊Ｐ＜０．００１，Ａ＾／２基因敲除型小鼠ｖｓ野生型小鼠。??３．?ＴＶｒ／２基因敲除对腹部照射后小鼠外周血淋巴细胞ＤＮＡ损伤的影响??电离辐射可诱发ＤＮＡ发生单链断裂和双链断裂。“彗星”实验，又称单细胞凝??胶电泳，是在单个细胞水平上有效检测ＤＮＡ断裂损伤程度的方法［３８－３９］。受到损伤??的细胞呈“彗星状”拖尾，拖尾越严重表示ＤＮＡ发生的断裂越严重。“彗星”尾部??ＤＮＡ含量、尾矩和Ｏｌｉｖｅ尾矩代表细胞发生ＤＮＡ断裂的程度。本实验观察了小鼠在??接受１３?Ｇｙ腹部照射后小鼠外周血淋巴细胞ＤＮＡ的损伤。如图４Ａ所示，腹部照射后??小鼠淋巴细胞均发生“彗星状”拖尾，表明淋巴细胞ＤＮＡ受到损伤，野生型小鼠淋??巴细胞核ＤＮＡ的“彗星状”拖尾较Ａ／设基因敲除型小鼠严重。野生型小鼠的尾部ＤＮＡ??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[2]慢性放射性肠炎并肠梗阻的腹腔镜手术治疗[J]. 王剑,李幼生,姚丹华,王芗端,申培培,黎介寿. 中华腔镜外科杂志(电子版). 2013(01)
[3]Gastrointestinal radiation injury:Prevention and treatment[J]. Abobakr K Shadad,Frank J Sullivan,Joseph D Martin,Laurence J Egan. World Journal of Gastroenterology. 2013(02)
[4]放射性肠损伤发病机制研究进展[J]. 李明,曹建平,张学光. 中华放射医学与防护杂志. 2012 (04)
[5]营养支持在克罗恩病治疗中的效果观察[J]. 左小霞,王晶,张晔. 人民军医. 2010(11)
[6]Significance of endothelial dysfunction in the pathogenesis of early and delayed radiation enteropathy[J]. Marjan Boerma,Martin Hauer-Jensen. World Journal of Gastroenterology. 2007(22)
本文编号：3414286
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