基于四面体纳米结构的DNA甲基化电化学传感分析研究

发布时间：2021-10-16 16:20

　　目的:DNA甲基化相关因子在恶性肿瘤等疾病的诊断、治疗及预后推断中具有重要意义。传统DNA甲基化检测方法通常依赖大型检测设备,步骤较为繁琐,而电化学生物传感检测技术是近年来的研究热点,是一种高灵敏、低价格、易操作的检测技术。本研究的目的在于,基于电沉积纳米金、杂交链反应、酶促反应等多重信号放大手段制备新型DNA甲基化电化学生物传感器,用于DNA甲基化检测,以期为DNA甲基化相关疾病的诊疗工作提供准确、灵敏的方法。方法:设计两两互补的四面体DNA纳米探针序列,利用加热变性—冷却复性的方法使其自发互补结合,形成稳定的四面体DNA纳米探针,用原子力显微镜、聚丙烯酰氨凝胶电泳表征其合成效果。将制好的四面体DNA纳米探针固定于修饰了纳米金颗粒的金电极表面,经过靶DNA序列杂交、HpaII内切酶酶切、杂交链反应扩增及链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶结合后,将电极浸入四甲基联苯胺检测溶液中,通过电化学方法检测电极上发生的氧化还原电子传递来获得靶DNA序列的甲基化信息。在对探针四面体DNA纳米探针固定时间、靶DNA杂交时间及HpaII内切酶酶切时间等反应条件进行优化后,考察最优条件下传感器的线性检测范围... 

【文章来源】：贵州医科大学贵州省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

基于多重信号放大原理的DNA甲基化电化学生物传感检测机制Fig.1SchematicIllustrationoftheMultipleSignalAmplificationElectrochemicalBiosensingDetectionforDNAMethylation

TSP的AFM表征图像

图 2-3 电极覆盖纳米金前后在硫酸溶液（A）与[Fe(CN)6]3+/4+溶液（B）中的 CV 曲线以及覆盖纳米金后电极表面的 SEM 图像及其逐级放大图像，比例尺分别为 300 μm（C）、300 nm（D）、50 nm（E）Fig. 2-3 The CV characteristic curves of the electrode before and after the electrodeposition


本文编号：3440124