基于重组酶聚合酶扩增技术快速检测鲍曼不动杆菌及碳青霉烯类耐药基因的研究
发布时间:2021-10-29 01:36
目的:1.建立重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification RPA)15ul反应体系(本文中简称RPA-15ul反应体系)快速检测鲍曼不动杆菌的实时荧光检测方法,并同时进一步检测临床分离株,以评估该方法的临床实用性。2.选择鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类耐药基因中检出率最高的blaOXA-23基因作为检测目的基因,建立实时荧光重组酶聚合酶扩增技术15ul反应体系快速检测耐药基因的方法,以期检测细菌的同时完成耐药基因的测定,指导临床快速选择敏感抗生素。方法:1.分别根据鲍曼不动杆菌的鉴定基因blaOXA-51与16s-23s rRNA ITS基因的特异保守序列按照TwsitDX Inc公司提供的RPA引物与探针的设计原则设计一系列引物与探针,通过引物筛选,各选择一套最优的引物与探针分别进行特异性与灵敏性评价。以铜绿假单胞菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌四种非鲍曼不动杆菌作为阴性对照菌,采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction PCR)、实时荧光定量PCR(Real...
【文章来源】:西南医科大学四川省
【文章页数】:99 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 鲍曼不动杆菌概述
1.2 鲍曼不动杆菌耐药机制概述
1.3 病原菌及耐药性检测方法概述
1.4 重组酶聚合酶扩增技术概述
第二章 重组酶聚合酶扩增技术快速鉴定鲍曼不动杆菌
第一部分 重组酶聚合酶扩增技术基于blaOXA-51基因鉴定鲍曼不动杆菌
材料与方法
结果
讨论
结论
第二部分 重组酶聚合酶扩增技术基于16s-23s r RNA ITS基因鉴定鲍曼不动杆菌
材料与方法
结果
讨论
结论
第三章 重组酶聚合酶扩增技术快速检测碳青霉烯类耐药基因
材料与方法
结果
讨论
结论
全文结论
参考文献
缩略词表
致谢
重组酶聚合酶扩增技术的研究进展(综述)
参考文献
【参考文献】:
期刊论文
[1]应用直接重组酶聚合酶扩增技术快速检测烟曲霉菌[J]. 王秋平,黄恩奇,杨银梅,钟志敏,陈斌. 中华医院感染学杂志. 2018(24)
[2]2017年CHINET中国细菌耐药性监测[J]. 胡付品,郭燕,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,邹凤梅,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍,郭大文,赵金英,刘文恩,李艳明,金炎,邵春红,温开镇,张贻荣,徐雪松,鄢超,喻华,黄湘宁,王山梅,楚亚菲,张利侠,马娟,周树平,周艳,朱镭,孟晋华,董芳,郑红艳,沈瀚,周万青,贾伟,李刚,吴劲松,卢月梅. 中国感染与化疗杂志. 2018(03)
[3]重组酶聚合酶扩增在铜绿假单胞菌检测中的应用[J]. 金晓君,龚雅利,杨莉,莫邦辉,彭毅志,何鹏,赵军宁,李晓鲁. 中华烧伤杂志. 2018 (04)
[4]江西地区鲍曼不动杆菌NDM-1及其他碳青霉烯酶基因检测研究[J]. 陈娇,吴秀珍,刘康,胡雪飞,陈开森,张黎明,陈贺. 中国感染控制杂志. 2017(02)
[5]耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的OXA酶基因研究[J]. 陆丹倩,芮勇宇,杨秋,顾向明,邓冲,王巧媚,邓聚辉,刘美嫦. 国际检验医学杂志. 2016(22)
[6]重组酶聚合酶扩增技术在疾病快速检测中的研究进展[J]. 樊晓旭,赵永刚,李林,吴晓东,王志亮. 中国动物检疫. 2016(08)
[7]番茄细菌性叶斑病菌RPA检测技术[J]. 魏梅生,田茜,赵文军,李桂芬,孔君. 植物保护. 2016(01)
[8]重组酶聚合酶扩增技术及其在寄生虫检测中的应用[J]. 郑文斌,吴耀东,马剑钢,朱兴全,周东辉. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2015(05)
[9]鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究进展[J]. 丁梦珊,李朋朋,马萍,姜飞,顾兵. 临床与病理杂志. 2015(10)
[10]重组酶聚合酶扩增技术检测转基因水稻中的Cry1Ab/c基因[J]. 邓婷婷,黄文胜,程奇,李新实,陈颖. 中国食品学报. 2015(03)
本文编号:3463710
【文章来源】:西南医科大学四川省
【文章页数】:99 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 鲍曼不动杆菌概述
1.2 鲍曼不动杆菌耐药机制概述
1.3 病原菌及耐药性检测方法概述
1.4 重组酶聚合酶扩增技术概述
第二章 重组酶聚合酶扩增技术快速鉴定鲍曼不动杆菌
第一部分 重组酶聚合酶扩增技术基于blaOXA-51基因鉴定鲍曼不动杆菌
材料与方法
结果
讨论
结论
第二部分 重组酶聚合酶扩增技术基于16s-23s r RNA ITS基因鉴定鲍曼不动杆菌
材料与方法
结果
讨论
结论
第三章 重组酶聚合酶扩增技术快速检测碳青霉烯类耐药基因
材料与方法
结果
讨论
结论
全文结论
参考文献
缩略词表
致谢
重组酶聚合酶扩增技术的研究进展(综述)
参考文献
【参考文献】:
期刊论文
[1]应用直接重组酶聚合酶扩增技术快速检测烟曲霉菌[J]. 王秋平,黄恩奇,杨银梅,钟志敏,陈斌. 中华医院感染学杂志. 2018(24)
[2]2017年CHINET中国细菌耐药性监测[J]. 胡付品,郭燕,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,邹凤梅,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍,郭大文,赵金英,刘文恩,李艳明,金炎,邵春红,温开镇,张贻荣,徐雪松,鄢超,喻华,黄湘宁,王山梅,楚亚菲,张利侠,马娟,周树平,周艳,朱镭,孟晋华,董芳,郑红艳,沈瀚,周万青,贾伟,李刚,吴劲松,卢月梅. 中国感染与化疗杂志. 2018(03)
[3]重组酶聚合酶扩增在铜绿假单胞菌检测中的应用[J]. 金晓君,龚雅利,杨莉,莫邦辉,彭毅志,何鹏,赵军宁,李晓鲁. 中华烧伤杂志. 2018 (04)
[4]江西地区鲍曼不动杆菌NDM-1及其他碳青霉烯酶基因检测研究[J]. 陈娇,吴秀珍,刘康,胡雪飞,陈开森,张黎明,陈贺. 中国感染控制杂志. 2017(02)
[5]耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的OXA酶基因研究[J]. 陆丹倩,芮勇宇,杨秋,顾向明,邓冲,王巧媚,邓聚辉,刘美嫦. 国际检验医学杂志. 2016(22)
[6]重组酶聚合酶扩增技术在疾病快速检测中的研究进展[J]. 樊晓旭,赵永刚,李林,吴晓东,王志亮. 中国动物检疫. 2016(08)
[7]番茄细菌性叶斑病菌RPA检测技术[J]. 魏梅生,田茜,赵文军,李桂芬,孔君. 植物保护. 2016(01)
[8]重组酶聚合酶扩增技术及其在寄生虫检测中的应用[J]. 郑文斌,吴耀东,马剑钢,朱兴全,周东辉. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2015(05)
[9]鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究进展[J]. 丁梦珊,李朋朋,马萍,姜飞,顾兵. 临床与病理杂志. 2015(10)
[10]重组酶聚合酶扩增技术检测转基因水稻中的Cry1Ab/c基因[J]. 邓婷婷,黄文胜,程奇,李新实,陈颖. 中国食品学报. 2015(03)
本文编号:3463710
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