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脂肪源间充质干细胞体外促进造血干细胞增殖的初步研究

发布时间:2021-11-02 08:11
  目的:初步探讨脂肪源间充质干细胞(Adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)体外促进造血干细胞(Hematopoietic stem cells,HSCs)增殖的能力及机制。方法:体外无菌条件下制备ADSCs、骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)、成纤维细胞(Fibroblast cells,RF),培养至第三代,观察细胞形态;磁珠分选出纯化的小鼠造血干细胞(Lin-Sca-1+C-kit+,LSK),第一步将实验分为2组:(1)ADSCs+LSK;(2)BMSCs+LSK;在体外长期培养14天、35天时,进行LSK细胞计数,并用荧光定量PCR技术检测共培养后LSK细胞Notch信号通路基因表达水平;第二步将实验分为4组:(1)ADSCs+LSK;(2)ADSCs+LSK+γ分泌酶抑制剂(Gamma-secretase inhibitors,GSI);(3)RF+LSK;(4)RF+LSK+GSI;将四组在长期培养液中共培养0天、14天、35天,观察ADSCs、RF形态变化,并观察LS... 

【文章来源】:新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】:50 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

脂肪源间充质干细胞体外促进造血干细胞增殖的初步研究


ADSCs、BMSCs与RF细胞形态

细胞计数,共培养,统计学


passage RF;SCs、BMSCs 与 LSK 共培养计数分析SCs 与 LSK 共培养 14 天时,LSK 在 ADSCs 及 BMSCs 增殖水平相差不大5 天时,LSK 在 ADSCs 组的增殖明显高于 BMSCs 组,且差异具有统计学意0.05)。表 1 LSK 细胞计数Table1 the count of LSK cell均数(X104个) 标准差(X104)ADSCs+14d 6 0.67+35d 9.47 2.32BMSCs+14d 5 0.29+35d 6.33 1.25

信号通路,饲养层,基因表达水平,共培养


新疆医科大学硕士学位论文LSK cell counts of ADSCs, BMSCs and LSK were cultured at 0, 14 and 35 days(ADSCs:n=3BMSCs:n=3 p<0.05)3 不同时段共培养体系中 LSK 细胞 Notch 信号通路基因表达与 BMSCs 组相比,ADSCs 组中 LSK 在 14 天的时候 Notch 信号通路相关基因表达水平较低,而在 35 天时,ADCSs 组中 Notch/Jagged 信号通路的基因表达水平比 BMSCs 组高,尤其是其下游信号 HES-1,差异有统计学意义( p<0.01)。

【参考文献】:
期刊论文
[1]Umbilical Cord Blood-derived Mesenchymal Stem Cells Ameliorate Graft-Versus-Host Disease Following Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation through Multiple Immunoregulations[J]. 吴秋玲,刘小云,聂第敏,朱夏夏,方峻,游泳,仲照东,夏凌辉,洪梅.  Journal of Huazhong University of Science and Technology(medical Sciences). 2015(04)
[2]间充质干细胞诱导的CD8α+ Jagged2high CD11bhigh调节性树突状细胞防治小鼠aGVHD[J]. 童嘉琦,吴萍,黄欣,赖沛龙,耿素霞,翁建宇,杜欣.  中国病理生理杂志. 2015(05)
[3]供者调控T细胞对异基因造血干细胞移植后造血与免疫重建、移植物抗宿主病发生及生存的影响[J]. 杨凯,范志平,刘启发,张钰.  南方医科大学学报. 2008(04)



本文编号:3471665

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