阴道毛滴虫和白色念珠菌荧光定量PCR方法的建立及应用
发布时间：2022-01-01 00:51
研究目的:1.建立双重荧光定量PCR检测方法同时检测阴道毛滴虫和白色念珠菌感染,优化该检测方法的反应条件,并评估该方法的特异性、敏感性、重复性等。旨在为临床提供一种快速并同时检测阴道毛滴虫和白色念珠菌的方法,应用于女性阴道炎、尿道炎患者的的临床诊断。2.收集2016年8月至2017年4月期间,在广州医科大学附属第三医院妇产科就诊者的阴道分泌物标本,使用建立好的双重荧光定量PCR检测方法检测标本阴道毛滴虫和白色念珠菌感染情况,分析双重荧光定量PCR检测方法的临床实用性。研究方法:1.通过查看文献获得目的基因序列,并合成阴道毛滴虫和白色念珠菌引物、探针的基因序列,初步确定双重荧光定量PCR检测方法的反应体系;通过对反应体系中Mg2+浓度和酶的种类进行筛选,优化该检测方法的反应条件。2.以生殖道常见微生物,包括大肠杆菌、淋病奈瑟氏菌、加德纳菌、乳酸杆菌、人型支原体临床分离株DNA和人基因组DNA为模板,以阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis,TV）和白色念珠菌（Candida albicans,CA）临床分离株作为阳性对照,以去离子水作为阴性对照,进行...
【文章来源】：广州医科大学广东省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同Mg2+浓度的双重荧光定量PCR检测CA、TV阳性质粒的平均数Ct值
图 2. ACE、HOT 和 T-Taq 聚合酶的双重荧光定量 PCR 检测 CA、TV 阳性质粒的平均数 Ct 值Fig. 2. The mean Ct value of the double fluorescence quantitative PCR of ACE, HOT andT-Taq polymerase in the detection of CA and TV positive plasmid.
图 3. 荧光定量 PCR 检测 CA、TV、其它菌株的扩增图Fig.3. The amplification of CA, TV and other strains detected by PCR. 双重荧光定量 PCR 方法的检测限实验结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]新型TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测HCV-RNA方法学的建立[J]. 乔斌,李艳,汪明,熊格. 现代检验医学杂志. 2017(05)
[2]成年女性阴道毛滴虫感染情况及其影响因素的Logistic回归分析[J]. 潘继升,陈军. 中国性科学. 2017(09)
[3]阴道炎的常见发病类型及其常见病原体的分布状况[J]. 彭利群,刘志敏,梁瑞芳. 当代医学. 2017(23)
[4]基于Chelex-100和蛋白酶K的蚊虫足样本DNA提取技术[J]. 闫振天,司风玲,鲜鹏杰,何正波,陈斌. 重庆师范大学学报(自然科学版). 2017(05)
[5]Establishment of a Real-time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Genetically Modified Maize Line MON88017[J]. Jun SONG,Dong WANG. Agricultural Biotechnology. 2017(01)
[6]使用实时荧光定量PCR解析婴儿肠道双歧杆菌构建规律[J]. 何苗,李鸣,王舒悦,张玲琳,苗俊杰,石磊,余倩,姚建蓉,黄承钰,何方. 四川大学学报(医学版). 2016(04)
[7]白色念珠菌ITS2的实时荧光定量PCR快速检测方法的建立及评价[J]. 郭毅,杨靖娴,邵冬华,刘静,梁国威. 医学研究杂志. 2016(07)
[8]实时荧光定量PCR技术在环境领域研究探讨[J]. 周震宇,颜智勇. 广州化工. 2016(12)
[9]Bacterial vaginosis:a synthesis of the literature on etiology,prevalence,risk factors,and relationship with chlamydia and gonorrhea infections[J]. Christian T.Bautista,Eyako Wurapa,Warren B.Sateren,Sara Morris,Bruce Hollingsworth,Jose L.Sanchez. Military Medical Research. 2016(02)
[10]女性患者生殖道感染状况分析[J]. 王小霞,余碧瑜,苏群志,唐荣德. 广州医科大学学报. 2016(02)
本文编号：3561322
【文章来源】：广州医科大学广东省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同Mg2+浓度的双重荧光定量PCR检测CA、TV阳性质粒的平均数Ct值
图 2. ACE、HOT 和 T-Taq 聚合酶的双重荧光定量 PCR 检测 CA、TV 阳性质粒的平均数 Ct 值Fig. 2. The mean Ct value of the double fluorescence quantitative PCR of ACE, HOT andT-Taq polymerase in the detection of CA and TV positive plasmid.
图 3. 荧光定量 PCR 检测 CA、TV、其它菌株的扩增图Fig.3. The amplification of CA, TV and other strains detected by PCR. 双重荧光定量 PCR 方法的检测限实验结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]新型TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测HCV-RNA方法学的建立[J]. 乔斌,李艳,汪明,熊格. 现代检验医学杂志. 2017(05)
[2]成年女性阴道毛滴虫感染情况及其影响因素的Logistic回归分析[J]. 潘继升,陈军. 中国性科学. 2017(09)
[3]阴道炎的常见发病类型及其常见病原体的分布状况[J]. 彭利群,刘志敏,梁瑞芳. 当代医学. 2017(23)
[4]基于Chelex-100和蛋白酶K的蚊虫足样本DNA提取技术[J]. 闫振天,司风玲,鲜鹏杰,何正波,陈斌. 重庆师范大学学报(自然科学版). 2017(05)
[5]Establishment of a Real-time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Genetically Modified Maize Line MON88017[J]. Jun SONG,Dong WANG. Agricultural Biotechnology. 2017(01)
[6]使用实时荧光定量PCR解析婴儿肠道双歧杆菌构建规律[J]. 何苗,李鸣,王舒悦,张玲琳,苗俊杰,石磊,余倩,姚建蓉,黄承钰,何方. 四川大学学报(医学版). 2016(04)
[7]白色念珠菌ITS2的实时荧光定量PCR快速检测方法的建立及评价[J]. 郭毅,杨靖娴,邵冬华,刘静,梁国威. 医学研究杂志. 2016(07)
[8]实时荧光定量PCR技术在环境领域研究探讨[J]. 周震宇,颜智勇. 广州化工. 2016(12)
[9]Bacterial vaginosis:a synthesis of the literature on etiology,prevalence,risk factors,and relationship with chlamydia and gonorrhea infections[J]. Christian T.Bautista,Eyako Wurapa,Warren B.Sateren,Sara Morris,Bruce Hollingsworth,Jose L.Sanchez. Military Medical Research. 2016(02)
[10]女性患者生殖道感染状况分析[J]. 王小霞,余碧瑜,苏群志,唐荣德. 广州医科大学学报. 2016(02)
本文编号：3561322
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