产KPC-2型碳青霉烯酶奇异变形杆菌的分离、鉴定、表征及基因组学分析

发布时间：2022-01-21 22:15

　　背景与目的变形杆菌属细菌属于肠杆菌科,是临床重要的条件致病菌之一。该菌属细菌分布广泛,在自然界的土壤、污水、腐败动植物以及人类、动物的肠道中均可检出。近年来,抗菌药物在临床的广泛使用,污染水源、变质食品的误饮、误食,使得变形杆菌属细菌所致临床感染屡见不鲜,检出率逐年攀升。目前,临床上分离率最高、对人类危害极大的当属奇异变形杆菌。奇异变形杆菌具有周身鞭毛,运动活泼,是引起临床泌尿系统感染的重要病原菌,也是造成食物中毒、脑膜炎、中耳炎、小儿慢性腹泻等疾病的常见病原菌。碳青霉烯类抗菌药物抗菌谱广、杀菌效应强,常被作为治疗产ESBL、Amp C酶肠杆菌科细菌感染的最后一道防线。但近年来,临床碳青霉烯类抗菌药物包括亚胺培南、美罗培南、厄他培南等不合理使用及滥用,使得耐碳青霉烯类药物奇异变形杆菌的分离率与感染率不断增加,临床针对其感染的治疗面临着严峻的考验。2008年,美国首次报道了产KPC-2型碳青霉烯酶奇异变形杆菌。之后,中国、巴西分别于2010年和2015年发现了奇异变形杆菌中此型别酶的存在。KPC-2型碳青霉烯酶的基因定位于质粒,可通过质粒和转座元件在细菌种属间进行克隆传播和基因水平转移。... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

菌株L90在血平板上菌落形态

21图 2.2 blaKPC阳性奇异变形杆菌的 PCR 电泳图2.2 The electrophoresis results of PCR with blaKPC-producing proteus NAmarker，条带大小如上图所示，+ 代表 blaKPC目的基因扩增阳的基因扩增阴性对照，L44、L49、L52、L71、L76、L90 为待测样因型别测序结果异变形杆菌含 blaKPC基因阳性 PCR 产物均测序成功，且 在线软件序列比对后确定均为 KPC-2 型碳青霉烯酶耐药基部分测序峰图如图 2.3 所示。

图 2.3 KPC-2 型基因部分测序峰图Figure 2.3 Partial sequencing map of KPC-2 type.4 同源性分析结果对 6 株 blaKPC阳性的奇异变形杆菌进行 PFGE 同源性分析，分析菌株基因关性，PFGE 结果如图 2.4 所示。

【参考文献】：
期刊论文
[1]2017年CHINET中国细菌耐药性监测[J]. 胡付品,郭燕,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,邹凤梅,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍,郭大文,赵金英,刘文恩,李艳明,金炎,邵春红,温开镇,张贻荣,徐雪松,鄢超,喻华,黄湘宁,王山梅,楚亚菲,张利侠,马娟,周树平,周艳,朱镭,孟晋华,董芳,郑红艳,沈瀚,周万青,贾伟,李刚,吴劲松,卢月梅.  中国感染与化疗杂志. 2018(03)
[2]阿米卡星与磷霉素治疗产KPC酶细菌的疗效观察[J]. 郑海岚,华俊彦,朱雅艳,叶伟红.  中华医院感染学杂志. 2014(12)
[3]KPC型碳青霉烯酶研究概况及进展[J]. 纪明宇,耿大影,裴凤艳,汪运山.  临床检验杂志. 2013(04)

博士论文
[1]肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物耐药特性及环境影响因素研究[D]. 郑瑞.昆明理工大学 2017
[2]产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌分子分型及传播机制研究[D]. 齐艳.浙江大学 2012
[3]奇异变形杆菌可移动耐药基因岛研究[D]. 毕水莲.华南理工大学 2011

硕士论文
[1]无迁徙生长碳青霉烯耐药奇异变形杆菌生物学特性、耐药机制及分子分型研究[D]. 孙龙.浙江大学 2016



本文编号：3601052