PI3K/Akt信号通路与肝星状细胞活化的关系及其在放射性肝纤维化中的作用

发布时间：2022-01-22 07:48

　　目的:探讨PI3K/Akt信号通路与肝星状细胞（HSC）活化的关系及其在放射性肝纤维化中的作用。方法:使用6 MV X射线联合PI3K/Akt信号通路特异性抑制剂（Ly294002）处理HSC,分为空白对照组、抑制剂组、10Gy组、10Gy+抑制剂组、20Gy组和20Gy+抑制剂组。MTT法检测24、48、72、96h后细胞抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率、ELISA法检测TGF-β1浓度、RT-PCR检测α-SMA、caspase-3、caspase-9的mRNA表达量、Western blot检测p-Akt的表达量。结果:空白对照组细胞形态正常,随着照射剂量的增加细胞形态改变越明显,加入抑制剂后细胞形态改变减轻。MTT法显示:相同时间,随着照射剂量的增加抑制率也增加（F=40.421、319.196、128.928、270.5 4,P<0.05）。随着时间的延长,抑制率也增加。FCM法显示:与空白对照组相比,10Gy和20Gy组细胞的凋亡率随照射剂量的增加而增加（t=8.43、11.63,P<0.05）;与10Gy和20Gy组比较,分别加抑制剂后细胞的凋亡率降低（t=8... 

【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中英文缩略词对照表
摘要
ABSTRACT
前言
内容与方法
    1. 材料
        1.1 主要试剂
        1.2 主要实验设备
    2. 细胞培养
        2.1 细胞复苏
        2.2 细胞换液
        2.3 细胞传代
        2.4 细胞冻存
        2.5 细胞计数方法
    3. 实验分组
    4. 实验方法
        4.1 照射方法
        4.2 MTT 法检测各组细胞的抑制率
        4.3 流式细胞术（FCM）检测各组细胞凋亡率
        4.4 ELISA 法检测细胞上清液 TGF-β1 的浓度
        4.5 RT-PCR 法检测α-SMA、caspase-3、caspase-9 m RNA 的表达
        4.6 Western blot 法检测信号通路关键分子 p-Akt 蛋白的表达
    5. 质量控制
    6. 统计方法
    附：技术路线图
结果
讨论
小结
致谢
参考文献
综述
    参考文献
攻读硕士学位期间获得的学术成果
导师评阅表


【参考文献】：
期刊论文
[1]靶向结缔组织生长因子的siRNA对于肝星状细胞介导肝纤维化的研究进展[J]. 樊雪强,陈新华,齐晓艳.  中国医药导报. 2012(35)
[2]TGF-β1对大鼠HSC-T6细胞增殖、细胞周期和胶原分泌的影响[J]. 郑素军,邢欣悦,韩源平,武聚山,王世美,张莹,刘梅,陈煜,刘霜,段钟平.  实用肝脏病杂志. 2012(04)
[3]新疆地区3602例原发性肝癌临床流行病学资料分析[J]. 倪雅琼,赵化荣,毛睿,张华,温浩,肖蕾,艾力·吐尔逊,包永星.  中华肿瘤杂志. 2012 (05)
[4]大麻素受体1、FAK mRNA在小鼠肝纤维化形成过程中肝组织中的表达及相互关系[J]. 杨莉,赵召霞,侯军良,刘玉珍,姜惠卿,戴二黑.  临床肝胆病杂志. 2011(08)
[5]PI3K/Akt信号通路与肝纤维化[J]. 黄成,李俊,马陶陶.  中国药理学通报. 2011(08)
[6]胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝组织中PTEN表达与肝星状细胞凋亡的关系研究[J]. 郝礼森,张晓岚,周智宏,李玉林,麻继臣,安君艳,姚冬梅,房澍名,姜慧卿.  解放军医学杂志. 2010(07)
[7]罗格列酮对人肺腺癌A549细胞整合素β1表达的影响[J]. 杨洁,庄英帜,曹建国.  中国药理学通报. 2007(02)
[8]肝癌放疗应采用何种分割剂量?[J]. 曾昭冲.  中华放射肿瘤学杂志. 2006(04)
[9]慢性乙型肝炎患者血清转化生长因子β1水平与肝脏炎症程度及纤维化程度的相对独立关系[J]. 王军,李勇富.  中国医师杂志. 2006(07)
[10]Effects of ribozyme targeting platelet-derived growth factor receptor β subunit gene on the proliferation and apoptosis of hepatic stellate cells in vitro[J]. CHEN Yue-xiang, LU Cui-hua, XIE Wei-fen, ZHANG Xing-rong, ZHANG Zhong-bing, WEI Li-xin, JIN You-xin and GUO Ya-jun Department of Gastroenterology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200003, China International Joint Cancer Reseach Institute, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China State Key Laboratory of Molecular Biology, Shanghai Institute of Biochemistry, Chinese Academy of Science, Shanghai 200031, China.  Chinese Medical Journal. 2005(12)



本文编号：3601817