Tim-3/Galectin-9信号通路在脂多糖诱导的巨噬细胞M1/M2亚型极化及屏障调节功能中的作用研究

发布时间：2022-07-14 13:37

　　目的:通过观察脂多糖（LPS）诱导的小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDMs）M1/M2亚型极化,同时从单层细胞通透性和细胞迁移愈合能力两个方面观察不同炎症状态下的巨噬细胞对小鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）屏障功能的影响。初步探讨T细胞免疫球蛋白粘蛋白-3/半乳糖凝集素-9（Tim-3/Gal-9）信号通路在LPS诱导的巨噬细胞表型及功能调节中的意义及分子机制。方法:体外培养原代BMDMs和小鼠PMVECs,用0.1 mg/L的LPS分别刺激BMDMs 0、1、3、6、12、24h,流式细胞术检测CD86、CD206,western-blot法检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶-1（Arg-1）等巨噬细胞分型标记物以分析不同处理组的巨噬细胞M1/M2表型差异,激光共聚焦-免疫荧光法观察BMDMs中Tim-3和Gal-9共定位,免疫共沉淀法检测Tim-3和Gal-9结合程度。将不同处理组的BMDMs分别与PMVECs共培养,伊文思兰渗漏法检测单层PMVECs渗透性变化,细胞划痕实验检测PMVECs的迁移愈合能力。另取BMDMs并分为空白对照组、α-乳糖（a-lactose）处理组,... 

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．２光镜下的ＰＭＶＥＣｓ?（２００＞〇及免疫荧光鉴定结果（４００＞＜）??

图１．１光镜下的ＢＭＤＭｓ?（１０〇ｘ），巨噬细胞标志物Ｆ４／８０流式鉴定结果??

图２．１流式细胞术分析ＬＰＳ刺激后的Ｆ４／８０＋ＣＤ８６＋巨噬细胞数量随时间变化趋势??


本文编号：3661226