基于适配体传感器对凝血酶蛋白检测的新方法研究

发布时间：2022-10-08 15:49

　　蛋白质作为重要的生物体组成物质之一,它与生物体生命活动的每一进程都息息相关。其含量的变化对人体生物学功能的影响有着直接的关系,即使这种变化是极其微量的,也会引发生理病理反应,特别是对于一些与疾病相关的蛋白分子,这种变化带来的影响不可忽略,基于此,对蛋白表达水平的测定显得尤为重要,这对于某些疾病的预防、早期诊断以及治疗具有重要现实意义。随着蛋白检测技术的不断发展应用,已经不再局限于将抗体作为生物分子识别元件,因为适配体具有靶分子广泛、高稳定性、易修饰、易制备、无免疫原性等抗体无法比拟的优点,以适配体作为识别元件的传感器展现了高灵敏、高特异性和操作简便等特性,使得基于适配体传感器的蛋白检测方法成为当下的研究热门,也是最具前景的蛋白检测方法。本课题采用不同的方法构建了三种类型的适配体传感器,以凝血酶蛋白为经典的分析对象,对所构建的传感器性能进行了验证讨论。这些新方法的检测性能在各原有类型的基础上都得到了很大提高,论文主要内容如下:（1）利用β-环糊精（β-CD）与二茂铁（Fc）的主客体识别机理构建了开关型适配体电化学传感器对凝血酶进行检测研究。该传感器是将末端修饰了Fc的适配体作为检测探针,... 

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
中文摘要
abstract
注释表
引言
文献综述 适配体传感器对凝血酶蛋白的检测研究
    1 凝血酶蛋白检测意义
    2 适配体传感器
        2.1 适配体
            2.1.1 适配体的筛选
            2.1.2 适配体作为识别元件的优点
        2.2 适配体传感器简介
        2.3 适配体传感器的类型
    3 基于适配体传感器对凝血酶蛋白的检测应用
第一章 基于主客体识别的电化学适配体传感器对凝血酶的检测
    1 实验准备
        1.1 材料与试剂
        1.2 仪器与设备
        1.3 溶液的配制
    2 实验方法
        2.1 SH-β-CD的合成
        2.2 传感器的制备
        2.3 凝血酶的检测
    3 结果与讨论
        3.1 主客体识别的验证
        3.2 修饰电极的电化学阻抗表征
        3.3 反应温度的优化
        3.4 孵化时间的优化
        3.5 线性考察
        3.6 特异性研究
        3.7 血清样本的检测
        3.8 传感器的再生性
    4 结论
第二章 基于纳米复合物功能化的电致化学发光适配体传感器对凝血酶的检测
    1 实验准备
        1.1 材料与试剂
        1.2 仪器与设备
        1.3 溶液的配制
    2 实验方法
        2.1 纳米石墨烯的制备
        2.2 β-环糊精-金纳米颗粒/纳米石墨烯的制备
        2.3 ECL适配体传感器的构建
        2.4 凝血酶的检测
    3 结果与讨论
        3.1 可控电极的验证
        3.2 修饰电极的电化学阻抗表征
        3.3 适配体探针的优化选择
        3.4 凝血酶孵化时间的优化
        3.5 线性考察
        3.6 特异性研究
        3.7 血清样本检测
        3.8 传感器的再生性
    4 结论
第三章 基于均相无修饰的电化学适配体传感器对凝血酶的检测
    1 实验准备
        1.1 材料与试剂
        1.2 仪器与设备
        1.3 溶液的制备
    2 实验方法
        2.1 电极的预处理
        2.2 凝血酶的检测
    3 结果与讨论
        3.1 探针结构的验证
        3.2 检测条件的优化
        3.3 Au-S自组装中辅助电位的比较
        3.4 阻抗表征
        3.5 线性考察
        3.6 特异性研究
        3.7 血清样本检测
    4 结论
第四章 结语
    1 课题结论
    2 问题与展望
参考文献
附录
学位论文答辩委员会成员名单



本文编号：3687989