Notch信号在内皮细胞促进造血干细胞增殖中作用的研究

发布时间：2022-10-10 14:24

　　目的:骨髓移植是目前许多血液系统疾病唯一可治愈的治疗策略,但如何在体外有效扩增数量有限的造血干细胞（HSC）仍然是当今的研究热点及难点,近年来的研究已经证实了Notch信号和内皮细胞（ECs）在维持HSC池稳态和再生中的重要作用,同时我们之前的研究已表明在体外培养中ECs可促进HSCs增殖。本试验将更深入地探讨ECs促进HSCs增殖是否和Notch信号相关,为体外有效扩增HSCs的深入研究提供理论依据。方法:（1）通过胶原酶消化分离小鼠肺组织,获得的细胞采用EC培养基培养,同时观察细胞的形态,通过免疫荧光染色和流式细胞术鉴定ECs的特性及纯度,当细胞融合至80%左右进行细胞传代培养和共培养。（2）取得的小鼠骨髓通过密度梯度离心法以得到单个核细胞（MNC）,采用免疫磁珠分选仪分选出CD117+HSC细胞,采取流式细胞仪测定CD117阳性细胞的纯度及HSC CD117CD34的共表达率。（3）将HSC接种到含或未含ECs的培养基中,分为EC单独培养组、EC+HSC共培养组、HSC单独培养组,每组设置3个复孔,我们前期的研究发现ECs促进HSC增殖于第4天作用最明显,于第7天HSC峰值最高,... 

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 肺微血管内皮细胞的分离培养及生物学特性的鉴定
    试验流程
    材料与试剂
    实验方法
    实验结果
第二部分 小鼠CD117+HSC的分选及鉴定
    试验流程
    材料与试剂
    实验方法
    实验结果
第三部分 Notch信号在肺微血管EC与HSC共培养后的改变
    实验流程
    材料与试剂
    实验方法
    实验结果
讨论
结论
参考文献
英文缩略词对照表
致谢
Notch信号对造血干细胞的调控作用(综述)
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]Notch信号介导共培养脐带间充质干细胞和造血干细胞的相互作用[J]. 石蕊,徐曼,苏永峰,张斌,陈虎.  细胞与分子免疫学杂志. 2012(08)

硕士论文
[1]不同来源微血管内皮细胞培养方法的建立及生物学特性比较[D]. 杨敏.西南医科大学 2017
[2]微血管内皮细胞对造血干细胞增殖的研究[D]. 钱怡.西南医科大学 2017
[3]关于Shh协同骨髓间充质干细胞促进造血干细胞增殖机制的研究[D]. 郭静.西南医科大学 2016
[4]研究BMP-2对骨髓间充质干细胞促进造血干细胞增殖的影响[D]. 李书坛.四川医科大学 2015



本文编号：3689782