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基于ε-聚赖氨酸配基的内毒素吸附剂的制备和应用

发布时间:2023-03-29 03:04
  脓毒血症可以由任何部位的感染引起,临床上常见于肺炎、腹膜、泌尿系统感染、脑膜炎、脓肿等。其病原微生物包括细菌、真菌、病毒及寄生虫,脓毒血症也常常发生在有严重疾病的患者中,如严重烧伤、外科手术后等患者。目前普遍认为脓毒血症是由于内毒素进入血液引发的一种全身炎症反应综合征。内毒素是革兰氏阴性菌细胞外壁的组成成分,污染的手术器械、冲洗系统、生物制品如疫苗、抗体等表达生产过程中,都会有大量的内毒素产生和残留,因此内毒素几乎无处不在。此外在脓毒血症治疗过程中抗生素的使用,会再一次带来大量内毒素释放加重病人的病情,因此对于内毒素的去除是非常重要的。现有去除内毒素的方法大多存在去除能力有限、非特异性强,过多的非特异性吸附使其无法用于生物制品和临床血液中内毒素的去除。因此,临床上急需一种对内毒素吸附能力较强并且血液相容性好的内毒素结合材料。而ε-聚赖氨酸是由白色链霉菌产生的,并且具有光谱的抗菌性并且已经被批准作为一种安全的食品防腐剂,从安全角度讲它也是对人体无毒无害的。此外ε-聚赖氨酸具有25-30个赖氨酸,其可以通过阳离子的静电作用和疏水作用,同时对内毒素具有较好的吸附性。本论文通过以琼脂糖凝胶4F...

【文章页数】:73 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
引言
缩略词列表
1 文献综述
    1.1 内毒素与脓毒血症
        1.1.1 内毒素的发现
        1.1.2 人体内毒素的来源
        1.1.3 内毒素的结构及物理化学特性
        1.1.4 内毒素的生物活性
        1.1.5 内毒素与脓毒血症
    1.2 内毒素的检测
        1.2.1 家兔热原法
        1.2.2 鲎试剂法
    1.3 内毒素的去除
        1.3.1 活性炭
        1.3.2 萃取
        1.3.3 阴离子交换色谱
        1.3.4 组胺和组氨酸固定化的琼脂糖吸附剂
        1.3.5 多粘菌素B(Polymyxin B,PMB)固定化的琼脂糖吸附剂
        1.3.6 具有聚阳离子配基的色谱
        1.3.7 阳离子官能团的聚合物
        1.3.8 ε-聚赖氨酸
        1.3.9 抗内毒素抗体
    1.4 脓毒血症的血液净化治疗及现有研究现状
        1.4.1 血液净化概述
        1.4.2 血液灌流研究进展
    1.5 研究的主要内容
2 琼脂糖-ε-聚赖氨酸吸附剂的制备及内毒素检测方法的建立
    2.1 引言
    2.2 实验材料与仪器
        2.2.1 材料与试剂
        2.2.2 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 琼脂糖-聚赖氨酸内毒素吸附剂的制备
        2.3.2 琼脂糖-聚赖氨酸吸附剂-R的制备
        2.3.3 琼脂糖-多粘菌素B(PMB)吸附剂的制备
        2.3.4 合成吸附剂的配基密度测定
        2.3.5 内毒素检测方法的建立
        2.3.6 内毒素的静态吸附实验方法
        2.3.7 内毒素吸附率和饱和吸附容量
    2.4 实验结果与讨论
        2.4.1 合成吸附剂的密度计算
        2.4.2 不同抗凝剂中内毒素检测回收率
        2.4.3 内毒素溶液的标准曲线
        2.4.4 不同种类吸附剂对内毒素吸附情况
        2.4.5 琼脂糖-ε-聚赖氨酸(ε-PLL)和琼脂糖-多粘菌素B(PMB)对内毒素血浆溶液的吸附对比
    2.5 小结
3 琼脂糖-ε-聚赖氨酸内毒素吸附剂的优化及性能评价
    3.1 引言
    3.2 实验材料与仪器
        3.2.1 材料与试剂
        3.2.2 主要仪器及耗材
    3.3 实验方法
        3.3.1 琼脂糖-ε-聚赖氨酸合成优化
        3.3.2 吸附剂性能测试
        3.3.3 不同胶血比对吸附剂吸附性能影响
        3.3.4 吸附剂对FITC-LPS水溶液的吸附实验
    3.4 实验结果与讨论
        3.4.1 琼脂糖-ε-聚赖氨酸合成优化
        3.4.2 计算内毒素吸附率和饱和吸附量
        3.4.3 不同胶血比对吸附效果的影响
        3.4.4 吸附剂对FITC-LPS水溶液的吸附实验结果
    3.5 小结
4 内毒素吸附剂血液相容性实验
    4.1 引言
    4.2 实验材料与仪器
        4.2.1 材料与试剂
        4.2.2 主要仪器及耗材
    4.3 实验方法
        4.3.1 细胞溶血实验
        4.3.2 人血浆总蛋白、白蛋白的测定
    4.4 实验结果与讨论
        4.4.1 溶血实验结果
        4.4.2 不同氨基密度对血浆中内毒素的吸附率及总蛋白和白蛋白的非特异性吸附
    4.5 小结
结论
展望
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢



本文编号:3773861

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