转录因子TEL/ETV6对干细胞分化的调控作用研究

发布时间：2023-04-06 23:02

　　多能干细胞(PSC)定向分化为造血干细胞(HSC)的研究为解决"血荒"、移植供者来源不足以及开拓血液制品来源提供了新途径。iPSC技术的出现又避免了人ESC应用涉及的法律、伦理道德等问题,更重要的是,病人特异的iPSC来源的HSC在移植后可避免免疫排斥反应,为实现个体化的再生医学开辟了新方向。如何体外诱导人多能干细胞分化为可长期移植的造血干细胞和功能性的成熟血细胞是目前最大的挑战。本研究从造血微环境中一重要成员骨髓间充质干细胞着手,寻找MSC促成骨分化的转录因子,并阐明ETV6在骨髓MSC分化和人多能干细胞造血分化中的作用,为促进体外人多能干细胞向功能性造血干/祖细胞分化提供新的方案。第一章TEL/ETV6对骨髓间充质干细胞成骨成脂分化的调控作用研究成骨细胞对造血微环境以及造血干细胞的维持与稳定至关重要,因此,通过调控骨髓间充质干细胞成骨分化并作为基质可能有助于体外人能干细胞分化来源的造血干/祖细胞成熟。本章节通过大量筛选促进骨髓间充质干细胞成骨细胞分化的转录因子,发现了 ETV6、ETV2和LM02三个基因可以很大程度地促进成骨分化,而ETV3、GATA1和HOXB4则有相反的作用。...

【文章页数】：144 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
致谢
前言
摘要
Abstract
缩写词
第一章 TEL/ETV6对骨髓间充质干细胞成骨成脂分化的调控作用研究
    1.1 引言
    1.2 材料和方法
        1.2.1 主要实验仪器和设备
        1.2.2 主要试剂和耗材
        1.2.3 主要溶液配制
        1.2.4 质粒载体
        1.2.5 实验方法
    1.3 实验结果
        1.3.1 成功克隆45个造血微环境调控相关重要转录因子
        1.3.2 转录因子在人骨髓MSC中过表达并向成骨成脂细胞分化
        1.3.3 ETV6,ETV2,LMO2和ETV3,GATA1,HOXB4对骨髓MSC的成骨成脂分化作用
        1.3.4 ETV6的Knockdown抑制了骨髓MSC的成骨成脂分化
        1.3.5 ETV6的过表达没有改变骨髓MSC的特性
        1.3.6 ETV6过表达的骨髓MSC促进造血干祖细胞的体外增值
    1.4 讨论
    1.5 小结
第二章 TEL/ETV6在诱导性多能性干细胞向造血细胞分化中的作用
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 主要实验仪器和设备
        2.2.2 主要试剂和耗材
        2.2.3 主要溶液配制
        2.2.4 细胞和质粒
        2.2.5 主要实验方法
    2.3 实验结果
        2.3.1 人诱导性多能干细胞向造血细胞分化体系的建立
        2.3.2 利用CRISPR/Cas9系统敲除ETV6基因并建立ETV6^-/-hiPS细胞系
        2.3.3 ETV6^-/-hiPS细胞系的多能性鉴定
        2.3.4 ETV6敲除对iPS造血干/祖细胞及巨核细胞分化的影响
        2.3.5 ETV6过表达的MSC共培养促进iPS体外造血分化
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 总结和展望
综述
参考文献
作者简历及在读期间所取得的科研成果



本文编号：3784584