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脓毒症大鼠脑白质损伤中髓鞘碱性蛋白表达变化的研究

发布时间:2023-05-07 00:16
  目的:研究脓毒症大鼠脑白质损伤后髓鞘碱性蛋白的表达变化,以及髓鞘损伤情况,为脓毒症的研究提供新的思路。方法:将健康SPF级Wistar大鼠64只(18日龄),体重3040g,随机分为对照组和LPS组两组,LPS组腹腔注射5mg/kg的LPS制备大鼠脓毒症动物模型;对照组腹腔给予等量的无菌生理盐水。分别于给药后2h、4h、6h、12h将所有存活动物按设定时间麻醉,心尖取血后开颅取脑。通过劳克坚劳蓝(Luxol Fast Blue,LFB)染色情况观察髓鞘损伤情况;应用免疫组织化学染色方法观察髓鞘碱性蛋白(Myelin Basic Protein,MBP)在脑白质的定位,采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测不同时间点大鼠脑白质髓鞘碱性蛋白表达情况,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中MBP蛋白浓度变化。结果:与对照组相比,LPS组2h12h大鼠脑白质MBP蛋白的表达含量均减少,Western blot检测发现LPS感染后2h、4h、6h LPS组MBP蛋白表达与对照组相比均降低,差异有统计学意义(P<0.05);LPS...

【文章页数】:53 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 材料与试剂
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 主要药品及试剂
        2.1.4 实验试剂的配置
    2.2 实验方法
        2.2.1 动物模型的建立
        2.2.2 标本的采集及处理
        2.2.3 石蜡标本制备
        2.2.4 苏木素-伊红染色(HE)
        2.2.5 免疫组织化学染色
        2.2.6 劳克坚劳蓝染色(Luxol Fast Blue,LFB)
        2.2.7 蛋白提取和Western blot方法检测大鼠脑白质MBP蛋白浓度
        2.2.8 ELISA法检测血清中MBP含量
    2.3 统计学方法
3 结果
    3.1 脓毒症模型的建立
    3.2 HE染色观察大鼠脑组织病理变化
    3.3 劳克坚劳蓝染色(LFB)观察大鼠脑组织髓鞘损伤情况
    3.4 免疫组织化学检测观察大鼠MBP蛋白在脑白质的定位与表达
    3.5 Western blot检测大鼠脑白质MBP的蛋白表达水平
    3.6 ELISA检测脓毒症大鼠血清中MBP蛋白浓度的结果
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
致谢
攻读学位期间取得的研究成果
个人简历



本文编号:3809875

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