抗环瓜氨酸肽抗体识别表位谱初步研究

发布时间：2023-06-28 03:40

　　目的:类风湿性关节炎(RA)是一种常见的慢性自身免疫性疾病,以滑膜关节慢性炎症反应和关节损伤为主要临床表现。抗环瓜氨酸肽抗体(ACPA)能在70%-80%的RA患者中检出并且诊断特异性可达98%,ACPA可先于临床表现10年出现并能够预测临床结果,为RA患者的诊断和治疗提供依据。ACPA的检测是基于抗原抗体特异性结合反应,所以,抗原的标准化对ACPA的检测结果至关重要。蛋白质抗原或多肽的瓜氨酸化是一种蛋白质翻译后修饰过程,并且与RA的发病过程及抗体的产生有关。研究发现瓜氨酸化EB病毒核抗原-1(EBNA-1)蛋白序列中存在能被ACPA识别的抗原表位。本研究首先建立一种自身抗体识别抗原表位的筛选方法,并应用此筛选方法,通过对瓜氨酸化EBNA-1候选多肽与ACPA阳性血清和阴性血清的反应性,筛选出与ACPA有最佳反应的多肽或多肽组合,为ACPA检测提供最佳的抗原。方法:1.抗原表位筛选方法的建立:制备BBS酶标微孔反应板,作为通用酶标反应板。将生物素化牛血清白蛋白包被聚苯乙烯酶标微孔反应板,向微孔反应板中加入链霉亲和素,形成生物素化牛血清白蛋白-链霉亲和素(Bio-BSA-SA,BBS)酶...

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状
    研究目的
    研究方法
一、抗原表位筛选方法的建立
    1 材料和方法
        1.1 仪器设备
        1.2 实验材料
        1.3 主要试剂
        1.4 商品试剂
        1.5 试剂配制
        1.6 实验方法
    2 结果
        2.1 BBS板包被浓度
        2.2 各组分最佳工作浓度
        2.3 最终反应条件
        2.4 方法学性能评价
    3 小结
二、ACPA识别抗原表位筛选
    1 材料和方法
        1.1 仪器设备
        1.2 实验材料
        1.3 主要试剂
        1.4 商品试剂盒
        1.5 试剂配制
        1.6 研究对象
        1.7 实验方法
    2 结果
        2.1 ACPA-IgG检测结果
        2.2 ACPA-IgG表位谱筛选结果
    3 小结
三、讨论
    1 类风湿关节炎的实验室诊断
    2 抗CCP抗体检测方法
    3 表位谱研究结果及意义
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述 抗环瓜氨酸肽抗体的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3835908