荧光共振能量转移核酸探针的构建及其在疾病标志物检测中的应用研究

发布时间：2023-08-06 14:50

　　随着科学技术的发展,荧光共振能量转移技术在生化分析和临床诊断中有着越来越广泛的应用。基于能量转移技术的核酸探针以核苷酸序列作为基本骨架,以碱基互补配对或其他相互作用方式作为识别机制,根据供体和受体间能量转移成功实现与否产生光信号或者电信号变化,将探针和靶物之间的作用体现出来。目前基于能量转移的核酸探针已经成功应用于检测生物小分子、蛋白质、核酸以及多种疾病标志物。然而,传统的能量转移荧光探针多采用单供体-单受体能量转移对。在仅有单个供体存在能量转移体系中,受能量转移效率的限制,供体荧光不能被完全猝灭,整个探针体系存在较高的背景信号和较低的信噪比,从而影响检测的灵敏度和准确性。为了解决这个问题,本论文通过构建单供体-多受体能量转移体系,结合核酸三螺旋结构,双核酸催化组装(catalyzed hairpin assembly,CHA)信号放大技术等构建了一系列通用型的低背景信号能量转移探针,实现了DNA,microRNA的灵敏检测,并将其进一步拓展应用到癌症的早期诊断中。本论文主要展开了以下两个工作:(1)设计了一种基于能量转移的单供体-四受体三螺旋核酸探针,并成功实现了丙型肝炎病毒DNA的...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩写符号对照表
第1章 论文选题依据及研究内容
    1.1 研究意义
    1.2 研究现状
        1.2.1 荧光共振能量转移核酸探针用于机理研究
        1.2.2 荧光共振能量转移核酸探针的分析应用
        1.2.3 基于能量转移的信号放大技术
        1.2.4 三螺旋能量转移探针的研究现状
    1.3 存在的主要问题
    1.4 本研究目标
    1.5 研究内容
    1.6 研究的可行性分析
第2章 单供体-四受体能量转移核酸探针用于丙型肝炎的灵敏检测
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验仪器
        2.2.2 实验材料
        2.2.3 实验方法
    2.3 实验结果与讨论
        2.3.1 实验原理
        2.3.2 丙型肝炎病毒DNA检测的可行性
        2.3.3 单供体-四受体核酸探针背景信号考察
        2.3.4 实验条件优化
        2.3.5 线性
        2.3.6 选择性和抗干扰能力
        2.3.7 丙型肝炎病毒DNA的实际样检测
    2.4 本章小结
第3章 无酶信号放大的单供体-多受体能量转移核酸探针用于microRNA-21的灵敏检测
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验仪器
        3.2.2 实验材料
        3.2.3 实验方法
    3.3 实验结果与讨论
        3.3.1 实验原理
        3.3.2 microRNA检测的可行性
        3.3.3 实验条件优化
        3.3.4 线性考察
        3.3.5 选择性
        3.3.6 实际样检测
    3.4 本章小结
第4章 总结与展望
    4.1 总结
    4.2 本文创新性
    4.3 展望
参考文献
硕士期间科研成果
致谢



本文编号：3839589