1例引起突发性耳聋的猪链球菌的鉴定及分子流行病学分析
发布时间:2024-03-05 18:48
目的分离鉴定1例突发性耳聋患者血液和脑脊液分离的猪链球菌并进行分子流行病学分析。方法采用VITEK-2Compact微生物系统进行初步鉴定和药敏试验,PCR扩增细菌的16SrRNA基因、7个管家基因及4种毒力基因。通过实时荧光定量PCR进行血清学分型,多位点序列分型(MLST)进行序列分型(STs)。结果传统细菌鉴定方法和16SrRNA基因测定方法均鉴定为猪链球菌,实时荧光定量PCR鉴定为猪链球菌2型,MLST分型为ST7,毒力因子溶血素基因、细胞外蛋白因子编码基因、荚膜多糖编码基因均为阳性。结论引起患者突发性耳聋的细菌为我国常见的猪链球菌2型,属于ST7型强毒株。
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【部分图文】:
本文编号:3919885
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图1菌落生长形态
报阳血标本接种后,经培养箱35℃孵育24h,哥伦比亚血平板上长出灰白透明色,针尖样露珠大小,光滑湿润,边缘整齐有α溶血环的菌落(图1)。经革兰染色,镜下观察为成双排列或短链状的革兰阳性球菌,呈散在、成对或短链状分布(图2)。图2菌株革兰染色镜检
图3疑似猪链球菌菌株16srRNA基因电泳图
7个管家基因电泳均得到清晰条带(图4),约500bp,与目标条带一致。aroA、cpn60、dpr、gki、muts、recA、thrA等位基因数量分别为1、1、1、1、1、1、3,与MLST数据库中的序列进行比对分析,发现此次分离到的菌株为ST7型。图4猪链球菌菌株PCR电泳....
图4猪链球菌菌株PCR电泳图
图3疑似猪链球菌菌株16srRNA基因电泳图2.5猪链球菌核酸和分型核酸检测
图5实时荧光定量PCR结果为猪链球菌
实时荧光定量PCR鉴定此菌株为猪链球菌血清型2型(图5、图6)。图6实时荧光定量PCR结果为猪链球菌2型
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