三七总皂苷在昆明小鼠急性炎性内脏痛中的作用及机制研究

发布时间：2017-08-07 21:02

  本文关键词：三七总皂苷在昆明小鼠急性炎性内脏痛中的作用及机制研究

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【摘要】：目的:探讨三七总皂苷(Panax Notoginseng Saponins,PNS)在乙酸所致小鼠急性炎性内脏痛中的镇痛作用及其与脊髓星形胶质细胞激活的关系。方法:本实验以雄性昆明小鼠为研究对象,按以下方式进行分组:(1)乙酸所致内脏痛模型组(Acetic Acid,AA)腹腔注射1%乙酸0.25ml、生理盐水对照组(Normal saline,NS)腹腔注射等体积生理盐水、空白对照组不做处理;(2)PNS预处理组(Pre-treatment):在内脏痛模型建立前1h,动物腹腔分别注射50mg/kg(50mg/kg Pre-PNS+AA)、100mg/kg(100mg/kg Pre-PNS+AA)、200mg/kg PNS(200mg/kg Pre-PNS+AA)或者等体积生理盐水(Pre-NS+AA);(3)PNS治疗组(Co-treatment):动物在注射注射200mg/kg PNS(C-PNS)或者等体积生理盐水(C-NS)后即刻注射1%乙酸。注射乙酸或者生理盐水后,观察1小时内小鼠的内脏痛觉表现(腹壁收缩),疼痛行为观察结束后,处死动物取材,采用免疫组织化学法和Western-blot观察脊髓星形胶质细胞标记物GFAP及GS的表达情况。另一部分正常小鼠在注射200mg/kg PNS(PNS组)或者等体积生理盐水(NS组)后1h,采用旷场实验对其活动度进行检测。结果:1.与生理盐水对照组相比,动物注射乙酸后出现明显的内脏痛反应;2.PNS预处理剂量依赖的降低乙酸所致内脏痛反应,与Pre-NS+AA组相比,100mg/kg Pre-PNS+AA组、200mg/kg Pre-PNS+AA组腹壁收缩次数减少,差异具有显著性(P0.001);3.与C-NS组相比,C-PNS组对乙酸所致内脏痛反应无影响(P0.05);4.旷场实验表明,与NS组相比,PNS组总的穿越格子数、中央格停留的时间及中央格穿越次数差异无显著性(P0.05);5.免疫组织化学法与Western-blot结果表明,与NS组相比,Pre-NS+AA、200mg/kg Pre-PNS+AA组小鼠脊髓GFAP及GS表达上调,差异具有显著性(P0.001);与Pre-NS+AA组相比,200mg/kg Pre-PNS+AA组GFAP及GS表达下调,差异具有显著性(P0.01)。结论:PNS预处理能缓解乙酸所致昆明小鼠的急性炎性内脏痛,其机制可能与PNS预处理抑制脊髓星形胶质细胞活化及GS表达有关。
【关键词】：昆明小鼠 急性炎性内脏痛 三七总皂苷 星形胶质细胞 谷氨酰胺合成酶
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R402
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 主要英文缩略语索引11-12
• 第1章 绪论12-16
• 第2章 实验材料及方法16-24
• 2.1 实验仪器和试剂16-17
• 2.1.1 实验仪器16-17
• 2.1.2 实验试剂与耗材17
• 2.2 药品和试剂配制17-19
• 2.3 实验方法19-24
• 2.3.1 实验动物及其分组19
• 2.3.2 急性炎性内脏痛模型制备19-20
• 2.3.3 行为学检测20
• 2.3.4 组织制备20-21
• 2.3.5 免疫组织化学检测（漂片法）21-22
• 2.3.6 Western Blot检测22-23
• 2.3.7 统计学方法23-24
• 第3章 实验结果24-34
• 3.1 行为学结果24-29
• 3.1.1 小鼠炎性内脏痛模型建立24-25
• 3.1.2 PNS预处理对急性炎性内脏痛影响25-26
• 3.1.3 PNS与乙酸同时注射对小鼠炎性内脏痛的影响26-27
• 3.1.4 腹腔注射 200mg/kg PNS对正常昆明小鼠的影响27-29
• 3.2 免疫组化检测GFAP的表达变化29-31
• 3.3 western blotting检测GFAP表达变化31-32
• 3.4 western blotting检测小鼠腰骶膨大段脊髓GS表达变化32-34
• 第4章 讨论34-38
• 第5章 结论38-40
• 参考文献40-44
• 文献综述 受体在内脏痛中的作用44-58
• 参考文献53-58
• 攻读学位期间的科研成果58-60
• 参与的课题60-62
• 致谢62

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本文编号：636664