构建PDCD5基因真核表达载体及电转染BGC823细胞的研究

发布时间：2017-08-22 17:45

  本文关键词：构建PDCD5基因真核表达载体及电转染BGC823细胞的研究

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【摘要】：目的构建PDCD5基因真核表达载体,并电转染BGC823细胞,获得稳定转染细胞。方法设计合成PDCD5基因片段,将其插入经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的pcDNA3.1~+表达载体,菌落PCR和基因测序进行鉴定。重组质粒电转染BGC823细胞,G418筛选数周后PCR鉴定稳定转染细胞。结果重组质粒经菌落PCR测序分析表明,PDCD5基因序列准确插入预期位置,且序列正确。重组质粒成功电转染BGC823细胞,并整合入细胞基因组DNA。结论成功构建了PDCD5基因真核表达载体,并整合进BGC823细胞基因组,为研究PDCD5基因的功能及胃癌的基因治疗提供实验基础。
【作者单位】： 齐齐哈尔医学院基础医学院;
【关键词】： PDCD基因 pcDNA.~+表达载体 电转染 BGC细胞系
【基金】：黑龙江省教育厅科研项目(12531797)
【分类号】：R735.2;R450
【正文快照】： 程序性细胞死亡因子5(programmed cell death 5,PDCD5)原名为TFAR19,由北京大学人类疾病基因中心从白血病细胞株TF-1细胞中克隆得到,具有促进多种细胞凋亡和抑制增殖的效应,其异常表达与多种肿瘤及自身免疫性疾病有相关性[1]。研究表明,PDCD5基因在胶质瘤细胞[2]、前列腺癌细

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