荧光PCR法检测痰标本中肺炎克雷伯菌及其产ESBL_s菌株的耐药性分析

发布时间：2017-09-07 10:40

  本文关键词：荧光PCR法检测痰标本中肺炎克雷伯菌及其产ESBL_s菌株的耐药性分析

  更多相关文章： 肺炎克雷伯菌 细菌培养法 荧光PCR法 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs) 耐药率

【摘要】：目的:比较分析细菌培养及荧光PCR法两种不同方法检测痰标本中肺炎克雷伯菌的差异,为临床提供一种快速准确检测肺炎克雷伯菌的方法——荧光PCR法;调查萍乡市人民医院痰标本中肺炎克雷伯菌的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率以及产ESBLS株的耐药情况,指导临床合理使用抗菌药物。方法:(1)对萍乡市人民医院68例疑似肺炎克雷伯菌感染病人采集送检的痰标本,采用细菌培养法及核酸(荧光PCR法)检测,结果进行对比统计分析。同时对荧光PCR法的特异性和灵敏度进行研究。(2)收集萍乡市人民医院2014年7月至12月临床分离肺炎克雷伯菌的169例痰标本,对产ESBLs肺炎克雷伯菌和非产ESBLs肺炎克雷伯菌的药敏结果进行对比分析,了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药情况。结果:(1)在68例痰标本中肺炎克雷伯菌检出的结果,常规细菌培养法检出阳性33例,阴性35例,阳性率48.53%;荧光PCR法检出阳性49例,阴性19例,阳性率72.06%。对肺炎克雷伯菌标本DNA检测得扩增产物,对非肺炎克雷伯菌无交叉反应,其检测灵敏度为1×103copies/ml。(2)169例检出肺炎克雷伯菌的痰标本中,分离出产ESBLs阳性株76株,其阳性率为44.97%;肺炎克雷伯菌产ESBLs株与非产ESBLs株对14种抗生素耐药情况的比较:两者均为检测对亚胺培南的敏感的菌株,但对其他抗生素产ESBLs株的耐药率均高于非产ESBLs株。结论:(1)荧光PCR法检出肺炎克雷伯菌的阳性率高于常规细菌培养法,具有很高的灵敏度和特异性,检测时间短,能为临床诊断提供及时准确的结果。(2)产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药情况严重,但对亚胺培南、美罗培南和哌拉西林/他唑巴坦呈现较高敏感性,可用于经验用药。
【关键词】：肺炎克雷伯菌 细菌培养法 荧光PCR法 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs) 耐药率
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R440
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文缩略词表9-10
• 第一部分 荧光PCR法检测痰标本中肺炎克雷伯菌10-18
• 1、材料和方法10-14
• 1.1 标本来源10
• 1.2 仪器和试剂10-12
• 1.2.1 主要仪器10-11
• 1.2.2 主要试剂11-12
• 1.3 方法12-14
• 1.3.1 固体培养体系12
• 1.3.2 常规细菌培养检测肺炎克雷伯菌12
• 1.3.3 核酸检测（荧光PCR法）12-14
• 1.3.4 特异性试验14
• 1.3.5 灵敏度试验14
• 1.4 统计学方法14
• 2、结果14-16
• 2.1 标准品的曲线绘制14-15
• 2.2 肺炎克雷伯菌检出情况15-16
• 2.3 特异性试验16
• 2.4 灵敏度试验16
• 3、讨论16-18
• 第二部分 产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药情况分析18-25
• 1、材料与方法18-21
• 1.1 标本来源18-19
• 1.2 主要仪器和试剂19
• 1.3 方法19-21
• 1.3.1 细菌分离鉴定与药敏试验19-20
• 1.3.2 ESBLs检测20-21
• 2、结果21-22
• 2.1 ESBLs株检出率21
• 2.2 耐药情况21-22
• 3、讨论22-25
• 致谢25-26
• 参考文献26-28
• 综述 产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的研究28-35
• 参考文献33-35

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