探讨应用表型方法检测产碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌

发布时间：2017-09-20 23:30

  本文关键词：探讨应用表型方法检测产碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌

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【摘要】：目的:鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)是院内感染最常见的条件致病菌之一,近些年发现,该菌耐药性日益广泛,为临床治疗带来了很大问题。因此,了解该菌的感染情况、耐药情况和耐药机制,可为临床及时有效的治疗该菌感染患者提供依据。该菌耐药机制复杂,其中对临床用于该类细菌感染的碳青霉烯类抗生素耐药的机制主要为产D类碳青霉烯酶。因此,本实验对邢台市第三医院2014年1月到2015年6月的101株和河北医科大学第二医院2015年5月到6月的20株临床标本所得非重复鲍曼不动杆菌的耐药情况进行了检测,并探讨了改良Carbapenemase Nordmann-Poirel test(Carb Acineto NP)和Carbapenem Inactivation Method(CIM)两种检测碳青霉烯酶的表型方法,并与基因检测做比对,以期找出更具敏感性和特异性的方法,为实验室开展表型方法检测鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶提供试验依据。方法:选择邢台市第三医院2014年1月到2015年6月和河北医科大学第二医院2015年5月到6月的临床标本进行细菌分离,共获得非重复鲍曼不动杆菌121株。根据临床实验室标准化委员会(CLSI)2014版标准,应用生物梅里埃VITAK-2 COMPARE全自动微生物仪进行细菌鉴定和药敏试验。对所有菌株采用煮沸法提取基因组DNA,并用普通PCR方法进行耐药基因的检测,然后分别应用Carb Acineto NP方法和CIM方法对所有细菌的碳青霉烯酶进行检测。统计分析比较Carb Acineto NP和CIM两种方法对检测鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶的敏感性和特异性。结果:121株鲍曼不动杆菌主要来源于重症医学科,呼吸科,神经外科和神经外科ICU,共占74.4%。标本类型主要为痰,占87.6%,其次为脑脊液,尿,分泌物,胸水和引流液。121株鲍曼不动杆菌中,70株对亚胺培南或美罗培南耐药,耐药率为57.9%;70株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌中67株菌PCR显示携带OXA-23基因,携带率为95.7%;所有菌株经PCR扩增未检测到携带KPC,IMP和VIM碳青霉烯酶基因。在69株OXA-23阳性菌株中,60株菌Carb Acineto NP为阳性,64株菌CIM为阳性;52株OXA-23阴性菌株中,50株菌Carb Acineto NP为阴性,51株菌CIM为阴性;以OXA-23为标准,Carb Acineto NP的敏感性和特异性分别为86.9%和96.2%,CIM的敏感性和特异性分别为92.8%和98.1%。经过卡方检验统计,Carb Acineto NP和CIM方法在统计学上与PCR基因方法比较,P0.05,差异无统计学意义,并且Carb Acineto NP和CIM两个方法比较,P0.05,差异无统计学意义。结论:鲍曼不动杆菌在重症医学科,呼吸科,神经外科和神经外科ICU感染严重且耐药广泛,尤其对原来有较好临床疗效的亚胺培南或美罗培南耐药率已达57.9%,OXA-23是耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌主要碳青霉烯酶基因型。根据Carb Acineto NP和CIM两个方法和PCR基因方法的比较,两个方法都是敏感性和特异性非常好的方法,并且CIM的敏感性和特异性更高。,CIM方法操作简单,费用低,结果易读,不需要专业的设备和技能,而且不受细菌培养时间,药敏片孵育时间,药敏片生产厂商,以及细菌是否产粘液的影响,因此适合在临床实验室开展。
【关键词】：鲍曼不动杆菌 碳青霉烯酶 OXA-23 CarbAcineto NP CIM
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R446.5
【目录】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 英文缩写9-10
• 引言10-12
• 第一部分 鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药基因检测12-29
• 前言12-15
• 结果15-16
• 附图16-18
• 附表18-22
• 讨论22-25
• 小结25-26
• 参考文献26-29
• 第二部分 应用CarbAcineto NP和CIM方法快速检测鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶29-40
• 前言29-32
• 结果32-33
• 附图33-34
• 附表34-36
• 讨论36-38
• 小结38-39
• 参考文献39-40
• 结论40-41
• 综述 碳青霉烯酶的检测方法41-52
• 参考文献48-52
• 致谢52-53
• 个人简历53

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本文编号：891063