螺虫乙酯对斑马鱼胚胎发育的影响

发布时间：2020-06-11 16:10

【摘要】：螺虫乙酯(spirotetramat)是拜耳公司于2007年推出的具有双向内吸性的新型季酮酸类杀虫剂,高效广谱,可有效防治各种刺吸式口器害虫,通过抑制昆虫脂类合成,达到杀虫效果。目前螺虫乙酯对环境毒性影响特别是对水生生物的影响研究较少。本实验以斑马鱼胚胎为研究对象,研究主要内容有:(1)螺虫乙酯对斑马鱼胚胎发育的致畸效应;(2)螺虫乙酯对斑马鱼胚胎发育过程中赖氨酰氧化酶的影响;(3)螺虫乙酯对斑马鱼胚胎发育过程中氧化应激系统的影响;(4)螺虫乙酯对斑马鱼胚胎发育过程中脂质合成途径的影响;(5)螺虫乙酯对斑马鱼胚胎发育过程中能量代谢的影响。通过以上内容,分析螺虫乙酯对斑马鱼胚胎发育的影响。螺虫乙酯对斑马鱼胚胎发育的致畸实验得出以下结果:(1)螺虫乙酯会导致斑马鱼胚胎发育延缓,并随着浓度的增加,畸形率升高,造成胚胎出现卵黄囊水肿、脊索弯曲、心包水肿、尾部弯曲的畸形类型;(2)螺虫乙酯抑制胚胎前48hpf阶段赖氨酰氧化酶基因的表达;(3)螺虫乙酯明显抑制了胚胎前72hpf的超氧化物歧化酶活性及表达;刺激了胚胎24hpf阶段谷胱甘肽过氧化物酶的表达量,在48hpf阶段其表达又被显著抑制;抑制了48、72hpf阶段过氧化氢酶表达量;丙二醛浓度仅在72hpf阶段2mg/L出现显著下降的现象,其他时间及处理组均无明显变化;(4)螺虫乙酯处理后显著抑制了其靶标乙酰辅酶A羧化酶活性及表达,同时抑制脂肪酸合成酶和甾醇调控元件结合蛋白基因的表达;(5)螺虫乙酯抑制了前24hpf腺苷酸激活蛋白激酶的表达,24hpf阶段农药处理组AMP/ATP比值上调,刺激腺苷酸激活蛋白激酶活性上升,但在48hpf就恢复正常,同时抑制了前24hpfATP酶的基因表达。上述实验结果表明:螺虫乙酯处理会导致胚胎发育迟缓,组织畸形;螺虫乙酯处理后,导致胚胎发育迟缓,组织发育异常,与斑马鱼胚胎发育过程中的脂质合成和能量代谢途径受农药影响有关;引起斑马鱼胚胎发生氧化应激,但没有造成氧化损伤;斑马鱼胚胎发育过程中脊索发育畸形是由于螺虫乙酯处理后导致赖氨酰氧化酶表达量下降引起的。
【图文】：

乙酯,斑马鱼,脊索

图 2.2 螺虫乙酯对斑马鱼胚胎孵化率的影响Figure 2.2 The effect of spirotetramat on the hatching rate of zebrafish embryos2.2.2 螺虫乙酯对斑马鱼胚胎的影响不同浓度螺虫乙酯处理下的斑马鱼胚胎，出现了不同程度的畸形（图 2.3），如卵黄囊水肿、脊索弯曲、心包水肿、尾部弯曲等（畸形分类根据斑马鱼致畸性等级体系评价表）[76]。由图 2.4-2.5 可知，，对照组未出现畸形，螺虫乙酯处理后，0.04、0.2、1、2mg/L，2mg/L 浓度处理组胚胎的平均畸形率分别为 25%、45%、60%、70%，斑马鱼胚胎畸形率随浓度的升高而增加，出现明显的剂量效应关系。其中，以脊索弯曲最为明显，2mg/L 浓度组的胚胎脊索弯曲率高达 60%。0.00.224 48 72 96发育时间hdevelopment time hCK 0.04mg/l 0.2mg/l 1mg/l 2mg/l

标准曲线,出峰,标准曲线,图谱

图 4.1 标准曲线Figure 4.1 Standard curvey = 2E+07x - 342185R2 = 0.99710200000040000006000000800000010000000120000001400000016000000180000000 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2面积峰eakprea浓度concentration mg/mL
【学位授予单位】：浙江农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S481

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