茶尺蠖肠道真菌Penicillium mallochii的抗菌活性成分研究

发布时间：2020-06-11 19:38

【摘要】：昆虫肠道内生菌是一类特境微生物,是新活性代谢产物的重要来源。本文主要对茶尺蠖肠道真菌Penicillium mallochii的抗菌活性成分进行了研究,主要研究结果如下:1、从茶尺蠖肠道中分离筛选到一株内生真菌CCH01,经过形态学和分子生物学鉴定,将其确定为P.mallochii。通过硅胶色谱层析、凝胶柱色谱(Sephadex LH-20)、重结晶等方法从该菌株的次级代谢产物中分离到5个化合物,经波谱学方法鉴定这5个化合物分别为:甘露醇(1)、麦角甾醇(2)、penoxide B(3)、isochromophilone IV(4)、sclerotioramine(5)、(+)sclerotiorin(6)。2、改变培养条件,分析其对代谢产物的影响,发现麦芽培养基比马铃薯土豆培养基培养菌株的次级代谢产物更丰富;固体培养比液体培养的次级代谢产物更丰富。3、对真菌进行等离子体诱变后,发现120s诱变后的次级代谢产物较对照组产物量增多;添加不同药物(烟酰胺,5-氮杂孢苷,伏立诺他,丙戊酸)对菌株进行遗传修饰,结果从伏立诺他修饰的真菌代谢产物中获得2种新结构化合物:SAHA-X_1(7)、SAHA-X_2(8)。4、对真菌的次生代谢产物进行抗菌活性的测试,结果发现:isochromophilone IV(4)对玉米弯孢病原真菌有一定的抗菌活性;sclerotioramine(5)对于玉米炭疽病原真菌有较高的抗菌活性,抑制活性的IC_(50)值为1.78μg/ml;(+)sclerotiorin(6)对玉米弯孢病原真菌、苦瓜枯萎病原真菌、茶树褐色叶斑病真菌均具有较高的抗菌活性,其抑制活性的IC_(50)值分别为2.10μg/ml、4.04μg/ml、2.78μg/ml;在供试浓度为30μg/滤纸片时,化合物5和6对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、四联球菌有一定的抗菌活性,抑菌圈直径在4.00-9.50 mm间;新化合物SAHA-X_2(8)对白色念珠菌有一定的抗菌活性,抑菌圈直径为10.5 mm,对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌有非常弱的抗菌活性,抑菌圈直径分别为2.95 mm和3.00 mm。
【图文】：

18分生孢子特征图 4-1 菌落特征及分生孢子特征 4-1 characteristics of colonyandcharacteristic of s组 DNA 提取方法，提取出目标菌株物公司测序后，菌株 CCH01 返回的ast 比对后，结果发现该菌与 P. mallo 99%，选取 11 组 ITS 相似的序列构征，确定菌株为 P. mallochi。

20图 4-3 单体化合物 1-6 结构图Fig 4-3 Structures of compounds 1-6固体，少量溶于 DMSO(二甲基亚砜)，不溶据与文献[70]氢谱数据相似，其化学位移 ，δ=3.396，δ=3.439，δ=3.529，δ=3.549，，，δ=4.458 氢谱图与甘露醇标准图谱相近，所附录 A。针状晶体，熔点 181 一 183 ℃，易溶于氯仿1H NMR（600MHz, CDCl3） δ3.62(1H, m, H0.62(3H, s, H-18), 0.83(3H, m, H-19), 1.03(3H
【学位授予单位】：安徽农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S435.711;Q936

【参考文献】

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本文编号：2708360