破坏素的分离提取及其与农药混配对苹果黄蚜的毒力

发布时间：2020-08-14 23:09

【摘要】：山西是苹果生产大省,每年苹果黄蚜的为害给我省造成了巨大的经济损失。当前防治苹果黄蚜的方法主要还是化学农药,但是由于化学农药的不合理使用,导致苹果黄蚜对许多农药产生了抗性,农药残留超标,果品品质也逐年降低,对环境也造成了污染,因此寻找一种环境友好型药剂已经迫在眉睫。破坏素(Destruxins)是由虫生真菌绿僵菌分泌,是一种对昆虫类具有广谱的杀虫特性的生物毒素。具有高效低毒,对环境无污染,不易产生抗性等特点。但其成本较高,很难大面积推广使用。本文通过研究破坏素的分离提取并筛选破坏素与常规化学农药的最佳复配比例,实现化学农药的减量化使用。本文就破坏素和常规化学农药以及其混配药剂对苹果黄蚜的毒力进行了测定,并开发了复配制剂,主要研究结果如下:1、首先从蛴螬(金龟子幼虫)中分离出绿僵菌菌株,并对该菌株进行纯化。通过发酵培养,采取有机液相萃取毒素,再利用半制备高效液相色谱分离毒素。经分析发酵液中含有四种毒素混合物(破坏素A、B、D、E),色谱分离得到稳定性较高的破坏素A,其纯度为91%,破坏素A的产量为0.07 g/L发酵液。2、采用浸叶法测定破坏素与农药对苹果黄蚜的毒力。结果表明破坏素、高效氯氰菊酯、阿维菌素、吡虫啉、啶虫脒和烯啶虫胺的致死中浓度(LC_(50))分别为0.016 mg/L、0.221 mg/L、0.221 mg/L、2.242 mg/L、8.247 mg/L和9.793 mg/L,表明破坏素对苹果黄蚜具有较高的毒性。3、将破坏素与防治苹果黄蚜的常规农药进行混配,测定混配药剂对苹果黄蚜的毒力。结果发现:在五种混配方式中,破坏素与阿维菌素混配对苹果黄蚜的毒力最好,两者混配后的LC_(50)为0.148 mg/L。当破坏素和阿维菌素以9:1的比例混配时,共毒系数为176.36,毒力效果最佳。根据实验结果,结合经济成本等问题,选择两者以4:6的比例进行混配并且研发了几种混配制剂。随着害虫抗性等问题的产生,农药混配的应用越来越广泛。为了能够更加有效地防治苹果黄蚜,降低农药残留,解决害虫的抗药性问题,本研究中首次利用破坏素与农药混配防治苹果黄蚜,研究结果对于降低农药残留,提高果蔬品质,保护生态坏境具有重要的意义,对于无公害或绿色食品的生产具有重要意义;实现果树农药的减量化使用,全面积极地响应国家十三五“药肥双减”的号召,同时对于提高我省果品市场竞争力,推动地方经济发展起重要的作用。为害虫绿色防控提供基础,为我国农业的可持续发展保驾护航。
【学位授予单位】：山西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：TQ450.2
【图文】：

绿僵菌,菌落直径

破坏素的分离提取及其与农药混配对苹果黄蚜的毒力特性检测破坏素的提取量吸取 1 mL 浓缩得到的混合物，用 0.25 μm 的微量滤膜过滤得到过滤液放入品的小瓶子备用；然后可以利用 HPLC 对样品进行分析。结果与分析菌株的分离与纯化绿僵菌的培养最适条件为 26 ℃，本研究中，从染菌金龟子上分离纯化的绿菌株随时间的生长状态如图 2.1 所示。生长一周时，菌落直径大小为 0.5 mm数是以白色絮状为主；两周后菌落直径大小约 1.0 mm，会产生孢子，颜色色或深绿色；到第三周，绿僵菌会长满整个平板。A BC

流程图,提取纯化,流程图

图 2.2 破坏素的提取纯化流程图Figure 2.2 Destruxins of the extraction and purification process图 2.3 HPLC 分析结果Figure 2.3 HPLC analysis results

分析结果图,绿僵菌,半制备,真空浓缩

图 2.2 破坏素的提取纯化流程图Figure 2.2 Destruxins of the extraction and purification proces绿僵菌的分离优化绿僵菌的培养发半制备分离真空浓缩萃

【参考文献】