桑树种质资源倍性测定及诱导研究

发布时间：2020-08-25 02:49

【摘要】：我国桑树种质资源丰富,随着不断地收集和保存,在各地区建立了种质资源圃。资源圃提供丰富的育种材料,为了更好的开发利用种质资源,桑树种质资源的测定评价是必不可少的环节。本文对广西桑树种质资源进行倍性测定,明确所保存的种质资源的倍性情况。同时利用化学方法对桑种子和桑幼苗进行倍性诱导,从中选育多倍体植株,对诱导后桑幼苗生长情况进行观察,初步了解桑幼苗倍性诱导的规律,为桑树多倍体育种提供一定的理论依据。本文主要利用流式细胞术测定桑树倍性。在研究中选择桑树的不同叶位、同一张幼叶的不同部分、脱苞期的叶芽、种子发芽后的胚根进行流式细胞术检测,发现不同取材部位影响流式细胞术检测效果。实验结果表明流式细胞术检测倍性效果:幼叶第1叶位叶第2叶位叶;幼叶叶基幼叶叶尾,叶芽是理想的倍性检测材料,但叶芽采样不易。根据综合因素考虑,确定选择幼叶作为桑树倍性检测材料。主要的研究结果如下:在检测的527份桑树种质资源中,测定出二倍体268份,三倍体154份,四倍体88份,混倍体17份。17份混倍体中混有二倍体细胞和三倍体细胞的有9份,混有二倍体细胞和四倍体细胞的有8份。在已测定的桑树种质资源中分别选取二倍体、三倍体、四倍体桑树各5株,在不同时间段分别进行叶绿素SPAD(Soil and Plant Analyzer Development,SPAD)值、可溶性糖含量、总蛋白质浓度的测定。实验结果表明:叶绿素SPAD值和总蛋白质浓度与月份呈现的规律为8月下旬9月下旬10月下旬11月下旬,可溶性糖含量呈现的基本趋势为9月下旬≈10月下旬≤11月下旬8月下旬。检测两组不同的二倍体桑树与四倍体桑树杂交后代F1植株的倍性情况,每个杂交组合检测100株。实验结果显示:桑树杂交组合A的F1植株中三倍体占96%,二倍体占4%,桑树杂交组合B的F1植株中三倍体占82%,二倍体占18%。利用种子浸泡法和幼苗滴药法对桂桑优62(二倍体)、桂桑6号(三倍体)进行诱导处理,诱导后的植株经流式细胞术进行倍性测定。实验结果显示:经种子浸泡法诱导的桂桑优62的诱变率为3.3%,桂桑6号的诱变率为2.7%。经幼苗滴药法进行诱导的桂桑优62的诱变率为11.3%,桂桑6号的诱变率为8.2%。实验过程中对种子浸泡法诱导后的幼苗的生长情况以及幼苗解剖结构进行观察,发现幼苗在前期生长过程中呈现两种不同状态,一种为下胚轴先不伸出地面就开始进行植株生长,另一种为胚轴先伸出地面后再进行植株生长。
【学位授予单位】：广西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S888.3
【图文】：

２．２．１对照品２邋Ｘ１０９早上８：００—９：００采样沙２ｘ伦１０９，将采回的新鲜顶芽完全浸没在固定一一解离液逡逑中３－５ｍｉｎ，当材料开始变成黄褐色时迅速与固定一一解离液脱离，用清水漂洗３次，第逡逑３次在清水中放置１０－１５邋ｍｉｎ进行低渗处理。夹取少许低渗后的材料置于干净滤纸上吸逡逑去多余的水分，然后至于载玻片上，滴加改良苯酚品红染液染色１－２邋ｍｉｎ，盖上盖玻片，逡逑排出气泡，将载玻片置于平整桌面上用尖端带橡胶的木棒垂直均匀地敲击盖玻片，制片逡逑完成后用１００倍普通光学显微镜进行观察，拍照，记录。逡逑２．２．２不同取材部位的流式细胞术检测效果的比较逡逑（１）材料的选择逡逑取材时间为２０１７年冬季１２月中旬至２０１８年１月上旬，取材主要分为４部分，第逡逑一部分为不同叶位的选择，即尚未完全展开的幼叶、第１叶位，第２叶位；第二部分为逡逑同一幼叶的不同部位，分为叶基和叶尾；第三部分为脱苞期的叶芽，第四部分为种子发逡逑芽后的胚根，具体形态示意图如图２－１所示。逡逑

在９６孔板中依次加入０、１、２、４、８、１２、１６、２０邋ｐＬ的２邋ｍｇ／ｍＬ邋ＢＳＡ标准液，逡逑力口１卟８５补足至２０＃，再加入２００吣８０八工作液，６０°０放置３0１＾１１，将９６孔板置于逡逑５６２邋ｕｒｎ波长下检测吸光度，绘制标准曲线，标准曲线如图２－３所示。逡逑３．５逡逑３逦ｙ＝邋１．４９６６１Ｘ邋＋０．２６３９０４逡逑Ｒ２邋＝邋０．９９２逡逑２．５逡逑§邋２逡逑０邋？逡逑０逦０．５逦１逦１．５逦２逦２．５逡逑浓度（ｍｇ／ｍＬ）逡逑图２－３蛋白质浓度标准曲线逡逑Ｆｉｇ．邋２－３邋Ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑１５逡逑

逦０．２５逡逑糖含量（ｍｇ／ｍＬ）逡逑图２－２可溶性糖标准曲线逡逑Ｆｉｇ．邋２－２邋Ｓｏｌｕｂｌｅ邋ｓｕｇａｒ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑２．２．５蛋白质标准曲线的绘制逡逑在９６孔板中依次加入０、１、２、４、８、１２、１６、２０邋ｐＬ的２邋ｍｇ／ｍＬ邋ＢＳＡ标准液，逡逑力口１卟８５补足至２０＃，再加入２００吣８０八工作液，６０°０放置３0１＾１１，将９６孔板置于逡逑５６２邋ｕｒｎ波长下检测吸光度，绘制标准曲线，标准曲线如图２－３所示。逡逑３．５逡逑３逦ｙ＝邋１．４９６６１Ｘ邋＋０．２６３９０４逡逑Ｒ２邋＝邋０．９９２逡逑２．５逡逑§邋２逡逑０邋？逡逑０逦０．５逦１逦１．５逦２逦２．５逡逑浓度（ｍｇ／ｍＬ）逡逑图２－３蛋白质浓度标准曲线逡逑Ｆｉｇ．邋２－３邋Ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑１５逡逑

【参考文献】

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1 邱长玉;朱方容;林强;朱光书;曾燕蓉;崔秋英;张朝华;;桑树叶片SPAD值及其与养蚕成绩的相关性[J];南方农业学报;2015年12期

2 王振江;罗国庆;戴凡炜;肖更生;唐翠明;;91份广东桑四倍体种质资源的农艺性状遗传多样性分析[J];蚕业科学;2015年06期

3 吴青青;赖彪;朱文超;钟沛霖;;流式细胞术检测草莓倍性的方法优化[J];现代农业科技;2015年20期

4 杜贤明;邓真华;彭晓虹;叶武光;匡英秋;;江西省桑种质资源栽培保存与研究现状[J];蚕桑茶叶通讯;2015年02期

5 张正国;陈祥平;范小敏;杨今后;冯永德;柯皓天;吕银;;桑树四倍体品种团桑11号的选育[J];蚕业科学;2015年01期

6 畅晋钢;;山西省桑树种质资源分布及其性状[J];中国蚕业;2015年01期

7 赵黎明;解保胜;那永光;顾春梅;李明;郑殿峰;;简述SPAD-502在水稻及其它作物上应用的研究进展[J];北方水稻;2015年01期

8 张丽珍;杨冬业;刘杰;曾惠玲;;超富集植物商陆多倍体诱导研究[J];北方园艺;2014年16期

9 洪陈洁;林晗;吴承祯;;植物多倍体特征与诱导及其应用[J];武夷学院学报;2014年02期

10 韩莎;李四军;许晓东;苏超;焦锋;;利用流式细胞仪快速鉴定桑树细胞的染色体倍数性[J];蚕业科学;2013年06期

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2 林强;朱方容;邱长玉;陈小青;朱光书;李乙;;广西桑树四倍体种质资源的研究进展[A];中南五省区蚕桑育种协作研讨会论文集[C];2009年

3 四川省农业科学院蚕业研究所课题组;;新桑品种川826育成[A];全国桑树种质资源及育种和蚕桑综合利用学术研讨会论文集[C];2005年

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2 张敏;柑橘果实扇形嵌合体的分离及两组嫁接嵌合体的遗传研究[D];华中农业大学;2006年

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3 吴林;体细胞化学诱导金银花四倍体及抗盐突变体研究[D];西南大学;2012年

4 王俊敏;水稻空间诱变机理及其在新品种选育中的应用[D];浙江大学;2012年

5 宋尚文;盐胁迫下6个桑树品种反应特性研究[D];山东农业大学;2011年

6 孙马;中国野生葡萄染色体倍性的研究[D];西北农林科技大学;2006年

7 梁明芝;桑树人工诱导混倍体品种‘鲁诱1号’选育[D];中国农业大学;2005年

8 徐立;人工三倍体桑树新品种遗传背景的AFLP分析[D];西南农业大学;2003年

本文编号：2803162