褐飞虱bZIP超家族基因NlATFC、NlCEBP和NlCREB的克隆及功能分析
发布时间：2020-12-29 00:12
昆虫耐受异源物质的主要机制是解毒代谢酶基因过量表达导致解毒酶活力增加,且解毒酶基因表达的调控机制是当前研究的热点。本文以水稻重要害虫褐飞虱为研究材料,克隆和鉴定了褐飞虱三个bZIP超家族基因转录因子激活伴侣NlATFC、转录因子CAAT区增强子结合蛋白NlCEBP和转录因子环腺苷酸反应元件结合蛋白NlCREB,以及药剂胁迫下三个基因的表达模式,结合RNAi探究了三个基因的生物学功能。主要结果如下:1.根据NCBI和InsectBase数据库分析,结合PCR技术,克隆了 bZIP超家族基因NlATF、NlCEBP和NlCREB cDNA的全长序列,其ORF长度分别为1197 bp、447 bp和906 bp,分别编码397、148和301个氨基酸残基,均具有典型的bZIP结构域。系统发育分析表明褐飞虱的NlATFC与半翅目的烟粉虱亲缘关系较近,而NlCEBP和NlCREB均与半翅目的茶翅蝽的亲缘关系较近。2.利用qRT-PCR分析了褐飞虱NlA TFC、NlCEBP和NlCREB时空表达模式,结果表明NlATFC、NlCEBP和NlCREB在褐飞虱不同发育阶段均有表达,NlATFC在卵期...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?ｂＺＩＰ基序－ＤＮＡ复合体结构（熊乐２０１６）??Ｆｉｇ?１?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｂＺＩＰ?ｍｏｔｉｆ－ＤＮＡ?ｃｏｍｐｌｅｘ??
３．２．２?Ｍ４７ＴＣ、ＭＣＭ尸和在褐飞虱不同发育阶段的表达谱??为了探索ＭＪｒＦＣ、和Ａ７ａ？￡５在褐飞虱生长发育中的作用，采用实时??荧光定量ＰＣＲ分析了其在不同发育阶段的表达情况。结果如图９所示，在??卵期的表达量较高，且表达量随龄期的增长而下降，其中４龄若虫期表达量最低，５??龄若虫和成虫期略有升高；尸在卵期和成虫期的表达量较高，其余发育阶段??均维持在一个相对稳定且较低的水平；ＭＣ／？五５在成虫期的表达量最高，在２龄若??虫和４龄若虫期表达量较低。表明了?ＪＶＬ４７ＦＣ和ｉＶ／ＣＭＰ可能在褐飞虱卵期发育过??程中具有重要意义，而和可能与褐飞虱成虫期的生理活动相关。??３８??
??结果如图１０所示，Ｍ４７ＦＣ在中肠的表达量较高；而ＭＣ￡５Ｐ在脂肪体和马氏管的??表达量较高；在中肠和马氏管的表达量较高。７ＶＬ４７ＦＣ、和??均在头部和表皮的表达量较低，而在脂肪体、中肠和马氏管中表达量较高，表明??ＭｊｒＦＣ、ＭＣＥ５Ｐ和Ａ７Ｃ７？￡５可能与褐飞虱脂肪体、中肠和马氏管功能密切相关。??Ａ??５ｎ??ｉ?４?ａ??ｉ??ｉ：ｌｉ?■?■?Ｉ?ｉ??Ｈｅａｄ?Ｃｕｔｉｃｌｅ?Ｆａｔ?ｂｏｄｙ?Ｍｉｄ?ｇｕｔ?Ｍａｌｐｉｇｈｉａｎ?ｔｕｂｅ??Ｂ??６－??Ｉ，??ｉＬｉｉｉ??Ｈｅａｄ?Ｃｕｔｉｃｌｅ?Ｆａｔ?ｂｏｄｙ?Ｍｉｄ?ｇｕｔ?Ｍａｌｐｉｇｈｉａｎ?ｔｕｂｅ??Ｃ??ｔ］?ｉｉ??ｉｊ??Ｉ?Ｉ??Ｈｅａｄ?Ｃｕｔｉｃｌｅ?Ｆａｔ?ｂｏｄｙ?Ｍｉｄ?ｇｕｔ?Ｍａｌｐｉｇｈｉａｎ?ｔｕｂｅ??图１０?Ｍｄ７ＦＣ（Ａ）、ＭＣ￡ＡＰ?（Ｂ）和ＭＣ兄Ｍ?（Ｃ）在不同组织的表达模式??（柱形图表示平均数±标准误，柱上不同字母表示显著性差异（Ｐ＜０．０５））??Ｆｉｇ?１０?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｐａｔｔｅｒｎｓ?ｏｆ?ＮＩＡＴＦＣ?（Ａ），?ＮＩＣＥＢＰ?（Ｂ）?ａｎｄ?ＮＩＣＲＥＢ?（Ｃ）?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ??（Ｂａｒ?ｇｒａｐｈ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ｍｅａｎ土ＳＥ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｅｔｔｅｒｓ?ｏｎ?ｅａｃｈ?ｂａｒ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｔｈｅ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ??（Ｐ＜０．０５））??４０??
本文编号：2944621
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?ｂＺＩＰ基序－ＤＮＡ复合体结构（熊乐２０１６）??Ｆｉｇ?１?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｂＺＩＰ?ｍｏｔｉｆ－ＤＮＡ?ｃｏｍｐｌｅｘ??
３．２．２?Ｍ４７ＴＣ、ＭＣＭ尸和在褐飞虱不同发育阶段的表达谱??为了探索ＭＪｒＦＣ、和Ａ７ａ？￡５在褐飞虱生长发育中的作用，采用实时??荧光定量ＰＣＲ分析了其在不同发育阶段的表达情况。结果如图９所示，在??卵期的表达量较高，且表达量随龄期的增长而下降，其中４龄若虫期表达量最低，５??龄若虫和成虫期略有升高；尸在卵期和成虫期的表达量较高，其余发育阶段??均维持在一个相对稳定且较低的水平；ＭＣ／？五５在成虫期的表达量最高，在２龄若??虫和４龄若虫期表达量较低。表明了?ＪＶＬ４７ＦＣ和ｉＶ／ＣＭＰ可能在褐飞虱卵期发育过??程中具有重要意义，而和可能与褐飞虱成虫期的生理活动相关。??３８??
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