黏虫β-N-乙酰葡萄糖苷酶和几丁质酶cDNA的克隆及特性研究

发布时间:2020-12-30 15:05
  几丁质是昆虫重要的组成成分,几丁质代谢系统的正常运转对昆虫蜕皮至关重要。β-N-乙酰葡萄糖苷酶和几丁质酶作为几丁质降解的关键酶,对昆虫生长发育具有重要的意义。黏虫Mythimna separata Walker作为我国粮食作物的主要害虫,近年来,在我国多个省市地区大发生,造成了高密度的集中危害,对我国粮食安全造成严重的威胁。由于几丁质在高等动植物体内没有分布,因此,将β-N-乙酰葡萄糖苷酶和几丁质酶基因作为黏虫生物农药新的靶标基因,是害虫生物防治技术研究的关键环节。以黏虫为试验材料,克隆获得新的β-N-乙酰葡萄糖苷酶基因MsNAG和几丁质酶基因MsCHT7的cDNA序列,并研究黏虫两种基因在不同发育阶段和组织中的表达规律,及20-羟基蜕皮甾酮(20E)对两种基因表达的影响;利用RNAi技术,对MsNAG基因进行功能性研究,为黏虫的生物技术防治提供新思路。利用RT-PCR和RACE技术在黏虫中克隆得到β-N-乙酰葡萄糖苷酶MsNAG的cDNA序列。cDNA序列全长2619 bp,包含1个长度为1785 bp的开放阅读框,编码一个含有594个氨基酸的多肽,等电点为5.19,分子量为57.8... 

【文章来源】:东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】:67 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

黏虫β-N-乙酰葡萄糖苷酶和几丁质酶cDNA的克隆及特性研究


黏虫MsNAGcDNA序列全长克隆产物100bp

黏虫,信号肽,基因,预测图


其中黏虫 MsNAG 基因氨基酸的信号肽切割位点在 20 和 21 位之间(图3-5A),MsCHT7 基因氨基酸的信号肽在 26 和 27 位之间(图 3-5B)。A

死亡率,蛹期,幼虫


龄幼虫;3:蛹期;4 成虫2: 6thinstar larvae; 3: pupae; 4: adults图 3-17 注射 dsRNA 后昆虫的死亡率Figure 3-17 Insects mortalities after dsRNA injection


本文编号:2947847

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