防治Phoma segeticola var. camelliae的药剂筛选及作用机制研究
发布时间：2021-01-12 15:37
Phoma segeticola var.camelliae是本课题组从贵州石阡茶园茶斑点病害中分离出的病原菌。该病害在嫩叶、新梢以及成叶均有发生。病叶可畸形扭曲,易脱落,病叶生长发育缓慢,严重影响了茶叶的品质及产量,但是目前缺乏有效的防治措施。本研究采用菌丝生长速率法测定了中生菌素、春雷霉素及宁南霉素对P.segeticola var.camelliae菌株GZSQ-4的抑菌活性,EC50值分别为5.10μg/mL、140.17μg/mL、2553.85μg/mL。其中宁南霉素对真菌的抑菌机制未见报道,值得深入研究。为了进一步研究宁南霉素对病原菌的作用机制,在宁南霉素EC50浓度条件下,本文采用光学显微镜、扫描电镜及透射电镜观察宁南霉素处理病原菌1 h和14 h后的菌丝形态,发现宁南霉素处理后病原菌菌丝膨胀,菌丝内容物密度降低,显现颗粒内容物,线粒体数量增多;用DAPI染色宁南霉素处理后的菌丝细胞核,发现药剂处理后的菌丝细胞核并无明显变化;采用转录组技术进一步研究宁南霉素对GZSQ-4基因表达的影响,结果表明,宁南霉素在EC50<...
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词列表
前言
第一章 文献综述
1.1 茶叶主要病害及防治研究进展
1.2 Phoma属病原菌的研究进展
1.3 转录组学在微生物研究中的应用
1.4 抗生素的作用机制
1.5 宁南霉素研究进展
1.6 结语
第二章 研究路线设计
2.1 研究目的及意义
2.2 拟解决的主要问题
2.3 研究内容
2.4 研究路线
第三章 实验部分
3.1 实验材料
3.1.1 供试菌株
3.1.2 供试药剂
3.1.3 主要仪器
3.1.4 试剂
3.2 不同药剂对GZSQ-4 的抑菌活性
3.3 形态学观察宁南霉素对GZSQ-4 的影响
3.3.1 样品的制备
3.3.2 光学显微镜观察
3.3.3 扫描电镜观察
3.3.4 透射电镜观察
3.3.5 荧光显微镜观察
3.4 转录组测序研究宁南霉素对GZSQ-4 的基因表达的影响
3.4.1 GZSQ-4 的样品的制备
3.4.2 mRNA文库构建和测序
3.4.3 测序序列统计与质控
3.4.4 生物信息学分析
3.5 RT-qPCR验证差异表达的基因
3.5.1 RNA的提取
3.5.2 RT-qPCR引物设计
3.5.3 RNA反转录
3.5.4 RT-qPCR
第四章 结果
4.1 不同药剂对菌株GZSQ-4 的离体抑菌活性
4.2 形态学观察宁南霉素对GZSQ-4 的影响
4.2.1 光学显微镜观察
4.2.2 扫描电镜观察
4.2.3 透射电镜观察
4.2.4 荧光显微镜观察
4.3 转录组学研究宁南霉素对GZSQ-4 基因表达的影响
4.3.1 转录组生物学重复样品的质控
4.3.2 差异基因的筛选
4.3.3 差异基因的生物信息学分析
4.3.4 差异基因的验证
第五章 结论与讨论
5.1 主要研究结果
5.1.1 药剂抑菌活性测定
5.1.2 宁南霉素对GZSQ-4 的作用机理研究
5.2 创新点
5.3 不足之处
致谢
参考文献
附录
1 课题来源
2 研究生期间发表论文
3 附表
【参考文献】：
期刊论文
[1]茶轮斑病体外抑制试验及大田防治效果[J]. 董照锋. 山西农业大学学报(自然科学版). 2019(01)
[2]不同杀菌剂对茶云纹叶枯病菌的体外抑制作用和大田防治效果[J]. 董照锋,熊潇垚,陈光华. 河南农业科学. 2018(11)
[3]贵州惠水县茶轮斑病病原菌的鉴定[J]. 李冬雪,赵晓珍,王勇,练珊珊,任亚峰,陈卓. 热带作物学报. 2018(09)
[4]茶树新病害病原菌Phoma segeticola var. camelliae的形态学特征及系统学分析[J]. 赵晓珍,王勇,李冬雪,任亚峰,陈卓. 植物病理学报. 2018(04)
[5]茶树主要病害及其防治[J]. 戚利潮,张叶大. 茶叶. 2016(01)
[6]陕西省苜蓿茎点霉叶斑病病原菌的鉴定[J]. 李洪建,李芳红,史健,呼天明,程积民,钱永华,焦锋. 草地学报. 2015(06)
[7]贵州茶树病虫害防控现状及对策建议[J]. 施利,江健,王勇,吴琼,姜霞,严家斌,薛伟,胡德禹,谈孝凤,陈卓. 茶叶. 2015(03)
[8]茶云纹叶枯病病原鉴定[J]. 李应祥,陈跃华,杨青,王为镇,陈卓,郑松,谈孝凤,王勇. 贵州农业科学. 2015(01)
[9]新型植物源生物农药“植丰宁”防治茶叶炭疽病试验报告[J]. 翁城武,李亦军,黄炜娟,詹艺红,沈彤. 福建茶叶. 2014(03)
[10]油茶皂素对茶轮斑病和茶白星病的抑菌作用[J]. 崔宏春,周铁锋,余继忠,敖存,黄海涛,郑旭霞. 浙江农业科学. 2012(09)
本文编号：2973054
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词列表
前言
第一章 文献综述
1.1 茶叶主要病害及防治研究进展
1.2 Phoma属病原菌的研究进展
1.3 转录组学在微生物研究中的应用
1.4 抗生素的作用机制
1.5 宁南霉素研究进展
1.6 结语
第二章 研究路线设计
2.1 研究目的及意义
2.2 拟解决的主要问题
2.3 研究内容
2.4 研究路线
第三章 实验部分
3.1 实验材料
3.1.1 供试菌株
3.1.2 供试药剂
3.1.3 主要仪器
3.1.4 试剂
3.2 不同药剂对GZSQ-4 的抑菌活性
3.3 形态学观察宁南霉素对GZSQ-4 的影响
3.3.1 样品的制备
3.3.2 光学显微镜观察
3.3.3 扫描电镜观察
3.3.4 透射电镜观察
3.3.5 荧光显微镜观察
3.4 转录组测序研究宁南霉素对GZSQ-4 的基因表达的影响
3.4.1 GZSQ-4 的样品的制备
3.4.2 mRNA文库构建和测序
3.4.3 测序序列统计与质控
3.4.4 生物信息学分析
3.5 RT-qPCR验证差异表达的基因
3.5.1 RNA的提取
3.5.2 RT-qPCR引物设计
3.5.3 RNA反转录
3.5.4 RT-qPCR
第四章 结果
4.1 不同药剂对菌株GZSQ-4 的离体抑菌活性
4.2 形态学观察宁南霉素对GZSQ-4 的影响
4.2.1 光学显微镜观察
4.2.2 扫描电镜观察
4.2.3 透射电镜观察
4.2.4 荧光显微镜观察
4.3 转录组学研究宁南霉素对GZSQ-4 基因表达的影响
4.3.1 转录组生物学重复样品的质控
4.3.2 差异基因的筛选
4.3.3 差异基因的生物信息学分析
4.3.4 差异基因的验证
第五章 结论与讨论
5.1 主要研究结果
5.1.1 药剂抑菌活性测定
5.1.2 宁南霉素对GZSQ-4 的作用机理研究
5.2 创新点
5.3 不足之处
致谢
参考文献
附录
1 课题来源
2 研究生期间发表论文
3 附表
【参考文献】：
期刊论文
[1]茶轮斑病体外抑制试验及大田防治效果[J]. 董照锋. 山西农业大学学报(自然科学版). 2019(01)
[2]不同杀菌剂对茶云纹叶枯病菌的体外抑制作用和大田防治效果[J]. 董照锋,熊潇垚,陈光华. 河南农业科学. 2018(11)
[3]贵州惠水县茶轮斑病病原菌的鉴定[J]. 李冬雪,赵晓珍,王勇,练珊珊,任亚峰,陈卓. 热带作物学报. 2018(09)
[4]茶树新病害病原菌Phoma segeticola var. camelliae的形态学特征及系统学分析[J]. 赵晓珍,王勇,李冬雪,任亚峰,陈卓. 植物病理学报. 2018(04)
[5]茶树主要病害及其防治[J]. 戚利潮,张叶大. 茶叶. 2016(01)
[6]陕西省苜蓿茎点霉叶斑病病原菌的鉴定[J]. 李洪建,李芳红,史健,呼天明,程积民,钱永华,焦锋. 草地学报. 2015(06)
[7]贵州茶树病虫害防控现状及对策建议[J]. 施利,江健,王勇,吴琼,姜霞,严家斌,薛伟,胡德禹,谈孝凤,陈卓. 茶叶. 2015(03)
[8]茶云纹叶枯病病原鉴定[J]. 李应祥,陈跃华,杨青,王为镇,陈卓,郑松,谈孝凤,王勇. 贵州农业科学. 2015(01)
[9]新型植物源生物农药“植丰宁”防治茶叶炭疽病试验报告[J]. 翁城武,李亦军,黄炜娟,詹艺红,沈彤. 福建茶叶. 2014(03)
[10]油茶皂素对茶轮斑病和茶白星病的抑菌作用[J]. 崔宏春,周铁锋,余继忠,敖存,黄海涛,郑旭霞. 浙江农业科学. 2012(09)
本文编号：2973054
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