解淀粉芽孢杆菌WK1产脂肽产量评价新方法及其培养条件优化
发布时间：2021-01-29 19:44
芽孢杆菌代谢产生的脂肽类物质具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒等多种生物活性,但芽孢杆菌脂肽产量普遍较低,探索高产量的培养条件是开发利用的重点,而快速的产量评价方法则可大大提高条件探索的效率。本论文在前人成功筛选出一株对山核桃干腐病病原菌葡萄座腔菌B.dothidea有明显抑制效果的芽孢杆菌WK1的基础上,开展了解淀粉芽孢杆菌WK1最佳发酵时间、评价其产量的新方法探索,应用液相电喷雾质谱法对主要代谢产物成分进行鉴定,应用HPLC评价不同培养基、不同初始pH以及不同接种量对脂肽抗生素产量影响,以其获得最佳发酵条件。获得以下初步结果:最好的发酵时间的探索。芽孢杆菌WK1作为芽孢杆菌属,对山核桃干腐病病原菌葡萄座腔菌B.dothidea有明显的抑制效果。通过48、60、72小时等3个不同时间的摇瓶发酵得到抗生素代谢产物,制作含有抗菌物质的固体培养基,将葡萄座腔菌B.dothidea的病原菌的单细胞接种到所有含有抗生素的培养基中均无法生长,而以病原菌饼接种到含有抗生素的培养基中,则可以观察到抑制率抑制效果的差别,最好的发酵时间为72h。一种快速评价芽孢杆菌脂肽产量以及底物碳利用效率的新方法。以解淀粉芽孢...
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同时间PDA培养基内病原菌生长状况
解淀粉芽孢杆菌 WK1 产脂肽产量评价新方法及其培养条件优化果与分析 不同初始 pH 随发酵时间的动态变化肽类物质是解淀粉芽孢杆菌 WK1 的代谢产物，一般而言，随着微生物类物质不断积累，微生物繁殖越多则代谢产量越多。pH5 处理产量低的为酸性环境不利于 WK1 生长。整个发酵过程中初始 pH 为 5 的处理其低于 6（图 4.1），而 pH6 和 7 的处理其发酵液 pH 在前 24 h 急速下回升，到 48-56 h 恢复到初始水平、之后继续上升，最后达到 8.14。不杆菌产脂肽最适 pH 数值不同，张雷等[78]对解淀粉芽孢杆菌菌株 15-优化过程中发现 pH7 时该菌株产脂肽量以及培养液 OD600值达到最大对解淀粉芽孢杆菌菌株 SC1150 发酵条件优化时发现最适 pH 值为 6.5合的初始 pH 值对微生物的培养就显得尤为重要。
4 检测芽孢杆菌脂肽物质产量的新方法探索在 72 h 后脂肽类物质的产量依次为 pH6> pH7> pH5（图 4.3）同处理脂肽类物质产量差异规律与差减法一致（图 4.3），但5、 pH6 和 pH7 的差减法结果分别比重量法高 36.93%、1因为 TOC 能检测到溶液有机碳的微小变化，这可能是导致重原因，因此差减法相比重量法更加灵敏。两种方法的结果存在 pH5 时重量法较低，导致相关系数只有 0.5632(n=9)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]抗菌海洋解淀粉芽孢杆菌GM-1-2菌株摇瓶发酵培养基和发酵条件优化[J]. 汪晶晶,曹雪梅,李欢,暴增海,马桂珍,贾杰,王淑芳,罗志会. 江苏农业科学. 2018(08)
[2]内生解淀粉芽孢杆菌BEB17脂肽类和聚酮类化合物的抑菌活性分析[J]. 桑建伟,杨扬,陈奕鹏,蔡吉苗,陆翠梅,黄贵修. 植物病理学报. 2018(03)
[3]解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）XZ-1发酵条件的优化[J]. 杨冬静,赵永强,孙厚俊,张成玲,徐振,谢逸萍. 江西农业学报. 2017(10)
[4]解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）HAB-7的培养基优化及抑菌活性[J]. 刘文波,熊燕红,秦春秀,靳鹏飞,谢清标,郑服丛,缪卫国. 中国植保导刊. 2017(06)
[5]枯草芽孢杆菌产脂肽的发酵条件优化[J]. 张楠楠,徐丹,尹婷,徐学明. 安徽农业科学. 2017(15)
[6]枯草芽孢杆菌B43对香蕉枯萎病菌抑菌活性及其活性成分分析[J]. 李晨楚,张荣意,康迅,靳鹏飞,谭志琼. 中国南方果树. 2017(03)
[7]解淀粉芽孢杆菌植物亚种CGMCC 11640对山核桃干腐病菌的抑制机制[J]. 程敏,徐秋芳. 浙江农林大学学报. 2017(02)
[8]解淀粉芽孢杆菌CM3培养基及发酵条件优化[J]. 陈哲,梁宏,黄静,赵佳. 山西农业科学. 2016(11)
[9]海洋芽孢杆菌B-9987中抗MDR菌活性成分研究[J]. 张君,任鹏飞,田黎,李花月,李文利. 中国海洋药物. 2016(05)
[10]响应面法对解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）12-7产抗菌蛋白条件的优化[J]. 王全,王占利,高同国,李术娜. 棉花学报. 2016(03)
博士论文
[1]解淀粉芽孢杆菌NJN-6拮抗物质的分离鉴定及对土壤微生物区系的影响研究[D]. 袁军.南京农业大学 2016
[2]产抗菌脂肽GD菌株筛选及脂肽分离、鉴定与应用研究[D]. 庄国宏.扬州大学 2014
[3]芽孢杆菌及其脂肽类化合物防治植物病害和促进植物生长的研究[D]. 王帅.南京农业大学 2009
硕士论文
[1]山核桃干腐病抑制菌的筛选鉴定及抑制机理的探究[D]. 程敏.浙江农林大学 2016
[2]解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵条件优化及对辣椒根腐病防治效果初探[D]. 张雷.东北农业大学 2014
[3]解淀粉芽孢杆菌SWB16脂肽类代谢产物对球孢白僵菌的拮抗作用及发酵条件的初步优化[D]. 赵东洋.西南大学 2014
[4]菌株N5对番茄的促生及其防控番茄青枯病的作用[D]. 王洪梅.南京农业大学 2013
[5]芽胞杆菌发酵液中抗菌脂肽的定量检测方法及应用[D]. 艾嘉.南京农业大学 2008
[6]棉花生防芽孢杆菌A57、A178的抑菌机理、拮抗活性物质及防病、促生作用[D]. 陈莉.新疆农业大学 2007
[7]山葵黑根病菌拮抗菌的筛选、鉴定及防治研究[D]. 陈静鸿.四川大学 2007
[8]一株枯草芽孢杆菌抗植物病原真菌活性物质的研究[D]. 鲁小城.浙江大学 2006
本文编号：3007494
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同时间PDA培养基内病原菌生长状况
解淀粉芽孢杆菌 WK1 产脂肽产量评价新方法及其培养条件优化果与分析 不同初始 pH 随发酵时间的动态变化肽类物质是解淀粉芽孢杆菌 WK1 的代谢产物，一般而言，随着微生物类物质不断积累，微生物繁殖越多则代谢产量越多。pH5 处理产量低的为酸性环境不利于 WK1 生长。整个发酵过程中初始 pH 为 5 的处理其低于 6（图 4.1），而 pH6 和 7 的处理其发酵液 pH 在前 24 h 急速下回升，到 48-56 h 恢复到初始水平、之后继续上升，最后达到 8.14。不杆菌产脂肽最适 pH 数值不同，张雷等[78]对解淀粉芽孢杆菌菌株 15-优化过程中发现 pH7 时该菌株产脂肽量以及培养液 OD600值达到最大对解淀粉芽孢杆菌菌株 SC1150 发酵条件优化时发现最适 pH 值为 6.5合的初始 pH 值对微生物的培养就显得尤为重要。
4 检测芽孢杆菌脂肽物质产量的新方法探索在 72 h 后脂肽类物质的产量依次为 pH6> pH7> pH5（图 4.3）同处理脂肽类物质产量差异规律与差减法一致（图 4.3），但5、 pH6 和 pH7 的差减法结果分别比重量法高 36.93%、1因为 TOC 能检测到溶液有机碳的微小变化，这可能是导致重原因，因此差减法相比重量法更加灵敏。两种方法的结果存在 pH5 时重量法较低，导致相关系数只有 0.5632(n=9)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]抗菌海洋解淀粉芽孢杆菌GM-1-2菌株摇瓶发酵培养基和发酵条件优化[J]. 汪晶晶,曹雪梅,李欢,暴增海,马桂珍,贾杰,王淑芳,罗志会. 江苏农业科学. 2018(08)
[2]内生解淀粉芽孢杆菌BEB17脂肽类和聚酮类化合物的抑菌活性分析[J]. 桑建伟,杨扬,陈奕鹏,蔡吉苗,陆翠梅,黄贵修. 植物病理学报. 2018(03)
[3]解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）XZ-1发酵条件的优化[J]. 杨冬静,赵永强,孙厚俊,张成玲,徐振,谢逸萍. 江西农业学报. 2017(10)
[4]解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）HAB-7的培养基优化及抑菌活性[J]. 刘文波,熊燕红,秦春秀,靳鹏飞,谢清标,郑服丛,缪卫国. 中国植保导刊. 2017(06)
[5]枯草芽孢杆菌产脂肽的发酵条件优化[J]. 张楠楠,徐丹,尹婷,徐学明. 安徽农业科学. 2017(15)
[6]枯草芽孢杆菌B43对香蕉枯萎病菌抑菌活性及其活性成分分析[J]. 李晨楚,张荣意,康迅,靳鹏飞,谭志琼. 中国南方果树. 2017(03)
[7]解淀粉芽孢杆菌植物亚种CGMCC 11640对山核桃干腐病菌的抑制机制[J]. 程敏,徐秋芳. 浙江农林大学学报. 2017(02)
[8]解淀粉芽孢杆菌CM3培养基及发酵条件优化[J]. 陈哲,梁宏,黄静,赵佳. 山西农业科学. 2016(11)
[9]海洋芽孢杆菌B-9987中抗MDR菌活性成分研究[J]. 张君,任鹏飞,田黎,李花月,李文利. 中国海洋药物. 2016(05)
[10]响应面法对解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）12-7产抗菌蛋白条件的优化[J]. 王全,王占利,高同国,李术娜. 棉花学报. 2016(03)
博士论文
[1]解淀粉芽孢杆菌NJN-6拮抗物质的分离鉴定及对土壤微生物区系的影响研究[D]. 袁军.南京农业大学 2016
[2]产抗菌脂肽GD菌株筛选及脂肽分离、鉴定与应用研究[D]. 庄国宏.扬州大学 2014
[3]芽孢杆菌及其脂肽类化合物防治植物病害和促进植物生长的研究[D]. 王帅.南京农业大学 2009
硕士论文
[1]山核桃干腐病抑制菌的筛选鉴定及抑制机理的探究[D]. 程敏.浙江农林大学 2016
[2]解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵条件优化及对辣椒根腐病防治效果初探[D]. 张雷.东北农业大学 2014
[3]解淀粉芽孢杆菌SWB16脂肽类代谢产物对球孢白僵菌的拮抗作用及发酵条件的初步优化[D]. 赵东洋.西南大学 2014
[4]菌株N5对番茄的促生及其防控番茄青枯病的作用[D]. 王洪梅.南京农业大学 2013
[5]芽胞杆菌发酵液中抗菌脂肽的定量检测方法及应用[D]. 艾嘉.南京农业大学 2008
[6]棉花生防芽孢杆菌A57、A178的抑菌机理、拮抗活性物质及防病、促生作用[D]. 陈莉.新疆农业大学 2007
[7]山葵黑根病菌拮抗菌的筛选、鉴定及防治研究[D]. 陈静鸿.四川大学 2007
[8]一株枯草芽孢杆菌抗植物病原真菌活性物质的研究[D]. 鲁小城.浙江大学 2006
本文编号：3007494
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