瓜类褪绿黄化病毒对介体烟粉虱生物学特性的影响
发布时间：2021-03-11 12:36
烟粉虱Bemisia tabaci（Gennadius）,隶属于半翅目粉虱科（Hemiptera:Aleyrodidae）,作为世界性经济害虫,其寄主植物众多,给全球范围内的农业生产造成了巨大危害与经济损失。除吸食植物汁液造成直接危害外,烟粉虱也是传播植物病毒效率最高的介体之一,瓜类褪绿黄化病毒（Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV）就是由烟粉虱Bemisia tabaci B型和Q型以半持久性方式特异性传播的。近年来,CCYV严重危害着我国及亚洲其他地区的瓜类植物等。很多研究证明植物病毒可以对介体昆虫产生影响,但目前尚无CCYV对介体烟粉虱影响的系统研究。本研究以B型和Q型烟粉虱、瓜类褪绿黄化病毒及黄瓜等为研究材料,运用分子生物学、昆虫生态学等技术,研究CCYV对介体烟粉虱生长发育和繁殖的影响以及各龄期若虫的带毒能力。研究内容包括:B型和Q型烟粉虱各龄期种群在健康和感染CCYV的寄主植物黄瓜上的存活率、体型大小、发育历期以及各项生命参数等。此外,我们还利用实时荧光定量法检测了B型、Q型烟粉虱在带毒植株上各龄期若虫的病毒量。期望本研究能为病毒-介体...
【文章来源】：河南农业大学河南省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
烟粉虱的生活史Fig.1ThelifehistoryofBemisiatabaci
图 2 CCYV 侵染瓜类叶片的症状Fig. 2 Symptoms of CCYV infection on melon化病毒研究进展报道的一种新病毒，CCYV 的各项研究工作皆处于初始阶段。寄主植抗性研究等方面是当下研究的集中热点（Okuda et al., 2010; 袁媛, 2013; Okuda et al., 2013）。Okuda et al. (2010)对 CCYV 全序列进行8607 个核酸碱基（nucleotides）（GenBank AB523788），RNA2 有 8（GenBank AB523789）组成（图 3）。Double antibody sandwich essay （双抗体夹心酶联免疫吸附测定法，简称 DAS-ELISA）是由 K的一种检测 CCYV 的方法。随后，在 2014 年 Wang et al. 建立了一种rse transcription loop-mediated isothermal amplification（环介导等温扩方法可快速准确地检测 CCYV，比常规 RT-PCR 高 105倍。施艳等（达了瓜类褪绿黄化病毒的外壳蛋白，以表达产物为抗原，大量制备特确了烟粉虱传播该病毒的获毒时间、传毒时间和持毒时间等传毒行为
图 3 瓜类褪绿黄化病毒（CCYV）的 RNA1 和 RNA2 序列（梁相志，2014）Fig. 3 The sequencing strategy of Cucurbit chlorotic yellows virus (CCYV) RNA1 and RNA2注：图中矩形代表开放阅读框（ORFs），黑色框代表预测的 RNA1 编码的物质：Met, 甲基转移酶；Hel, R解旋酶 1；RdRp, 依赖于 RNA 的 RNA 聚合酶；TM，跨膜结构域。RNA1 中的点线部分代表假定的切割位点。OR的名称标在其下方。比例尺代表 1 kb。Note: Rectangles represent open reading frames (ORFs) in which predicted motifs are shown as filled boxes wnames indicated above: Met, viral methyltransferase; Hel, RNA helicase 1; RdRp, RNA-dependent RNA polymerase; Ttransmembrane domain. A dot-line in RNA1 indicates a presumed cleavage site. The names of ORFs are indicated belThe scale gives approximate sizes in kilobases.1.5 荧光定量技术1.5.1 荧光定量技术简介Higuchi 在 1992 年提出并在 1996 年推出了一种基于 PCR 定性的核酸定量技术 Real-tifluorescent quantitative PCR（实时荧光定量 PCR）。实时荧光定量 PCR 技术（real-time fluorescquantitative PCR）其主要原理为：在 PCR 扩增体系中，荧光染料或者探针与扩增产物相结合，
【参考文献】：
期刊论文
[1]丝瓜多聚泛素基因（LcUBQ）的克隆及表达分析[J]. 陈敏氡,王彬,朱海生,温庆放. 中国细胞生物学学报. 2018(01)
[2]建兰花叶病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 梁芳,张燕,王若斓,许申平,程喜梅,崔波. 江西农业大学学报. 2017(03)
[3]甜瓜褪绿黄化病的发生与传毒介体烟粉虱群体数量关系的调查[J]. 刘珊珊,严蕾艳,王毓洪,古勤生. 中国瓜菜. 2016(11)
[4]马铃薯X病毒荧光定量PCR检测体系的建立及应用[J]. 尚晓楠,吴蓓蕾. 植物保护. 2016(03)
[5]西藏发现Q型烟粉虱[J]. 卢少华,白润娥,翟卿,王保海,闫凤鸣. 应用昆虫学报. 2016(01)
[6]烟粉虱的生物学及生态学特性研究[J]. 陶小祥,段瑞华,彭理,黄志宽. 现代农业科技. 2015(22)
[7]田间系统调查表明山东省农区烟粉虱优势种为Q隐种[J]. 李洪冉,刘馨,刘小龙,李长友,沈长朋,陶云荔,褚栋. 昆虫学报. 2015(07)
[8]烟粉虱B型和Q型竞争能力的室内比较分析[J]. 卢少华,李静静,刘明杨,白润娥,汤清波,闫凤鸣. 中国农业科学. 2015(07)
[9]瓜类黄化褪绿病毒上海分离物外壳蛋白的原核表达及其抗血清的制备[J]. 曾蓉,徐丽慧,顾海峰,陆金萍,戴富明. 中国农学通报. 2014(22)
[10]中国部分地区烟粉虱生物型种类及系统发育关系分析[J]. 许丽丽,蔡力,沈伟江,杜予州. 应用生态学报. 2014(04)
博士论文
[1]烟粉虱-双生病毒-寄主植物互作及寄主植物在三者互作中的调控机制[D]. 孙艳春.浙江大学 2016
[2]浙江外来烟粉虱入侵过程及不同生物型烟粉虱生物学特性的比较研究[D]. 徐婧.浙江大学 2009
硕士论文
[1]番茄褪绿病毒的分子鉴定及荧光定量PCR检测体系的建立与应用[D]. 高利利.山东农业大学 2016
[2]B型、Q型烟粉虱传播番茄黄化曲叶病毒的差异研究[D]. 宁雯熙.东北农业大学 2015
[3]烟草营养对Q型烟粉虱发育、存活和寄主选择性的影响及其机理研究[D]. 金鹏.安徽农业大学 2015
[4]烟粉虱—病毒—寄主植物之间互作特性的研究[D]. 陈功.湖南农业大学 2014
[5]荧光定量PCR方法在土传烟草青枯病生防研究中的应用[D]. 陈巧玲.南京农业大学 2011
本文编号：3076470
【文章来源】：河南农业大学河南省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
烟粉虱的生活史Fig.1ThelifehistoryofBemisiatabaci
图 2 CCYV 侵染瓜类叶片的症状Fig. 2 Symptoms of CCYV infection on melon化病毒研究进展报道的一种新病毒，CCYV 的各项研究工作皆处于初始阶段。寄主植抗性研究等方面是当下研究的集中热点（Okuda et al., 2010; 袁媛, 2013; Okuda et al., 2013）。Okuda et al. (2010)对 CCYV 全序列进行8607 个核酸碱基（nucleotides）（GenBank AB523788），RNA2 有 8（GenBank AB523789）组成（图 3）。Double antibody sandwich essay （双抗体夹心酶联免疫吸附测定法，简称 DAS-ELISA）是由 K的一种检测 CCYV 的方法。随后，在 2014 年 Wang et al. 建立了一种rse transcription loop-mediated isothermal amplification（环介导等温扩方法可快速准确地检测 CCYV，比常规 RT-PCR 高 105倍。施艳等（达了瓜类褪绿黄化病毒的外壳蛋白，以表达产物为抗原，大量制备特确了烟粉虱传播该病毒的获毒时间、传毒时间和持毒时间等传毒行为
图 3 瓜类褪绿黄化病毒（CCYV）的 RNA1 和 RNA2 序列（梁相志，2014）Fig. 3 The sequencing strategy of Cucurbit chlorotic yellows virus (CCYV) RNA1 and RNA2注：图中矩形代表开放阅读框（ORFs），黑色框代表预测的 RNA1 编码的物质：Met, 甲基转移酶；Hel, R解旋酶 1；RdRp, 依赖于 RNA 的 RNA 聚合酶；TM，跨膜结构域。RNA1 中的点线部分代表假定的切割位点。OR的名称标在其下方。比例尺代表 1 kb。Note: Rectangles represent open reading frames (ORFs) in which predicted motifs are shown as filled boxes wnames indicated above: Met, viral methyltransferase; Hel, RNA helicase 1; RdRp, RNA-dependent RNA polymerase; Ttransmembrane domain. A dot-line in RNA1 indicates a presumed cleavage site. The names of ORFs are indicated belThe scale gives approximate sizes in kilobases.1.5 荧光定量技术1.5.1 荧光定量技术简介Higuchi 在 1992 年提出并在 1996 年推出了一种基于 PCR 定性的核酸定量技术 Real-tifluorescent quantitative PCR（实时荧光定量 PCR）。实时荧光定量 PCR 技术（real-time fluorescquantitative PCR）其主要原理为：在 PCR 扩增体系中，荧光染料或者探针与扩增产物相结合，
【参考文献】：
期刊论文
[1]丝瓜多聚泛素基因（LcUBQ）的克隆及表达分析[J]. 陈敏氡,王彬,朱海生,温庆放. 中国细胞生物学学报. 2018(01)
[2]建兰花叶病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 梁芳,张燕,王若斓,许申平,程喜梅,崔波. 江西农业大学学报. 2017(03)
[3]甜瓜褪绿黄化病的发生与传毒介体烟粉虱群体数量关系的调查[J]. 刘珊珊,严蕾艳,王毓洪,古勤生. 中国瓜菜. 2016(11)
[4]马铃薯X病毒荧光定量PCR检测体系的建立及应用[J]. 尚晓楠,吴蓓蕾. 植物保护. 2016(03)
[5]西藏发现Q型烟粉虱[J]. 卢少华,白润娥,翟卿,王保海,闫凤鸣. 应用昆虫学报. 2016(01)
[6]烟粉虱的生物学及生态学特性研究[J]. 陶小祥,段瑞华,彭理,黄志宽. 现代农业科技. 2015(22)
[7]田间系统调查表明山东省农区烟粉虱优势种为Q隐种[J]. 李洪冉,刘馨,刘小龙,李长友,沈长朋,陶云荔,褚栋. 昆虫学报. 2015(07)
[8]烟粉虱B型和Q型竞争能力的室内比较分析[J]. 卢少华,李静静,刘明杨,白润娥,汤清波,闫凤鸣. 中国农业科学. 2015(07)
[9]瓜类黄化褪绿病毒上海分离物外壳蛋白的原核表达及其抗血清的制备[J]. 曾蓉,徐丽慧,顾海峰,陆金萍,戴富明. 中国农学通报. 2014(22)
[10]中国部分地区烟粉虱生物型种类及系统发育关系分析[J]. 许丽丽,蔡力,沈伟江,杜予州. 应用生态学报. 2014(04)
博士论文
[1]烟粉虱-双生病毒-寄主植物互作及寄主植物在三者互作中的调控机制[D]. 孙艳春.浙江大学 2016
[2]浙江外来烟粉虱入侵过程及不同生物型烟粉虱生物学特性的比较研究[D]. 徐婧.浙江大学 2009
硕士论文
[1]番茄褪绿病毒的分子鉴定及荧光定量PCR检测体系的建立与应用[D]. 高利利.山东农业大学 2016
[2]B型、Q型烟粉虱传播番茄黄化曲叶病毒的差异研究[D]. 宁雯熙.东北农业大学 2015
[3]烟草营养对Q型烟粉虱发育、存活和寄主选择性的影响及其机理研究[D]. 金鹏.安徽农业大学 2015
[4]烟粉虱—病毒—寄主植物之间互作特性的研究[D]. 陈功.湖南农业大学 2014
[5]荧光定量PCR方法在土传烟草青枯病生防研究中的应用[D]. 陈巧玲.南京农业大学 2011
本文编号：3076470
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