条斑病菌一种TALE基因突变对水稻防卫反应的影响
发布时间：2021-03-24 10:24
水稻白叶枯病菌Xanthomns oryzae pv.oryzae（Xoo）与细菌性条斑病菌X.oryzae pv.oryzicola（Xoc）是植物病原黄单胞菌的重要类群,也是水稻上的主要病原细菌。这类病菌依赖各种效应子发挥致病作用,其中,类似转录激活子的效应子transcription activator-like effectors（TALEs）在寄主植物中有特定的靶标基因,通过调控靶标基因表达,影响病菌致病性或寄主抗病性。Xoc和Xoo侵染途径与危害症状均有不同,这种差别可能与TALE基因种类及其作用机制的不同有关。前人研究证明Xoo的TALE可诱导水稻感病基因SWEET表达,促进SWEET蛋白质产生,SWEET帮助病菌获取养分,完成定殖和扩展并发挥致病作用,类似作用机制在Xoc中还未发现。本研究试图通过鉴定Xoc的转座子插入突变体,分析TALE基因突变对致病性的影响,为进一步研究TALE靶标基因奠定基础。本实验室以前通过Tn5转座子插入Xoc菌株GD41基因组DNA的方法,产生了一个突变体库,本研究从中初步筛选出了一个影响致病性的阳性克隆,含该克隆的菌株记为GD21突变体。对...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－３?Ｉ?ＡＷ？突变体ＧＤ２丨㈧Ｕ突变基因鉴定??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?｜?Ｉｄｅｎｔｉｆ?
获得真正需耍的含基因的阳性克隆。通过菌落原位杂交分析菌株Ｍ／ｘｗ??文库克隆中的家族基因，培养ｔｏ／ｘｄ基因组文库中的克隆，将其转移到硝酸纤??维素滤膜上进行菌落原位杂交分析显色后，呈现出的蓝紫色斑点为阳性克隆（图２－１）。??将筛选出的克隆在纤维素膜上划线培养，再次进行菌落原位杂交，排除假阳性克隆。??ｒ—?图２－１?Ｉ?ＡＷ■野生型菌株ＧＤ４１菌落用地高辛??．．标记的／？■／探针原位杂交??？?？?？?．?＼?ｆ?＞．?’?Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?｜?Ｘｏｃ?ＷＴ?ｓｔｒａｉｎ?ＧＤ４１?Ｃｏｌｏｎｙ?ｉｎ??”?？?？?－?．．．?；?－?＊?？?ｓｉｔｕ?ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ＤＩＧ－ｌａｂｅｌｅｄ??ｉ?＾＾ｙ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ?ｐｒｏｂｅ??２．２?ＧＤ４１基因组文库中补／ｚ２Ａ克隆的筛选??将上述从文库中筛选的含有的所有阳性克隆分别提取质粒ＤＮＡ，用分Ｍ??进行酶切（图２－２），?Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹，用办７／Ｉ－２ｋｂ探针进行杂交。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测??基因信号带，从中鉴定到含有办Ｍ－２ｋｂ的克隆，分别标记为Ｅ４、Ｅ８、Ｅ５２、Ａ５７（图??２－３）。鉴定出来的这４个克隆在后续的实验工作中，将分别用来回补ＧＤ２〗突变体，??通过致病性测定
图.E奋切rH眨翻拓〔kd~曰山roughr几二2，讼ndn卜五n印益汉id眠ewithhighandIOw‘叻“n廿日l沁.or明tho单川.innowertof肠铭皿即
【参考文献】：
期刊论文
[1]tal4基因在水稻白叶枯病菌PXO99A对噻枯唑抗性中的作用[J]. 张雅虹,崔晓芳,王硕,宋从凤. 南京农业大学学报. 2014(03)
[2]白叶枯病菌和细菌性条斑病菌多样性的TALE效应蛋白调控水稻抗（感）病性机理与利用策略[J]. 李争,熊鹂,纪志远,邹丽芳,邹华松,陈功友. 中国农业科学. 2013(14)
[3]病原菌TAL效应子与寄主靶基因相互识别的分子密码[J]. 李岩强,王春连,赵开军. 生物工程学报. 2011(08)
[4]黄单胞杆菌Ⅲ型效应子研究进展[J]. 车晋英,李岩强,王春连,赵开军. 中国农学通报. 2011(09)
[5]Identification of an avirulence gene,avrxa5,from the rice pathogen Xanthomonas oryzae pv.oryzae[J]. ZOU HuaSong1,ZHAO WenXiang2,ZHANG XiFu3,HAN YangChun2,ZOU LiFang2 & CHEN GongYou1,2* 1School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China;2College of Plant Protection,Nanjing Agricultural University/Laboratory for Monitoring and Management for Plant Pests and Diseases,Chinese Ministry of Agriculture,Nanjing 210095,China;3Department of Agronomy,Henan Vocation-Technical Teachers College,Xinxiang 453003,China. Science China（Life Sciences）. 2010(12)
[6]水稻细菌性条斑病发病率与病情指数关系初步研究[J]. 董鹏,吴冠清,陈观浩. 广东农业科学. 2008(05)
[7]水稻黄单胞菌avrBs3/PthA家族基因研究进展[J]. 李玉蓉,邹丽芳,武晓敏,杨娟,陈功友. 中国农业科学. 2007(10)
[8]细菌性条斑病非寄主抗性基因Rxo1在水稻中同源序列的表达和遗传定位分析[J]. 陈彩虹,谭明谱,郑伟,黄小嫚,张端品,林兴华. 中国水稻科学. 2006(02)
[9]水稻第2染色体上细菌性条斑病抗性QTL的检测[J]. 郑景生,李义珍,方宣钧. 中国农业科学. 2005(09)
[10]从水稻白叶枯病菌分离的avr Bs3家族新成员avr Xa3是具双重功能的无毒基因[J]. 李平,龙菊英,黄迎春,张燕,王金生. 自然科学进展. 2004(07)
本文编号：3097558
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－３?Ｉ?ＡＷ？突变体ＧＤ２丨㈧Ｕ突变基因鉴定??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?｜?Ｉｄｅｎｔｉｆ?
获得真正需耍的含基因的阳性克隆。通过菌落原位杂交分析菌株Ｍ／ｘｗ??文库克隆中的家族基因，培养ｔｏ／ｘｄ基因组文库中的克隆，将其转移到硝酸纤??维素滤膜上进行菌落原位杂交分析显色后，呈现出的蓝紫色斑点为阳性克隆（图２－１）。??将筛选出的克隆在纤维素膜上划线培养，再次进行菌落原位杂交，排除假阳性克隆。??ｒ—?图２－１?Ｉ?ＡＷ■野生型菌株ＧＤ４１菌落用地高辛??．．标记的／？■／探针原位杂交??？?？?？?．?＼?ｆ?＞．?’?Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?｜?Ｘｏｃ?ＷＴ?ｓｔｒａｉｎ?ＧＤ４１?Ｃｏｌｏｎｙ?ｉｎ??”?？?？?－?．．．?；?－?＊?？?ｓｉｔｕ?ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ＤＩＧ－ｌａｂｅｌｅｄ??ｉ?＾＾ｙ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ?ｐｒｏｂｅ??２．２?ＧＤ４１基因组文库中补／ｚ２Ａ克隆的筛选??将上述从文库中筛选的含有的所有阳性克隆分别提取质粒ＤＮＡ，用分Ｍ??进行酶切（图２－２），?Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹，用办７／Ｉ－２ｋｂ探针进行杂交。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测??基因信号带，从中鉴定到含有办Ｍ－２ｋｂ的克隆，分别标记为Ｅ４、Ｅ８、Ｅ５２、Ａ５７（图??２－３）。鉴定出来的这４个克隆在后续的实验工作中，将分别用来回补ＧＤ２〗突变体，??通过致病性测定
图.E奋切rH眨翻拓〔kd~曰山roughr几二2，讼ndn卜五n印益汉id眠ewithhighandIOw‘叻“n廿日l沁.or明tho单川.innowertof肠铭皿即
【参考文献】：
期刊论文
[1]tal4基因在水稻白叶枯病菌PXO99A对噻枯唑抗性中的作用[J]. 张雅虹,崔晓芳,王硕,宋从凤. 南京农业大学学报. 2014(03)
[2]白叶枯病菌和细菌性条斑病菌多样性的TALE效应蛋白调控水稻抗（感）病性机理与利用策略[J]. 李争,熊鹂,纪志远,邹丽芳,邹华松,陈功友. 中国农业科学. 2013(14)
[3]病原菌TAL效应子与寄主靶基因相互识别的分子密码[J]. 李岩强,王春连,赵开军. 生物工程学报. 2011(08)
[4]黄单胞杆菌Ⅲ型效应子研究进展[J]. 车晋英,李岩强,王春连,赵开军. 中国农学通报. 2011(09)
[5]Identification of an avirulence gene,avrxa5,from the rice pathogen Xanthomonas oryzae pv.oryzae[J]. ZOU HuaSong1,ZHAO WenXiang2,ZHANG XiFu3,HAN YangChun2,ZOU LiFang2 & CHEN GongYou1,2* 1School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China;2College of Plant Protection,Nanjing Agricultural University/Laboratory for Monitoring and Management for Plant Pests and Diseases,Chinese Ministry of Agriculture,Nanjing 210095,China;3Department of Agronomy,Henan Vocation-Technical Teachers College,Xinxiang 453003,China. Science China（Life Sciences）. 2010(12)
[6]水稻细菌性条斑病发病率与病情指数关系初步研究[J]. 董鹏,吴冠清,陈观浩. 广东农业科学. 2008(05)
[7]水稻黄单胞菌avrBs3/PthA家族基因研究进展[J]. 李玉蓉,邹丽芳,武晓敏,杨娟,陈功友. 中国农业科学. 2007(10)
[8]细菌性条斑病非寄主抗性基因Rxo1在水稻中同源序列的表达和遗传定位分析[J]. 陈彩虹,谭明谱,郑伟,黄小嫚,张端品,林兴华. 中国水稻科学. 2006(02)
[9]水稻第2染色体上细菌性条斑病抗性QTL的检测[J]. 郑景生,李义珍,方宣钧. 中国农业科学. 2005(09)
[10]从水稻白叶枯病菌分离的avr Bs3家族新成员avr Xa3是具双重功能的无毒基因[J]. 李平,龙菊英,黄迎春,张燕,王金生. 自然科学进展. 2004(07)
本文编号：3097558
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