三种烟草病毒在烟田土壤中的分布动态及在烟草中的互作
发布时间：2021-03-26 19:53
烟草（Nicotiana tabacum L）是一种重要经济作物。病毒病给烟草产业带来严重的经济损失。其中,烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）、黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus,CMV）、马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）的危害最为严重。近年来,烟田中两种或者多种病毒复合侵染的比例日益增高。烟田土壤带有TMV、CMV、PVY是导致烟株带毒的重要因素。为了建立高效的烟田土壤病毒检测方法,搞清烟草中多重病毒互作的机理,本文展开了系列研究,主要结果如下:1本研究建立了完善的烟田土壤携带病毒的检测方法。分别利用ELISA、RT-PCR、荧光定量RT-PCR和RT-LAMP的方法均可以对烟田土壤中的TMV、CMV、PVY进行有效检测。四种方法检测TMV灵敏度分别为10-3g土/mL、10-3、10-5和10-6;检测CMV的灵敏度分别是10-1g土/mL、10-1、10-3...
【文章来源】：华南农业大学广东省
【文章页数】：124 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TMV病毒粒子结构组成图（周鹏，2014）
图 1.1 TMV 病毒粒子结构组成图（周鹏，2014）TMV 基因组的 5‘端和 3‘端为非翻译区，它含有 5 个部分重叠的开放阅读框（OpenReading Frame，ORF1、ORF2、ORF3、ORF4 和 ORF5），编码 4 个蛋白，分别为 126 kD 蛋白、183 kD 蛋白、30 kD 蛋白和 17.5 kD 蛋白。5‘端 ORF1编码 126KD 蛋白，ORF1 与 ORF2 重叠，编码 183 kD 蛋白，183 kD 蛋白是 126kD 蛋白 ORF 终止子通读产生的，其中通读部分蛋白大小为 54 kD（又称 54 kD蛋白），含有复制酶保守序列。126 ku和 183 ku蛋白参与病毒的复制，又称 RNA依赖性 RNA 聚合酶（RNAdependent RNApolymerase，RdRp）蛋白，其中 126 ku是 TMV 病毒的沉默抑制子。ORF4 编码 30 kD 蛋白，30 kD 蛋白参与病毒在细胞间的移动，又称运动蛋白（Movement protein，MP）。ORF5 编码 17.5 kD 蛋白，17.5 kD 蛋白为病毒的外壳蛋白（Coat protein，CP）（张宁，2014；陈伟，2008）。
图 1.3 黄瓜花叶病毒粒子结构示意图（李喜英，2009）注：图左为 CMV 病毒粒 外部 构，图右为 CMV 病毒粒 内部 构CMV 是一种三分体正义单链 RNA（positive single strand RNA，+ssRNA）病毒，它由三条基因组 RNA(RNA1、RNA2、RNA3)和两条亚基因组(RNA4、RNA4A)组成，有的还含有卫星 RNA(SatelliteRNA)。其中 RNA4 是 RNA3 的亚基因组，RNA4A 是 RNA2 的亚基因组，分别编码 5 种病毒必需蛋白，因此在寄主体内每种蛋白的含量都单独由一条基因组/亚基因组的表达量决定(Sivakumaranralet al.，2000；Sivakumaranralet al.，2002，曾蓉，2007)。CMV 基因组的每个 RNA 片段的 5`端为甲基化的帽子结构(m7GS`ppps'Gp)，3'端有一个约 200nt(nucleotide，nt)的高度同源保守区域， 无 Poly(A)结构及相应功能，但能折叠成 tRNA 状结构，可以结合酪氨酸，促进负义 RNA 链的合成。CMV 基因组由 5 个开放的阅读框架（open reading frame，ORF）组成。RNAI
本文编号：3102155
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【文章页数】：124 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TMV病毒粒子结构组成图（周鹏，2014）
图 1.1 TMV 病毒粒子结构组成图（周鹏，2014）TMV 基因组的 5‘端和 3‘端为非翻译区，它含有 5 个部分重叠的开放阅读框（OpenReading Frame，ORF1、ORF2、ORF3、ORF4 和 ORF5），编码 4 个蛋白，分别为 126 kD 蛋白、183 kD 蛋白、30 kD 蛋白和 17.5 kD 蛋白。5‘端 ORF1编码 126KD 蛋白，ORF1 与 ORF2 重叠，编码 183 kD 蛋白，183 kD 蛋白是 126kD 蛋白 ORF 终止子通读产生的，其中通读部分蛋白大小为 54 kD（又称 54 kD蛋白），含有复制酶保守序列。126 ku和 183 ku蛋白参与病毒的复制，又称 RNA依赖性 RNA 聚合酶（RNAdependent RNApolymerase，RdRp）蛋白，其中 126 ku是 TMV 病毒的沉默抑制子。ORF4 编码 30 kD 蛋白，30 kD 蛋白参与病毒在细胞间的移动，又称运动蛋白（Movement protein，MP）。ORF5 编码 17.5 kD 蛋白，17.5 kD 蛋白为病毒的外壳蛋白（Coat protein，CP）（张宁，2014；陈伟，2008）。
图 1.3 黄瓜花叶病毒粒子结构示意图（李喜英，2009）注：图左为 CMV 病毒粒 外部 构，图右为 CMV 病毒粒 内部 构CMV 是一种三分体正义单链 RNA（positive single strand RNA，+ssRNA）病毒，它由三条基因组 RNA(RNA1、RNA2、RNA3)和两条亚基因组(RNA4、RNA4A)组成，有的还含有卫星 RNA(SatelliteRNA)。其中 RNA4 是 RNA3 的亚基因组，RNA4A 是 RNA2 的亚基因组，分别编码 5 种病毒必需蛋白，因此在寄主体内每种蛋白的含量都单独由一条基因组/亚基因组的表达量决定(Sivakumaranralet al.，2000；Sivakumaranralet al.，2002，曾蓉，2007)。CMV 基因组的每个 RNA 片段的 5`端为甲基化的帽子结构(m7GS`ppps'Gp)，3'端有一个约 200nt(nucleotide，nt)的高度同源保守区域， 无 Poly(A)结构及相应功能，但能折叠成 tRNA 状结构，可以结合酪氨酸，促进负义 RNA 链的合成。CMV 基因组由 5 个开放的阅读框架（open reading frame，ORF）组成。RNAI
本文编号：3102155
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