转WAM1拟南芥对小菜蛾生长发育及肠道菌群的影响
发布时间：2021-04-17 13:50
小菜蛾肠道菌群在其生长发育过程中扮演者重要的角色。本研究通过将来自于尤金袋鼠（Macropus eugenii）的抗菌肽基因WAM1导入拟南芥中,研究其对小菜蛾生长发育及其肠道菌群的影响,取得如下成果:通过人工合成WAM1基因,并优化其密码子为拟南芥偏爱的,将其与植物表达载体pSR784d连接,构建重组植物表达载体WAM1-pSR784d,并遗传转化根癌农杆菌LBA4404。通过花絮侵染法遗传转化拟南芥,经过除草剂Basta初步筛选获得6株表现型为阳性的植株。PCR检测,6个株系中均可检测出WAM1基因条带,初步确定为转基因阳性植株,分别命名为WAM1-A、B、C、D、E、F;RT-PCR检测,WAM1基因在6个拟南芥株系中均表达,其中WAM1-C表达量最高,并且极显著高于其他株系。生测实验表明,取食WAM1-C的小菜蛾的第四龄期极显著长于取食其他株系的小菜蛾,在蛹期和成虫期各处理之间无显著差异;取食转WAM1拟南芥的小菜蛾均降低重,其中取食WAM1-C的小菜蛾达到极显著水平,蛹重无显著差异。通过对小菜蛾肠道菌群的16S rDNA测序表明,小菜蛾肠道菌群优势菌为厚壁菌门和变形菌门,取食...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
抗菌肽具有多功能作用（Robinsonetal.2015）
当到达一定的阈值时，以去污剂的作用方式破坏局部的细胞膜，导致细胞死亡。此外抗菌肽还可以抑制mRNA的合成（Lan et al. 2010）、蛋白质合成（Vincent et al. 2009）、蛋白质折叠、氨基糖苷类修饰酶、细胞壁合成（Gutet al.2011）等过程（图1-2）。4
lutella xylostella）卵，购于河南济源白云实业有限公司菌株 LBA4404 由西北农林科技大学风景园林艺术学TG1 由本实验室保存。Bank中收录的M. eugenii的抗菌肽WAM1基因序列（NC的密码子重新设计抗菌肽 WAM1 碱基序列，交由上海接于 pUC57 载体。载体 pSR784d体 pSR784d 由中国种子生命科学研究中心马崇烈老师S 启动子和 Ocs 终止子的多克隆位点，bar 基因为抗草-腺苷酰基转移酶基因，载体具有卡那霉素抗性（图 2-1
【参考文献】：
期刊论文
[1]参与农杆菌侵染及T-DNA转运过程植物蛋白的研究进展和思考[J]. 赵佩,王轲,张伟,杜丽璞,叶兴国. 中国农业科学. 2014(13)
[2]M yb28基因表达载体的构建及拟南芥转化[J]. 任莉,刘慧英,王华森,朱祝军. 生物技术通报. 2012(03)
[3]农杆菌介导的作物遗传转化研究进展[J]. 刘维佳,练云,梁慧珍. 河南农业科学. 2011(10)
[4]拟南芥和水稻转录因子WRKY同义密码子的偏好性分析[J]. 刘汉梅,何瑞,张怀渝,黄玉碧. 四川农业大学学报. 2010(01)
[5]抗菌肽的研究及其在植物基因工程中的应用[J]. 张颖婷,范燕萍. 山西大同大学学报(自然科学版). 2008(06)
[6]一株羽毛角蛋白降解菌的分离与鉴定[J]. 王晶,陈丽,曹张军,周美华. 农业环境科学学报. 2007(S1)
[7]家蚕幼虫中肠细菌群落多样性的PCR-DGGE和16S rDNA文库序列分析[J]. 相辉,李木旺,赵勇,赵立平,张月华,黄勇平. 昆虫学报. 2007(03)
[8]模式植物拟南芥基因组研究进展[J]. 徐平丽,张传坤,孙万刚,单雷,李新国. 山东农业科学. 2006(06)
[9]拟南芥——一把打开植物生命奥秘大门的钥匙[J]. 张振桢,许煜泉,黄海. 生命科学. 2006(05)
[10]热带地区拟南芥栽培技术及基因转化体系的构建[J]. 李啸浪,胡新文,刘晓丽,郭建春. 热带作物学报. 2005(03)
博士论文
[1]小菜蛾中肠微生物多样性及其功能研究[D]. 夏晓峰.福建农林大学 2014
硕士论文
[1]小菜蛾肠道共生菌多态性及与Bt协同作用研究[D]. 戴楠晶.华中农业大学 2014
本文编号：3143561
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
抗菌肽具有多功能作用（Robinsonetal.2015）
当到达一定的阈值时，以去污剂的作用方式破坏局部的细胞膜，导致细胞死亡。此外抗菌肽还可以抑制mRNA的合成（Lan et al. 2010）、蛋白质合成（Vincent et al. 2009）、蛋白质折叠、氨基糖苷类修饰酶、细胞壁合成（Gutet al.2011）等过程（图1-2）。4
lutella xylostella）卵，购于河南济源白云实业有限公司菌株 LBA4404 由西北农林科技大学风景园林艺术学TG1 由本实验室保存。Bank中收录的M. eugenii的抗菌肽WAM1基因序列（NC的密码子重新设计抗菌肽 WAM1 碱基序列，交由上海接于 pUC57 载体。载体 pSR784d体 pSR784d 由中国种子生命科学研究中心马崇烈老师S 启动子和 Ocs 终止子的多克隆位点，bar 基因为抗草-腺苷酰基转移酶基因，载体具有卡那霉素抗性（图 2-1
【参考文献】：
期刊论文
[1]参与农杆菌侵染及T-DNA转运过程植物蛋白的研究进展和思考[J]. 赵佩,王轲,张伟,杜丽璞,叶兴国. 中国农业科学. 2014(13)
[2]M yb28基因表达载体的构建及拟南芥转化[J]. 任莉,刘慧英,王华森,朱祝军. 生物技术通报. 2012(03)
[3]农杆菌介导的作物遗传转化研究进展[J]. 刘维佳,练云,梁慧珍. 河南农业科学. 2011(10)
[4]拟南芥和水稻转录因子WRKY同义密码子的偏好性分析[J]. 刘汉梅,何瑞,张怀渝,黄玉碧. 四川农业大学学报. 2010(01)
[5]抗菌肽的研究及其在植物基因工程中的应用[J]. 张颖婷,范燕萍. 山西大同大学学报(自然科学版). 2008(06)
[6]一株羽毛角蛋白降解菌的分离与鉴定[J]. 王晶,陈丽,曹张军,周美华. 农业环境科学学报. 2007(S1)
[7]家蚕幼虫中肠细菌群落多样性的PCR-DGGE和16S rDNA文库序列分析[J]. 相辉,李木旺,赵勇,赵立平,张月华,黄勇平. 昆虫学报. 2007(03)
[8]模式植物拟南芥基因组研究进展[J]. 徐平丽,张传坤,孙万刚,单雷,李新国. 山东农业科学. 2006(06)
[9]拟南芥——一把打开植物生命奥秘大门的钥匙[J]. 张振桢,许煜泉,黄海. 生命科学. 2006(05)
[10]热带地区拟南芥栽培技术及基因转化体系的构建[J]. 李啸浪,胡新文,刘晓丽,郭建春. 热带作物学报. 2005(03)
博士论文
[1]小菜蛾中肠微生物多样性及其功能研究[D]. 夏晓峰.福建农林大学 2014
硕士论文
[1]小菜蛾肠道共生菌多态性及与Bt协同作用研究[D]. 戴楠晶.华中农业大学 2014
本文编号：3143561
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