固定化麦麸酯酶酶学性质及农残快速检测应用研究
发布时间：2021-04-26 07:35
为了保证农业生产中农作物的产量和人类食物的供给,农药的使用不可避免。其中有机磷和氨基甲酸酯类农药在我国的使用量远高于其他农药品种,由此引发的农产品中的残留问题和引发的食物中毒情况也较为突出,所以农药残留检测已成为世界各国农药管理和食品安全监管中的必要环节。由于常规实验室检测时,前处理时间长,有毒试剂消耗量大,所需的仪器设备价格昂贵,需要有专业人员操作,只能在实验室内抽样检测,并不属于快速检测技术。因此,在食品安全监管中仍然对于农药残留快速检测方法有着迫切需求。本研究将麦麸酯酶固定化,确定了麦麸酯酶的最佳固定化条件,研究了固定化酶的酶学性质,基于比色法原理研制了一种方便的农药残留速测卡,能够满足对农副产品进行快速定性检测的要求。主要研究结果如下:1.以麦麸中的植物酯酶为酶源,通过交联、吸附方法比较,选择物理吸附法将其固定于玻璃纤维素膜上,以酶活回收率为指标,探索其固定化的最佳条件。根据固定化条件的单因素试验,利用Box-Behnken设计,进一步探索了缓冲液pH值、固定化时间、固定化温度3个因素及交互作用对麦麸酯酶固定化效果的影响,确定的最佳固定化条件为:磷酸盐缓冲液pH值7.0,固定化...
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
1 文献综述
1.1 农药残留问题
1.2 农残检测技术发展
1.2.1 农药残留理化检测技术
1.2.2 农药残留快速检测技术
1.3 农药残留酶抑制检测法
1.3.1 酶抑制检测法检测原理
1.3.2 游离酶抑制检测技术
1.4 酯酶的固定化研究进展
1.4.1 吸附法
1.4.2 结合法
1.4.3 包埋法
1.4.4 交联法
1.5 立题意义及研究内容
1.5.1 立题意义
1.5.2 研究内容
1.5.3 技术路线
2 材料与方法
2.1 材料、试剂与仪器
2.1.1 实验材料与试剂
2.1.2 仪器设备
2.2 试剂配制
2.2.1 固蓝B盐溶液的配制
2.2.2 α-乙酸奈酯溶液的配制
2.2.3 农药标准液的配制
2.3 实验方法
2.3.1 麦麸酯酶固定化研究
2.3.2 固定化麦麸酯酶的酶学性质研究
2.3.3 农药标准液对固定化麦麸酯酶的抑制研究
2.3.4 农残速测卡的研制及应用
2.4 数据处理
3 结果与分析
3.1 麦麸酯酶固定化条件优化
3.1.1 各因素对麦麸酯酶固定化效率的影响分析
3.1.2 响应面法优化麦麸酯酶固定化条件
3.2 固定化麦麸酯酶酶学性质
3.2.1 固定化麦麸酯酶最适反应pH
3.2.2 固定化麦麸酯酶最适反应温度
3.2.3 固定化麦麸酯酶的酸碱稳定性
3.2.4 固定化麦麸酯酶的热稳定性
3.2.5 固定化麦麸酯酶的米氏常数（Km）及最大反应速度（Vmax）
3.2.6 固定化麦麸酯酶的表面特性
3.2.7 固定化麦麸酯酶的稳定性
3.3 固定化麦麸酯酶用于检测农药标品
3.3.1 农药抑制时间
3.3.2 固定化麦麸酯酶对不同农药敏感性
3.3.3 固定化麦麸酯酶对不同农药的最低检测限
3.3.4 丙酮浓度对固定化麦麸酯酶活性的影响
3.4 农药残留检测速测卡的设计和研制
3.4.1 速测卡制作条件的优化
3.4.2 农药标品检测
3.4.3 农残速测卡方法验证
3.4.4 实际样品检测
3.4.5 速测卡有效期
4 讨论
4.1 麦麸酯酶的固定化条件
4.1.1 固定化酶源的选择
4.1.2 固定化方法的选择
4.1.3 影响固定化酶效率的主要因素
4.2 固定化酶酶学性质变化
4.3 固定化酶检测农药残留
4.4 农药残留速测卡
5 结论
5.1 麦麸酯酶的最佳固定化条件
5.2 固定化麦麸酯酶的酶学性质
5.3 固定化麦麸酯酶对农药的敏感性及最低检测限
5.4 农药残留速测卡
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文及取得的其他成果
本文编号：3161018
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
1 文献综述
1.1 农药残留问题
1.2 农残检测技术发展
1.2.1 农药残留理化检测技术
1.2.2 农药残留快速检测技术
1.3 农药残留酶抑制检测法
1.3.1 酶抑制检测法检测原理
1.3.2 游离酶抑制检测技术
1.4 酯酶的固定化研究进展
1.4.1 吸附法
1.4.2 结合法
1.4.3 包埋法
1.4.4 交联法
1.5 立题意义及研究内容
1.5.1 立题意义
1.5.2 研究内容
1.5.3 技术路线
2 材料与方法
2.1 材料、试剂与仪器
2.1.1 实验材料与试剂
2.1.2 仪器设备
2.2 试剂配制
2.2.1 固蓝B盐溶液的配制
2.2.2 α-乙酸奈酯溶液的配制
2.2.3 农药标准液的配制
2.3 实验方法
2.3.1 麦麸酯酶固定化研究
2.3.2 固定化麦麸酯酶的酶学性质研究
2.3.3 农药标准液对固定化麦麸酯酶的抑制研究
2.3.4 农残速测卡的研制及应用
2.4 数据处理
3 结果与分析
3.1 麦麸酯酶固定化条件优化
3.1.1 各因素对麦麸酯酶固定化效率的影响分析
3.1.2 响应面法优化麦麸酯酶固定化条件
3.2 固定化麦麸酯酶酶学性质
3.2.1 固定化麦麸酯酶最适反应pH
3.2.2 固定化麦麸酯酶最适反应温度
3.2.3 固定化麦麸酯酶的酸碱稳定性
3.2.4 固定化麦麸酯酶的热稳定性
3.2.5 固定化麦麸酯酶的米氏常数（Km）及最大反应速度（Vmax）
3.2.6 固定化麦麸酯酶的表面特性
3.2.7 固定化麦麸酯酶的稳定性
3.3 固定化麦麸酯酶用于检测农药标品
3.3.1 农药抑制时间
3.3.2 固定化麦麸酯酶对不同农药敏感性
3.3.3 固定化麦麸酯酶对不同农药的最低检测限
3.3.4 丙酮浓度对固定化麦麸酯酶活性的影响
3.4 农药残留检测速测卡的设计和研制
3.4.1 速测卡制作条件的优化
3.4.2 农药标品检测
3.4.3 农残速测卡方法验证
3.4.4 实际样品检测
3.4.5 速测卡有效期
4 讨论
4.1 麦麸酯酶的固定化条件
4.1.1 固定化酶源的选择
4.1.2 固定化方法的选择
4.1.3 影响固定化酶效率的主要因素
4.2 固定化酶酶学性质变化
4.3 固定化酶检测农药残留
4.4 农药残留速测卡
5 结论
5.1 麦麸酯酶的最佳固定化条件
5.2 固定化麦麸酯酶的酶学性质
5.3 固定化麦麸酯酶对农药的敏感性及最低检测限
5.4 农药残留速测卡
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文及取得的其他成果
本文编号：3161018
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