禾谷镰刀菌中FgATG9基因的功能分析

发布时间：2021-06-08 18:03

　　禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum）是半活体营养型的谷类植物致病真菌,可侵染小麦、大麦等,其引起的赤霉病导致谷物大量减产且品质下降。自噬是一种高度保守的溶酶体/液泡降解途径,对维持细胞稳态具有至关重要的作用,如细胞分化、致病相关发育、细胞程序性死亡等。在酵母中已经鉴定到38个自噬相关蛋白,Atg9是其中一员,它是一种多跨膜蛋白,能够为早期自噬体形成提供生物膜,从而对自噬起重要作用。本研究利用稻瘟病菌MoAtg9的氨基酸序列在禾谷镰刀菌数据库中比对获得其蛋白的编码基因FgATG9（FGSG₁3660）及其蛋白序列。以野生型菌株PH-1为背景,采用同源重组基因敲除技术,获得FgATG9基因敲除突变体,并对其进行表型分析。结果发现FgATG9基因缺失后,菌株生长速度减慢;气生菌丝明显减少;用孢子悬浮液接种小麦麦穗和小麦胚芽鞘,突变体的病斑均明显小于野生型。与野生型相比,突变体中脂滴积累没有明显变化,但其消耗脂滴的能力明显减弱,说明FgATG9基因参与调控脂滴代谢过程。亚细胞定位实验显示FgAtg9成点状不均匀的分布在菌丝及孢子萌发阶段的细胞质中,这与M... 

【文章来源】：福建农林大学福建省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３－１不同物种Ａｔｇ９蛋白的跨膜结构域??Ｆｉｇ．?３－１?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ?ｄｏｍａｉｎｓ?ｏｆ?Ａｔｇ９?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｐｅｃｉｅｓ．??

图３－２Ａｔｇ９系统发育树

禾谷镰刀菌中Ｆ＃ｒＧ９基因的功能分析??Ｍｏｃｋ?ＰＨ－１?ＡＦｇａｔｇ９－１?ＡＦｇａｔｇ９－２?ＡＦｇａｔｇ９－３?ＡＦｇａｔｇ９－Ｃ??■１１??图３－９突变体对小麦麦穗的致病性分析??Ｆｉｇ．?３－９?Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ?ｗｈｅａｔ?ｈｅａｄｓ?ｂｙ?ＡＦｇａｔｇ９?ｄｅｌｅｔｉｏｎ?ｍｕｔａｎｔｓ．??３．４?／＾４；ＴＧ９基因参与调控脂滴的代谢??ｄＦｇ如突变体的气生菌丝较野生型稀薄，试管培养气生菌丝也不能大幅延??伸，我们猜测这９突变体从较老菌丝输送营养到菌丝生长尖端的能力受到影??响，并且不能有效利用存储在菌丝中的脂滴、糖原等能源物质来提供能量。为了??探究厂以ｒＧ９基因是否影响脂滴代谢，首先我们要确定脂滴在突变体中??的积累是否发生变化。我们收集您９突变体、ＰＨ－１的孢子，将相同量的孢??子接种至液体ＣＭ中，两天后用ＬｉｐｉｄＴＯＸ?Ｒｅｄ对菌丝中的脂滴进行染色，结果??显示野生型ＰＨ－１和突变体的菌丝均可以被ＬｉｐｉｄＴＯＸ?Ｒｅｄ染到大量红??色块状斑块，如图３－１０，所以野生型和突变体都能积累大量的脂滴，说明??基因不影响脂滴的积累。??３１??

【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞自噬在肿瘤中作用的研究进展[J]. 李国东,吴德全,李本义.  癌症. 2009(04)



本文编号：3218930