红棕象甲幼虫口腔分泌物中对苯醌的毒性及解毒酶基因的转录组分析

发布时间：2021-06-09 02:09

　　红棕象甲Rhynchophorus ferrugineus Olivier是一种为害棕榈科植物的重大入侵害虫。该虫能够分泌以对苯醌为主要活性成分的体外分泌物,这种分泌物可以为角质层提供抗菌涂层并抵抗病原微生物等外源物的入侵。然而,对苯醌等化学物质本身具有毒性,分泌者也会面临自我中毒的风险。因此,红棕象甲需要精确的调控（包括合成和代谢）分泌到环境的体外分泌物中的对苯醌来避免自身受到毒副作用。本试验以红棕象甲幼虫为研究对象,使用金龟子绿僵菌小孢变种Metarhizium anisopliae var.anisopliae作为外源病原菌对个体进行体外免疫诱导,然后针对诱导后产生的体外分泌物进行了分析,包括分泌物的分泌量、对苯醌的浓度以及抑菌活性等指标的测定。同时测定对苯醌对红棕象甲三龄幼虫的毒性。最后利用转录组技术筛选对苯醌解毒代谢的相关基因,从而阐明幼虫对该物质的解毒代谢作用。主要研究结果如下:1.金龟子绿僵菌胁迫会诱导红棕象甲三龄幼虫口腔分泌物的分泌量显著增多。与0.1%吐温80的对照组相比,金龟子绿僵菌胁迫12h和24 h后的红棕象甲三龄幼虫口腔分泌物的分泌量分别增多了0.56倍和0.... 

【文章来源】：福建农林大学福建省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

本研究的技术路线

W Scientific，Folsom，CA，USA）分离后进入质谱检测。进样口温度 280°C，高纯氦气被用作载气，载气流速 6.0 mL/min。升温程序为：初始温度 60 ℃， 8 ℃/min的速度升至 125 ℃，再以 10 ℃/min 速度升至 190 ℃，然后以 4 ℃/min 的速度升至 210 ℃；最后以 20 ℃/min 的速度升至 310 ℃，并维持 8.5 min。 质谱条件：电子轰击离子源（EI），离子源温度 230 ℃，四极杆温度 150 ℃，电子能量 70eV。扫描方式为全扫描模式（SCAN），质量扫描范围：m/z 50-600。采用随机顺序进行连续样本分析，避免因仪器信号波动而造成的影响。 4）标准曲线以标准液浓度为自变量 x，以其质谱峰响应强度（峰面积）为因变量 y，进行线性拟合，并给出线性方程和相关系数（图 2-1）。根据实际检测样本中对苯醌实测峰面积带入标准曲线方程，计算对苯醌实际浓度。

图2-2分析流程图

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：3219694