多杀菌素高产菌株育种及培养基优化

发布时间：2021-06-15 20:22

　　多杀菌素是由刺糖多孢菌有氧发酵经次级代谢产生的一种微生物源杀虫剂,因其具有使用安全、绿色环保、杀虫活性高等优势,成为当前最具有开发潜力的生物农药。本文针对实验室筛选到的一株刺糖多孢菌展开研究,主要内容有以下三部分。野生型刺糖多孢菌的多杀菌素产量较低,采用传统的NTG化学诱变,旨在得到一株多杀菌素高产突变菌株,本实验采用浓度为1 mg/mL的NTG对刺糖多孢菌ASAG 36进行诱变,初筛时得到2株多杀菌素产量提高20%以上的突变株和一株产量提高50%以上的突变株,但这3株菌的遗传不稳定。筛选刺糖多孢菌ASAG 36的发酵培养基,筛选到该菌株进行发酵培养产多杀菌素的培养基配方,其配方为:葡萄糖50 g/L、胨化牛奶10 g/L,棉籽蛋白10 g/L,糊精15 g/L,酵母膏10 g/L,NaCl 0.5 g/L,MgSO₄·7H₂O 0.5 g/L,KH₂PO₄ 0.5 g/L,CaCO₃3 g/L;同时对ASAG 36刺糖多孢菌进行种子培养和发酵培养生长曲线的测定,结果表明,一级... 

【文章来源】：湖南农业大学湖南省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

多杀菌素类化合物的结构式[21]

图 1-2 多杀菌素生物合成途径[25]Fig1-2 The biosynthesis of spinosyn表 1-2 多杀菌素合成相关基因的功能Tab1-2 The function of spinosad biosynthesis linked gene基因 氨基酸数量 功能spnA 2596 聚酮链形成spnB 2513 聚酮链形成spnC 3171 聚酮链形成spnD 4929 聚酮链形成spnE 5589 聚酮链形成spnF 276 聚酮交联桥形成spnG 391 鼠李糖转移酶

图 1-3 多杀菌素生产菌电镜图及刺状表面扫描电镜显微图1-3 Electron microscope （a） and scanning electron micrographs of Sacchaspinosa showing the spiny surface of the actinomycete（b）条件多孢菌进行发酵生产多杀菌素受到很多方面因素的限制，如培养基、无机盐、微量元素等）、种子培养状况（种龄、种子密度等）、培养条氧等）等[34]。在培养基成分中，多杀菌素生产菌可利用的碳源有葡、马铃薯淀粉、玉米粉、果糖、蔗糖、甘露糖、半乳糖、乳糖、鼠；棉籽饼粉、酵母膏、胨化牛奶和玉米浆干粉等用作多杀菌素生产；Na-、Mg2+、NH4+、SO42+、PO3+、Zn2+等无机盐离子的添加能提产菌生长所需的必要元素；另外，如乳酸盐、柠檬酸盐和乙酸盐等进刺糖多孢菌合成多杀菌素[35]。在多杀菌素发酵生产时，添加如铁、元素也能促进刺糖多孢菌菌体的生长，并提高多杀菌素的产量[36]。

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3231705