禾谷镰刀菌Tri8基因敲除及产毒类型分析

发布时间：2022-09-17 19:22

　　禾谷镰刀菌（F.graminearum）产生的单端孢霉烯族毒素会污染小麦籽粒,给人类及家畜健康带来严重威胁。 Tri8基因编码一种分泌型乙酰转移酶,催化毒素前体双乙酰DON（3,15-diAcDON）脱去一个乙酰基,形成3-乙酰DON（3-AcDON）或15-乙酰DON（15-AcDON）。本研究利用重叠PCR及无缝克隆技术构建了 Tri8基因敲除载体pOSCAR-△ Tri8,通过农杆菌介导的遗传转化方法筛选获得 Tri8基因敲除菌株PH-1-△ Tri8,最后利用液质联用仪对原始菌株和PH-1-△ Tri8菌株中的毒素类型进行分析。结果表明,对照菌株毒素以DON为主,未检测到3,15-diAcDON,而突变菌种毒素以3-AcDON和15-AcDON为主,并出现一定数量的3,15-diAcDON。本研究为后续3,15-diAcDON标准品的制备及利用,以及Tri8蛋白结构和体外功能研究奠定了基础。 

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 供试材料
    1.2 方 法
        1.2.1 基因敲除载体构建
        1.2.2 农杆菌介导的转化
        1.2.3 基因敲除菌株与原始菌株的产毒类性 分析
2 结果与分析
    2.1 基因敲除载体pOSCAR-△ Tri8的构建
    2.2 基因敲除株系的筛选与鉴定结果
    2.3 基因敲除株系的产毒类型检测结果
3 讨 论
4 结 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]沿淮晚播小麦赤霉病发生特点及绿色防控技术[J]. 费明振.  现代农业科技. 2019(08)
[2]小麦赤霉菌毒素合成机制及检测技术研究进展[J]. 范三红,胡小平.  麦类作物学报. 2018(03)
[3]利用Tri8基因区分中国小麦赤霉病菌的毒素化学型[J]. 刘杨杨,孙海燕,李伟,邓渊钰,张爱香,陈怀谷.  植物病理学报. 2018(01)



本文编号：3679801