脐橙响应冷害胁迫的代谢组学研究

发布时间：2022-11-12 14:32

　　为研究不同砧木脐橙对冷害胁迫的响应,明确其响应胁迫时叶部代谢产物差异和特征化合物及主要代谢途径,本研究分别以一年生枳壳（Poncirus trifoliata（L.）Raf.）和枳橙（Citrus.sinensis（L.）Osbeck×P.trifoliata（L.）Raf.）作为砧木与一年生纽荷尔脐橙（C.sinensis Osbeck）嫁接,嫁接10个月后进行4℃冷害胁迫实验,分别在胁迫0,24,72,120 h采摘上、中、下部位的叶片为实验材料,利用静态顶空气相色谱-质谱联用（SHS-GC-MS）技术检测其挥发性化合物,电喷雾萃取电离质谱法（EESI-MS）和超高效液相串联四级杆飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）检测非靶向代谢产物,高效液相检测酚类化合物。并利用主成分分析（PCA）和聚类分析（CA）等化学计量学方法对数据进行处理,分析差异化合物,并对代谢物进行了定性。主要研究结果如下。1.砧木为枳橙的脐橙苗24 h时表现出叶片微卷曲,72 h时叶片明显卷曲,120 h时叶片卷曲加剧且顶芽萎蔫。砧木为枳壳的脐橙苗24 h和72 h时没有明显表型变化,120 h时叶片卷曲。... 

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
    1.1 概述
    1.2 脐橙种植现状
    1.3 脐橙代谢产物研究进展
    1.4 柑橘非生物胁迫研究进展
    1.5 代谢组学的研究方法
    1.6 本文主要研究内容
    1.7 技术路线图
第2章 两种脐橙冷害胁迫下表型及总酚总黄酮变化
    2.1 实验材料与方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 化学试剂
        2.1.3 实验仪器
        2.1.4 冷害胁迫
        2.1.5 样品提取
        2.1.6 总黄酮含量的测定
        2.1.7 总酚含量的测定
    2.2 结果与讨论
        2.2.1 两种脐橙在冷害胁迫下表型变化
        2.2.2 两种脐橙在冷害胁迫下总黄酮含量的变化
        2.2.3 两种脐橙在冷害胁迫下总酚含量的变化
    2.3 本章小结
第3章 SHS-GC-MS检测冷害胁迫下脐橙的挥发性成分
    引言
    3.1 实验材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 化学试剂
        3.1.3 实验仪器
        3.1.4 样品准备
        3.1.5 SHS-GC-MS检测条件
    3.2 结果与讨论
        3.2.1 样品的色谱图
        3.2.2 砧木为枳壳的脐橙在冷害胁迫下挥发性化合物的变化
        3.2.3 砧木为枳橙的脐橙在冷害胁迫下挥发性化合物的变化
        3.2.4 砧木为枳壳的脐橙在冷害胁迫下挥发性化合物的PCA分析
        3.2.5 砧木为枳橙的脐橙在冷害胁迫下挥发性化合物的PCA分析
        3.2.6 两种脐橙在冷害胁迫下挥发性化合物的差异化合物
    3.3 本章小结
第4章 EESI-MS检测冷害胁迫下脐橙的非靶向代谢产物
    引言
    4.1 实验材料与方法
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 化学试剂
        4.1.3 实验仪器
        4.1.4 材料提取
        4.1.5 EESI-MS检测条件
        4.1.6 统计分析
    4.2 结果与讨论
        4.2.1 冷害胁迫下两种脐橙的EESI-MS分析
            4.2.1.1 砧木为枳壳的脐橙叶EESI-MS谱图
            4.2.1.2 砧木为枳橙的脐橙叶EESI-MS谱图
        4.2.2 冷害胁迫下两种脐橙EESI-MS数据PCA分析
            4.2.2.1 砧木为枳壳的脐橙上、中、下叶在不同时间的PCA分析
            4.2.2.2 砧木为枳橙的脐橙上、中、下叶在不同时间的PCA分析
        4.2.3 冷害胁迫下两种脐橙叶的化合物鉴定
    4.3 本章小结
第5章 UPLC-Q-TOF-MS检测冷害胁迫下脐橙代谢产物
    5.1 实验材料与方法
        5.1.1 实验材料
        5.1.2 化学试剂
        5.1.3 实验仪器
        5.1.4 样品准备
        5.1.5 UPLC-Q-TOF-MS检测条件
        5.1.6 数据处理
    5.2 结果与讨论
        5.2.1 冷害胁迫下两种脐橙的PCA分析
            5.2.1.1 砧木为枳壳的脐橙PCA分析
            5.2.1.2 砧木为枳橙的脐橙PCA分析
        5.2.2 冷害胁迫下两种脐橙差异代谢物的鉴定
        5.2.3 PCA中化合物的变化
    5.3 本章小结
第6章 HPLC法测定冷害胁迫下脐橙叶酚类化合物
    引言
    6.1 实验材料与方法
        6.1.1 实验材料
        6.1.2 化学试剂
        6.1.3 实验仪器
        6.1.4 样品准备
        6.1.5 标准品溶液的配制
        6.1.6 HPLC检测条件
    6.2 结果与讨论
        6.2.1 HPLC测定波长的选择
        6.2.2 HPLC方法学验证
            6.2.2.1 线性关系、检出限、定量限
            6.2.2.2 方法重复性、仪器精密度、样品稳定性及加标回收率
        6.2.3 冷害胁迫下两种脐橙酚类化合物的变化
            6.2.3.1 砧木为枳壳的脐橙酚类化合物的变化
            6.2.3.2 砧木为枳橙的脐橙酚类化合物的变化
            6.2.3.3 两种不同砧木的脐橙酚类化合物的热图分析
    6.3 本章小结
第7章 结论与展望
    7.1 结论
    7.2 展望
致谢
参考文献
附录
攻读学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
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[2]秋冬季节柿属植物树体内酚类物质含量的变化[J]. 冷平,张国军,吴晓云,齐建勋.  中国农业大学学报. 2001(01)
[3]Ca2+信号系统对低温下柑橘膜脂过氧化和抗氧化酶的影响[J]. 李新国,张建霞,孙中海.  广西植物. 2007(04)
[4]低纬高原地区UV-B辐射对报春花类黄酮含量的影响[J]. 罗丽琼,陈宗瑜,丁金玲,周平.  云南农业大学学报. 2007(02)
[5]不同纬度产地纽荷尔脐橙果实品质状况初步研究[J]. 鲍江峰,夏仁学,邓秀新,彭抒昂,刘永忠,马湘涛,张红艳.  亚热带植物科学. 2006(01)
[6]枳属种质遗传多样性及其与近缘属植物亲缘关系的SSR和cpSSR分析[J]. 龚桂芝,洪棋斌,彭祝春,江东,向素琼.  园艺学报. 2008(12)
[7]桔园环境条件与脐橙冻害的关系[J]. 谢远玉,王丽平,钟文勇,廖红玲,赖晓桦.  中国南方果树. 2010(05)
[8]雌激素类内分泌干扰物的液相色谱-质谱分析样品前处理方法[J]. 严炜,林金明.  分析化学. 2010(04)
[9]5种市售脐橙果实香气成分的主成分分析[J]. 唐会周,明建.  食品科学. 2011(20)
[10]杠柳幼苗对不同强度干旱胁迫的生长与生理响应[J]. 安玉艳,梁宗锁,郝文芳.  生态学报. 2011(03)



本文编号：3706543