疆夜蛾Plus-C气味结合蛋白PsauOBP7的组织表达谱及配体结合特性分析

发布时间:2022-12-22 21:26
  【目的】明确疆夜蛾Peridroma saucia Plus-C气味结合蛋白PsauOBP7在不同化学感受器官中的表达谱,解析PsauOBP7重组蛋白的气味结合特异性。【方法】通过qRT-PCR检测PsauOBP7在疆夜蛾雌蛾和雄蛾的触角、口器、足和翅中的表达谱。原核表达并纯化PsauOBP7重组蛋白,利用Western blot检测PsauOBP7在疆夜蛾不同龄期幼虫头部及成虫不同组织中的表达情况;通过荧光竞争结合实验检测PsauOBP7重组蛋白对39种气味化合物的结合能力。【结果】成功表达并纯化PsauOBP7重组蛋白。qRT-PCR及Western blot检测显示PsauOBP7表达于4-6龄幼虫头部及雌雄成虫的触角、口器、足和翅中。荧光竞争结合实验显示PsauOBP7与反-2-己烯醛的结合能力最强,Ki=1.4μmol/L。此外,PsauOBP7与5种酯类化合物乙酸月桂酯、顺-3-己烯乙酸酯、乙酸苯乙酯、苯甲酸己酯和肉桂酸甲酯有一定的结合能力,Ki值分别为5.7, 6.5, 8.9, 9.5和10.2μmol/L。PsauOBP7与... 

【文章页数】:10 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 供试昆虫
    1.2 PsauOBP7的克隆
    1.3 PsauOBP7的序列分析
    1.4 PsauOBP7在疆夜蛾成虫中的组织表达谱qRT-PCR分析
    1.5 PsauOBP7的原核表达及纯化
    1.6 PsauOBP7在疆夜蛾成虫各组织中表达的Western blot检测
    1.7 荧光竞争结合实验
    1.8 数据分析
2 结果
    2.1 PsauOBP7基因的克隆及序列分析
    2.2 PsauOBP7在疆夜蛾成虫中的组织表达谱
    2.3 PsauOBP7的重组表达及纯化
    2.4 PsauOBP7在疆夜蛾成虫不同化学感受器官中的表达
    2.5 PsauOBP7在疆夜蛾幼虫头部中的表达
    2.6 荧光竞争性结合实验分析重组蛋白PsauOBP7的配体结合特性
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3724071

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