氟胺氰菊酯对西方蜜蜂幼虫发育、工蜂生存能力及肠道菌群的影响

发布时间:2023-03-24 01:59
  本研究旨在研究3个低浓度氟胺氰菊酯对西方蜜蜂幼虫发育、工蜂生存能力及肠道微生物群落结构的影响,为蜜蜂的健康养殖提供理论参考。实验通过饲喂法,从2日龄幼虫起每天用微量进样器分别给小幼虫饲喂2μL含有氟胺氰菊酯0.5、5和50mg/kg的糖水,用含丙酮体积0.025%的糖水作对照组,并进行标记,直到幼虫封盖。测定各组幼虫封盖率、6日龄幼虫解毒酶活力及其总蛋白,观察氟胺氰菊酯对幼虫发育的影响;待实验组工蜂羽化出房后,按原来分组及饲喂含有不同浓度氟胺氰菊酯的糖水,饲喂7天后,采集7日龄工蜂肠道微生物进行宏基因组测序,同时利用蜜蜂无限射频技术(Radio frequency identification,RFID)监测各组工蜂自然出巢归巢和定距离放飞归巢能力,分析氟胺氰菊酯对工蜂归巢能力和肠道菌落的影响;另外,通过荧光定量PCR分析氟胺氰菊酯对工蜂不同日龄段(1日龄,7日龄,20日龄)头部免疫、解毒及学习记忆相关基因表达的影响。幼虫发育测试结果显示,当食物中氟胺氰菊酯达到50mg/kg,会降低幼虫的封盖率,但四个实验组之间刚封盖幼虫体重差异不显著;当食物中氟胺氰菊酯达到50mg/kg时,会提高幼...

【文章页数】:60 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 蜜蜂的重要价值
    1.2 蜂群衰竭失调现象
    1.3 常见杀螨剂的种类及危害
    1.4 氟胺氰菊酯
        1.4.1 氟胺氰菊酯的简介
        1.4.2 氟胺氰菊酯的毒性
        1.4.3 氟胺氰菊酯在蜂群的残留情况
        1.4.4 氟胺氰菊酯的作用机理
        1.4.5 氟胺氰菊酯对工蜂的影响
        1.4.6 氟胺氰菊酯对蜂王和雄蜂的影响
    1.5 本论文研究意义
第二章 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂幼虫发育的影响
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 试验动物
        2.2.2 主要试剂及器材
        2.2.3 药物配制
        2.2.4 幼虫培育及药物处理
        2.2.5 幼虫体重及封盖率的测定
        2.2.6 幼虫解毒酶活性的测定
        2.2.7 幼虫总蛋白和超氧化物歧化酶活力的测定
        2.2.8 羽化率及出生重的测定
    2.3 数据统计分析
    2.4 实验结果
        2.4.1 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂幼虫体重及封盖率的影响
        2.4.2 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂幼虫解毒酶活力的影响
        2.4.3 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂幼虫SOD酶活性的影响
        2.4.4 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂幼虫总蛋白浓度的影响
        2.4.5 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂工蜂羽化率及初生重的影响
    2.5 讨论
第三章 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂工蜂自然出巢归巢及定距离放飞归巢行为特性的影响
    3.1 引言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 实验动物
        3.2.2 主要试剂及仪器
        3.2.3 药物配制
        3.2.4 幼虫培育及药物处理
        3.2.5 工蜂药物处理
        3.2.6 蜜蜂RFID系统组装
        3.2.7 贴电子标签并进行动态监测
        3.2.8 定距离放飞观察蜜蜂归巢率
    3.3 数据统计分析
    3.4 实验结果
        3.4.1 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂首次出巢率的影响
        3.4.2 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂平均采集次数的影响
        3.4.3 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂平均寿命的影响
        3.4.4 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂归巢能力的影响
    3.5 讨论
第四章 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂免疫、解毒及学习记忆相关基因表达的影响
    4.1 引言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 主要试剂及器材
        4.2.2 qPCR测定蜜蜂免疫、解毒及学习记忆相关基因的表达量
            4.2.2.1 样品采集
            4.2.2.2 总RNA的提取以及c DNA的合成
            4.2.2.3 荧光定量PCR的设计及荧光定量
    4.3 数据统计分析
    4.4 结果
        4.4.1 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂工蜂免疫相关基因表达的影响
        4.4.2 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂工蜂解毒相关基因表达的影响
        4.4.3 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂工蜂学习记忆相关基因表达的影响
    4.5 讨论
第五章 氟胺氰菊酯对西方蜜蜂肠道菌落结构的影响
    5.1 引言
    5.2 材料与方法
        5.2.1 试验动物
        5.2.2 主要试剂及器材
        5.2.3 药物配制
        5.2.4 幼虫培育及药物处理
        5.2.5 工蜂药物处理
        5.2.6 样品采集
        5.2.7 建库测序
    5.3 结果分析
        5.3.1 测序结果预处理
        5.3.2 Metagenome组装
        5.3.3 基因预测
        5.3.4 core-pan基因分析
        5.3.5 基因数目差异分析
        5.3.6 物种注释
        5.3.7 物种丰度分析
        5.3.8 基于门水平的物种NMDS结果分析
        5.3.9 物种水平基因数目及相对丰度聚类分析
    5.4 讨论
第六章 结论与展望
    6.1 主要结论
    6.2 研究展望
参考文献
攻读硕士期间已发表论文和主要获奖情况
    Ⅰ.已发表论文情况
    Ⅱ.主要获奖情况
致谢



本文编号:3769212

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