土壤抑制寡孢节丛孢孢子萌发的蛋白组研究以及苯甲醛、氨气抑制孢子萌发的分子机制初探

发布时间：2023-04-09 18:17

　　植物病原线虫每年给农业造成的损失十分严重,生防真菌是重要的线虫生防资源。但是土壤抑菌作用使生防真菌的孢子很难在土壤中萌发生长繁殖,在实际的应用中存在着防效低和不稳定的问题。为了研究土壤抑菌作用抑制真菌孢子萌发的分子机制,首先,本论文以捕食线虫真菌Arthrobotrys oligospora为研究对象,通过iTRAQ-LC-MS/MS蛋白组学技术测定了被土壤悬液抑制萌发的孢子的蛋白组,在蛋白组层面分析土壤抑制寡孢孢子萌发的分子机制。其次,在实验室前期研究已经做的土壤抑菌物质苯甲醛和氨气分别抑制寡孢节丛孢分生孢子萌发的蛋白组数据中,我们筛选出了 6个重要的与孢子萌发相关的蛋白编码基因(AOL_s00169g229、AOL-s00215g160、AOL-s00075g181、AOL-s00083g51、AOL_s00075g106、AOL_s00215g7)利用同源重组的方法进行了敲除。之后对敲除株的生长速率、产孢情况、孢子萌发率以及抗逆性进行了研究。本研究为最终揭示土壤抑制寡孢节丛孢孢子萌发的分子机理进行了一些有益的探索。主要研...

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 植物病原线虫的危害和防治
        1.1 植物病原线虫的危害
        1.2 线虫的生物防治
    2 土壤抑菌作用的研究
        2.1 土壤抑菌作用的普遍性
        2.2 土壤抑真菌作用机理的两种假说
        2.3 土壤抑菌机理的研究
    3 真菌分生孢子萌发的分子机制研究进展
        3.1 cAMP信号途径参与真菌孢子萌发过程研究
        3.2 Ca²⁺信号在孢子萌发过程中的研究
        3.3 Ras/MAPK信号途径在孢子萌发过程中的研究
        3.4 蛋白质合成与孢子萌发
    4 本论文的选题依据和研究意义
第二章 土壤抑制寡孢节丛孢孢子萌发的蛋白组研究
    1 前言
    2 实验材料和实验方法
        2.1 实验材料和设备
        2.2 实验方法
    3 实验结果
        3.1 土壤对寡孢节丛孢孢子萌发的抑制
        3.2 孢子蛋白关联样本的检测
        3.3 蛋白样本的测序以及差异蛋白筛选
    4 分析和讨论
第三章 寡孢节丛孢孢子萌发相关基因的敲除
    1 前言
    2 实验材料及仪器
        2.1 实验菌株和载体
        2.2 实验用溶液及培养基
        2.3 实验试剂
        2.4 实验仪器和设备
    3 研究方法和步骤
        3.1 基因编号
        3.2 构建敲除载体
        3.3 原生质体的制备及其转化
        3.4 转化子基因组提取
        3.5 转化子PCR验证
    4 实验结果与分析
        4.1 目的片段扩增,潮霉素基因扩增及酶切pRS426质粒检测
        4.2 敲除载体质粒转化大肠杆菌转化子的验证
        4.3 敲除全长片段扩增
        4.4 寡孢节丛孢敲除转化子PCR验证
    5 讨论
        5.1 敲除载体的构建及原生质体制备转化
        5.2 转化子的筛选验证
    6 小结
第四章 寡孢节丛孢野生型与敲除型的菌株表型特征比较和分析
    1 前言
    2 实验材料
        2.1 实验菌株
    3 实验方法
        3.1 菌丝的生长速率和形态观察
        3.2 产孢子数量比较
        3.3 孢子萌发率比较
        3.4 苯甲醛对229敲除株孢子萌发的影响
    4 实验结果
        4.1 生长速率的比较
        4.2 产孢量的比较
        4.3 孢子萌发率的比较
    5 讨论
        5.1 敲除株与野生型菌株生长速率的比较
        5.2 产孢情况比较
        5.3 孢子萌发率比较
全文小结及展望
参考文献
附录
致谢



本文编号：3787502