稻瘟病隐性抗病基因pi55的定位与克隆

发布时间：2023-04-22 07:11

　　稻瘟病是影响水稻生产的三大水稻病害之一,利用抗病基因对病害进行控制已经成为最主要且最经济环保的解决途径。因此,挖掘并利用新的抗病基因对水稻育种至关重要。前期本研究室在水稻骨干品种粤晶丝苗2号的8号染色体上定位了稻瘟病隐性抗病基因pi55。为了对pi55进行克隆以及功能验证,本研究开展以下几方面的工作,获得的主要结果如下:1、pi55的精细定位及物理图谱的构建在前期的研究中,已经将pi55界定在标记H2^H66之间1.9 cM的遗传区域内,二者间的物理距离约为152 kb。为了对其进行精细定位,本研究在此区域内开发了一系列分子标记,并进行连锁分析,最终将pi55定位于L11-10^Y12之间约20 kb区域。将与目的基因紧密连锁的分子标记锚定在参考品种日本晴和Zhenshan 97上,构建了pi55的电子物理图谱。2、候选基因的预测及序列分析利用基因预测软件对参考品种日本晴及ZS97进行候选基因的预测。结果表明,在目标区域内共有5个候选基因分别为pi55-1、pi55-2、pi55-3、pi55-4、pi55-5。随后对抗病亲本R9-1及感病亲本Q...

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
缩写词及其英汉对照
1 前言
    1.1 稻瘟病抗病基因的研究意义
    1.2 稻瘟病抗病基因的定位与克隆
        1.2.1 稻瘟病抗病基因的定位研究
        1.2.2 稻瘟病抗病基因的克隆
    1.3 稻瘟病隐性抗病基因的研究现状
    1.4 本研究的目的及主要内容
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 植物材料与菌物材料
        2.1.2 菌株和载体
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 植物DNA的抽提
        2.2.2 分子标记的开发及利用
        2.2.3 连锁分析及物理图谱的构建
        2.2.4 候选基因预测及序列分析
        2.2.5 候选基因的克隆
        2.2.6 候选基因的遗传转化
3 结果
    3.1 隐性抗病基因pi55的精细定位
        3.1.1 隐性抗病基因pi55的精细定位
        3.1.2 pi55的物理图谱的构建
    3.2 候选基因的预测及序列分析
        3.2.1 候选基因的预测
        3.2.2 候选基因的序列分析
    3.3 候选基因的克隆
        3.3.1 候选基因功能获得性载体的构建
        3.3.2 候选基因功能丧失性载体的构建
    3.4 候选基因的功能获得性、缺失遗传转化
        3.4.1 转化质粒在农杆菌中的稳定性鉴定
        3.4.2 候选基因的遗传转化及转基因植株的获得
        3.4.3 T0代转化植物的鉴定
4 讨论
    4.1 稻瘟病抗病基因的快速定位策略
    4.2 稻瘟病抗病基因的克隆与抗病基因的分类
    4.3 隐性稻瘟病抗病基因pi55的功能预测及应用
    4.4 下一步研究的设想
致谢
参考文献
附录A
附录B 本研究所构建载体总表



本文编号：3797168