印楝内生放线菌的次生代谢产物分离鉴定及生物活性研究

发布时间:2024-03-18 18:51
  本论文以从印楝中分离出的放线菌菌株R6为研究对象,系统的研究了该菌株的分类地位和发酵液抑菌活性,菌株R6的发酵培养基和发酵条件优化,发酵液中抑菌活性物质的提取、分离和纯化,对分离纯化出的单体化合物进行结构鉴定及解析,以及单体化合物抑菌活性测定和对作物安全性的测定。主要研究成果如下:1.从印楝中分离筛选具高抑菌活性的内生放线菌R6。采用组织法和标准法从印楝叶片和果仁中分离纯化内生真菌114株,内生细菌26株,内生放线菌85株。采用平板对峙法,测试85株内生放线菌对13种植物病原真菌的抑菌活性,试验结果表明24株放线菌具有杀真菌活性。采用平板对峙法和喷雾法分别对24株放线菌进行细菌抑菌活性和杀虫活性测定,试验结果表明,抑菌活性较强的菌株G20、G27、G49、G60和R6 5株菌株杀虫活性较弱。采用薄层色谱法对抑菌活性较强的5株菌株进行化学初筛,综合抑菌活性和化学筛选的试验结果,确定具有高杀菌活性,产生丰富物质的菌株R6为目标菌株。2.通过传统分类学和生物学鉴定菌株R6为密旋链霉菌。对放线菌菌株R6的形态学特征和培养特征进行观察,对生理生化特性进行测定,对16S r DNA序列进行分析比对...

【文章页数】:157 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 植物内生放线菌研究进展(文献综述)
    1.1 放线菌的分类概况
    1.2 植物内生放线菌的研究概况
    1.3 植物内生放线菌次生代谢产物研究概况
    1.4 印楝的研究进展
    1.5 本论文的立题依据和设计思路
第二章 印楝内生放线菌筛选及菌株R6的分类鉴定
    2.1 材料与方法
        2.1.1 供试材料
        2.1.2 试验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 印楝内生菌的分离、纯化和保藏
        2.2.2 放线菌菌株初筛结果
        2.2.3 化学初筛
        2.2.4 放线菌菌株R6的形态学特征观察
        2.2.5 放线菌菌株R6的培养特征观察
        2.2.6 放线菌菌株R6的生理生化特征测定结果
        2.2.7 放线菌菌株R6的16SrDNA序列分析结果
    2.3 本章小结
第三章 印楝内生放线菌菌株R6发酵条件和发酵培养基优化
    3.1 材料与方法
        3.1.1 供试材料
        3.1.2 试验方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 发酵条件的优化结果
        3.2.2 不同发酵培养基优化结果
    3.3 本章小结
第四章 放线菌菌株R6次生代谢产物的分离纯化
    4.1 材料与方法
        4.1.1 供试材料
        4.1.2 试验方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 放线菌菌株R6粗提物的制备及抑制作用结果
        4.2.2 放线菌菌株R6粗提物的薄层层析检测结果
        4.2.3 菌株R6粗提物一级硅胶柱层析各馏分纯化及抑菌结果
        4.2.4 菌株R6-C1馏分分离纯化结果与分析
        4.2.5 菌株R6-C2馏分分离纯化结果与分析
    4.3 本章小结
第五章 放线菌菌株R6次生代谢产物的结构鉴定及活性检测
    5.1 材料与方法
        5.1.1 供试材料
        5.1.2 试验方法
    5.2 结果与分析
        5.2.1 聚酮类化合物Y1、Y2结构鉴定
        5.2.2 大环内酯类化合物Y3结构鉴定
        5.2.3 单体化合物对植物病原菌抑制作用结果
    5.3 本章小结
第六章 聚酮类化合物Y1对番茄灰霉病的生物活性测定及安全性评价
    6.1 材料与方法
        6.1.1 供试材料
        6.1.2 试验方法
    6.2 结果与分析
        6.2.1 聚酮类化合物Y1对番茄灰霉病菌菌丝生长的影响
        6.2.2 聚酮类化合物Y1对番茄灰霉病菌孢子萌发的影响
        6.2.3 聚酮类化合物Y1对番茄灰霉病菌分生孢子产生的影响
        6.2.4 聚酮类化合物Y1对番茄灰霉病菌菌核产量的影响
        6.2.5 聚酮类化合物Y1对番茄灰霉病菌菌丝生物量的影响
        6.2.6 聚酮类化合物Y1对番茄灰霉病活体生物活性的测定
        6.2.7 聚酮类化合物Y1对盆栽番茄的安全性测定结果
    6.3 本章小结
第七章 结论与讨论
    7.1 印楝内生放线菌筛选及菌株R6的分类鉴定
    7.2 放线菌菌株R6发酵工艺优化
    7.3 放线菌菌株R6中次生代谢产物的分离和鉴定
    7.4 聚酮类化合物Y1对番茄灰霉病的生物活性测定及安全性评价
    7.5 本论文的创新点
参考文献
附录
致谢
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本文编号:3931659

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