稻瘟病菌转录因子MoAp1和MoBzip10靶鉴定及其在致病过程中的功能分析

发布时间：2024-03-30 09:40

　　水稻是世界上最重要的粮食作物,为全球贡献了约30%的能量摄入。由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引发的稻癌瘟病对全球的稻谷产量带来巨大的损失,每年的粮食损失可以养活6000万的人口。稻瘟病菌的防治主要依赖于培育抗病品种和化学药剂开发,但该病菌易于发生变异,使抗病品种易丧失抗性。长时间使用单一的化学药剂使病原菌产生抗药性,导致原有的药剂因此失去药效。因此,如何控制稻瘟病的发生和寻找有效的防治方法一直是粮食安全生产上的难题。通过分子实验深入的解析稻瘟病菌的致病机制,不但可以为抗病育种提供新的策略,同时也对具有特异性靶标药物的开发具有指导意义,为稻瘟病的总体防治提供新的思路。本论文主要对致病相关的bZIP转录因子MoAp1和MoBzip10的靶基因进行鉴定,并对其在稻瘟病菌生长、产孢和致病过程中的功能进行分析,研究结果如下:本实验室前期的研究结果表明,转录因子MoAp1作为氧化应答器参与清除活性氧的过程从而靶稻瘟病菌的致病力。本文从MoAp1的转录组数据中鉴定到了一个基因MoTRX2,该基因的起始密码子上游500 bp的区域内具有MoAp1的结合位点。在敲除MoTRX2后,突...

【文章页数】：130 页

【部分图文】：

图１－２?ＭｏＡｐｌ在Ｍｏ７７ＬＹ２启动子区结合位点分析??Ｆｉｇ．?１－２?Ｂｉｎｄｉｎｇ?ｓｉｔｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＭｏＡＰｌ?ｉｎ?ＭｏＴＲＸ２?ｐｒｏｍｏｔｅｒ?ｒｅｇｉｏｎ．??

区具有ＭｏＡｐｌ的结合位点。通过荧光定量实验对Ｍｏ７７ＬＹ２在ＭｏＡｐｌ缺失突变体中的表??达水平进行再验证，结果显示在ＡＭｏｏｐ／突变体中Ｍｏ７７ＬＹ２表达量下降，这同前期转录??组数据相一致（图１－２Ａ）。通过原核表达的方式获得ＭｏＡｐｌ?：：ＧＳＴ蛋白，并利用ＧＳＴ?ｂｅａ....

图１－５?ＭｏＴｒｘ２参与致病过程??－

?菌丝仅局限在单个水稻细胞内，不能扩展到相邻细胞中，并且侵染菌丝分支明显减少??（图１－６Ｂ），这表明ＭｏＴｒｘ２参与侵染菌丝扩展过程。??＾?＾１－０）?°?，?〇＞?＾?＾０５??＾?１?Ｈｉ?＾?１?１?＿?，?１?１?１｜??Ｉｌｌｉ?ＩＩ??翻，１?＿?ａＴ￣２?Ｓ?次....

图１－７过表达Ｍ？７７＾Ｙ２不能回补ＡＡ／ｏａ；？／的致病性缺陷??

来观察是否能够回补ＡＭｏｏｐ／突变体的致病力缺陷。通过荧光定??量的方法对表达菌株进行筛选，最终选择ＡＭｏｏｐ／／Ｍｏ７７？Ｚ２＃２和ＡＭｏｏｐ／／Ｍｏ７７ＬＯ肋??两个菌株进行致病性实验（图１－７Ａ）。将两个过表达菌株、ＡＭｏａｐ／和Ｇｕｙｌｌ菌株进行??两天的摇培

图１－８?Ａ／ｏ７７？Ｚ２缺失突变体的生长速率减慢??

ＡＭｏ／ｒｘ２和回补菌株分别接种于ＣＭ和ＭＭ平板上，并放于２８?°Ｃ的培养箱中黑暗培??养７天，测量菌落直径并拍照。数据显示，当ＭｏＩＸＯ基因缺失后，在ＣＭ上生长速??度同野生相比显著减慢（图１－８），并且经过统计分析发现具有极显著（尸＜?０．０１）差异（表??１－１）。在ＭＭ培....

本文编号：3942168