双生病毒复制相关寄主因子及其卫星DNAβ复制顺式作用元件鉴定和功能分析

发布时间：2024-06-30 08:53

　　双生病毒是一类在世界范围内广泛发生的植物单链环状DNA病毒,其中菜豆金色花叶病毒属病毒(begomoviruses)种类最多,危害最为严重。双生病毒通过编码的复制相关蛋白Rep招募寄主DNA复制机器,在侵染的植物细胞核内以滚环复制模式进行基因组复制,但该过程涉及的寄主因子及其功能尚缺乏深入研究。此外,begomoviruses通常伴随有一类基因组大小约为辅助病毒一半的卫星分子,称为betasatellite。辅助病毒与betasatellite的复合侵染常常是引起重要病害症状的原因。为了更好地探究双生病毒复制及致病的机理,以及了解begomoviruses伴随betasatellite的复制、进化分子机制,本文筛选了与菜豆金色花叶病毒属病毒复制相关蛋白Rep互作的寄主因子并鉴定了 betasatellite复制顺式作用元件,取得了以下研究结果:1 Begomoviruses伴随的betasatellite复制相关顺式作用元件的鉴定及制机理研究Begomoviruses可反式复制同源或异源betasatellites,其复制缺乏显著的特异性;但当同源及异源的卫星共同存在时,辅助病毒倾向于...

【文章页数】：270 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．３双生病毒ＤＮＡ滚环复制（ＲＣＲ）模型

双生病毒侵染寄主细胞后，在病毒自身编码的Ｒｅｐ作用下，招募利用寄主??细胞ＤＮＡ复制机器在细胞核内进行子代病毒基因组的大量增殖。大量研究表明，??双生病毒的主要复制模式为滚环复制（Ｒｏｌｌｉｎｇ－ｃｉｒｃｌｅ?ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ，ＲＣＲ）（图１．３）??（Ｓａｕｎｄｅｒｓｅｔ....

图１．４双生病毒的重组依赖型复制（ＲＤＲ）模型

??图１．３双生病毒ＤＮＡ滚环复制（ＲＣＲ）模型。首先病毒单链基因组ｓｓＤＮＡ转变??成双链（ｄｓ）复制形态（ＲＦ）；然后复制相关蛋白（Ｒｅｐ）通过自身相互作用形??成寡聚体，并与位于病毒基因组基因间隔区的ｉｔｅｒｏｎｓ重复序列结合，在茎环结??构的９碱基保守位点进行切割；Ｒｅｐ....

图１．５双生病毒复制相关蛋白（Ｒｅｐ）的结构示意图

也能增强病毒晚期基因如ＣＰ、ＭＰ的转录（Ｈｏｆｅｒｅｔａｌ．，?１９９２）。同时，Ｒｅｐ通??过下调自身的转录而增加ＴｒＡＰ和ＲＥｎ的表达（Ｓｈｕｎｇｅｔａｌ．，２００７）。Ｒｅｐ蛋??白的Ｎ端包含３个保守的结构域，分别称为ｍｏｔｉｆｌ、ＩＩ、ＩＩＩ?（图１．５）。其中，??１２....

图１．６?Ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ的基因组结构

ｒｅｇｉｏｎ缺失突变体引起的病毒症状有所减轻，同时病毒ＤＮＡ积累量减少（Ｔａｏ??ｅｔ?ａｌ．，?２００４）。ＤＮＡｐ基因组互补链上编码唯——个位置和序列相对保守的ＰＣ１??蛋白（图１．６）。ＰＣＩ是一个多功能蛋白，它参与病害复合体致病性，抑制ＴＧＳ和??ＰＴＧＳ以及抑制寄主植物....

本文编号：3998620